骨髄微小環境におけるＡＭＬ１／ＲＵＮＸ１及び癌抑制遺伝子ＷＴＸの役割の解明

• Project Area: Integrative Research on Cancer Microenvironment Network
• Project/Area Number: 23112504
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Osaka University (2012); The University of Tokyo (2011)
• Principal Investigator: 上久保 靖彦 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60548527)
• Project Period (FY): 2011-04-01 – 2013-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥8,840,000 (Direct Cost: ¥6,800,000、Indirect Cost: ¥2,040,000); Fiscal Year 2012: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000); Fiscal Year 2011: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
• Keywords: ASXL1遺伝子 / RUNX1 / 白血病 / 骨髄ニッチ / AML1/RUNX1 / 造血幹細胞 / 骨髄異形成症候群 / 家族性血小板減少症 / ノックアウトマウス / ASXL1

Outline of Annual Research Achievements

A：マウスジェネティクスを駆使した異常骨髄ニッチモデルの解析
1.骨前駆細胞特異的AML1欠損マウス（Col1-Cre-AML1 fl/flモデル）の樹立および2.骨前駆細胞特異的AML1欠損マウスのフェノタイプ解析において、①造血幹細胞プールサイズ、自己複製能、細胞周期、細胞死の解析　②骨前駆細胞のフェノタイプの解析及び骨前駆細胞発現AML1の下流遺伝子単離　③骨前駆細胞特異的AML1欠損マウスの骨髄異形成症候群や白血病移行の検証、異常造血細胞の由来検索、異常造血細胞移植実験（造血系再構築、二次性白血病発症の検証）を行ったところ、RUNX1cKO及びInv16cKIのマウスジェネティクスで、RUNX1欠失にて大幅に白血病発症率の低下を認めること、一方骨髄微小環境においてはRUNX1欠失にて骨髄幹細胞（KSL分画）が著明に減少するが、それだけでは白血病発症は認めない事を見出した。B：骨前駆細胞培養実験系の構築と骨髄ニッチの可視化については、1. 新規骨前駆細胞・造血幹細胞共培養システムを用いた実験　2. レトロウイルスshRNAiにより改変された骨前駆細胞・造血幹細胞共培養実験を行い完成した。
B：ASXL1コンディショナルミューテーションノックインマウスの樹立
現在ASXL1コンディショナルノックインターゲットES細胞を樹立し、既にキメラマウスを樹立完成したことから目標はほぼ達成した。。ミューテーションはヒト白血病症例に高頻度に認めれるEXON12に設定した。今後ヘテロマウス、ホモマウスを樹立し、ASXL1の正常造血における働き、ミューテーションによる白血病発症を再現し、さらなる白血病発症機構の解明を行う。

Research Progress Status

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] A case of CD20-Positive peripheral T-cell lymphoma treated with rituximab and mutiagentchemotherapy. (2013)
  • Author(s): Kamata M, Sugaya M, Miyagaki T, Sonoda K, Ichimura Y, Mitsui H, Sato S, Kamikubo Y, Kurokawa M.
  • Journal Title: Int J Dermatol 2013 Volume: Mar3 Issue: 1 Pages: 1365-1366
  • DOI: 10.1111/j.1365-4632.2012.05483.x
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/gts/research_d.html
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Acute myeloid leukemia with cryptic CBFB-MYH11 type D. (2013)
  • Author(s): Takashi Kobayashi
  • Journal Title: Int J Clin Exp Pathol Volume: 6(1) Pages: 110-112
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The C-terminus of CBFβ-SMMHC is required to induce embryonic hematopoietic defects andleukemogenesis. (2013)
  • Author(s): Kamikubo Y, Hyde RK, Zhao L, Alemu L, Rivas C, Garrett LJ, Liu PP.
  • Journal Title: Blood 2013 Volume: 24 Issue: 4 Pages: 638-42
  • DOI: 10.1182/blood-2012-06-434688
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Erythroleukemia showing early erythroid and cytogenetic responses to azacitidine therapy (2013)
  • Author(s): Sho Hangai
  • Journal Title: Annals of Hematology Volume: 92 Issue: 5 Pages: 707-709
  • DOI: 10.1007/s00277-012-1603-2
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Primary gastrointestinal follicular lymphoma with histological transformation (2012)
  • Author(s): Sho Hangai
  • Journal Title: Annals of Hematology Volume: December12 Issue: 7 Pages: 1654-1655
  • DOI: 10.1007/s00277-012-1654-4
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation of induced pluripotent stem cells from primary chronic myelogenous leukemia (2012)
  • Author(s): Keiki Kumano
  • Journal Title: BLOOD Volume: 119 Issue: 26 Pages: 6234-6242
  • DOI: 10.1182/blood-2011-07-367441
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pituitary lymphoma developing within pituitary adenoma (2012)
  • Author(s): Ken Morita
  • Journal Title: Int J Hematol. Volume: 95(6) Issue: 6 Pages: 721-724
  • DOI: 10.1007/s12185-012-1075-0
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] C-KIT with D816Y/V Mutations Cooperate with CBFB-MYH11 to Accelerate Leukemogenesis (2012)
  • Author(s): Ling Zhao
  • Journal Title: BLOOD Volume: 119(6) Issue: 6 Pages: 1511-1521
  • DOI: 10.1182/blood-2011-02-338210
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation of Induced Pluripotent Stem Cells From Primary Chronic Myelogenous Leukemia Patient Sample (2012)
  • Author(s): 熊野恵城
  • Journal Title: Blood Volume: (In press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lymphoma with specific affinity to endocrine organs (2011)
  • Author(s): 森田剣
  • Journal Title: Ann Hematol. Volume: Nov 22 Issue: 7 Pages: 1149-1150
  • DOI: 10.1007/s00277-011-1372-3
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] C-KIT with D816Y/V Mutations Cooperate with CBFB-MYH11 to Accelerate Leukemogenesis in Mice (2011)
  • Author(s): Ling Zhao
  • Journal Title: Blood Volume: 119(6) Pages: 1511-21
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cas-L regulates myeloid cell motility and suppresses progression of leukemia induced by p210Bcr/Abl (2011)
  • Author(s): 黒川峰夫, 他
  • Journal Title: Cancer Science Volume: 102 Issue: 12 Pages: 2109-2117
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2011.02066.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Composite diffuse large B-cell lymphoma and CD20-positive peripheral T-cell lymphoma (2011)
  • Author(s): 山崎翔
  • Journal Title: Pathol Int Volume: 61(11) Issue: 11 Pages: 662-666
  • DOI: 10.1111/j.1440-1827.2011.02713.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Loss of AML1/Runx1 accelerates the development of MLL-ENL leukemia through downregulation of p19ARF (2011)
  • Author(s): 西本菜穂子
  • Journal Title: Blood Volume: 118(9) Pages: 2541-50
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 米国におけるunmet population を対象とした開発治験の動向とわが国の取り組み (2012)
  • Author(s): 上久保靖彦
  • Organizer: 第33回日本臨床薬理学会学術集会
  • Place of Presentation: 沖縄
  • Year and Date: 2012-11-29
  • Invited
• [Presentation] 遥かなるワシントンDC：私のNIH 研究留学活用法 (2012)
  • Author(s): 上久保靖彦
  • Organizer: 日米医学医療交流セミナー
  • Place of Presentation: 大阪
  • Invited
• [Presentation] 「新規白血病発症機構解明とNIH MLP/HTS による抗癌剤開発について (2012)
  • Author(s): 上久保靖彦
  • Organizer: 独立行政法人医薬基盤研究所研究振興部セミナー
  • Place of Presentation: 大阪
  • Invited
• [Presentation] KIT with D816 Mutations Cooperates with CBFB-MYH11 for Leukemogenesis in Mice (2011)
  • Author(s): Ling Zhao
  • Organizer: ASH
  • Place of Presentation: 米国(San Diego, California)
  • Year and Date: 2011-12-12
• [Presentation] コアバインディングファクター(CBF)白血病新規発症機構:RUNX1 Dominant Inhibition Independent Leukemogenesis (2011)
  • Author(s): 上久保靖彦
  • Organizer: JACLS(小児白血病研究会)総会
  • Place of Presentation: 大阪(招待講演)
  • Year and Date: 2011-05-14
• [Remarks] 大阪大学大学院医学系研究科遺伝子治療学
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/gts/
• [Remarks]
  • URL: http://www.u-tokyo-hemat.com/