ＥＢＶ感染がん細胞増殖を促進するウイルス遺伝子発現の分子機構とその制御

• Project Area: Conversion of tumor-regulation vector to intercept oncogenic spiral accelerated by infection and inflammation
• Project/Area Number: 23114512
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Aichi Cancer Center Research Institute
• Principal Investigator: 鶴見 達也 愛知県がんセンター(研究所), 腫瘍ウイルス学部, 部長 (90172072)
• Project Period (FY): 2011-04-01 – 2013-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥11,960,000 (Direct Cost: ¥9,200,000、Indirect Cost: ¥2,760,000); Fiscal Year 2012: ¥5,980,000 (Direct Cost: ¥4,600,000、Indirect Cost: ¥1,380,000); Fiscal Year 2011: ¥5,980,000 (Direct Cost: ¥4,600,000、Indirect Cost: ¥1,380,000)
• Keywords: EBV / 転写制御 / ウイルス / 癌遺伝子 / 転写 / JDP2 / C/EBP

Outline of Annual Research Achievements

本研究ではEBV陽性がん細胞維持に重要なLMP1及びBZLF1の遺伝子発現機構を明らかにすることを目的とした。
（１）潜伏感染II型におけるLMP１遺伝子の発現を調節する因子の同定：潜伏感染II型におけるウイルス癌遺伝子LMP1の発現の分子機構の一端を明らかにした。LMP1遺伝子の転写を制御する宿主因子を網羅的に同定するために、cDNA発現ライブラリーを用いたスクリーニングを遂行し、新規転写因子としてC/EBPεを同定した。LMP1には近位(ED-L1)、遠位(TR-L1)の二つのプロモーターが存在するが、近位のプロモーター上の特定部位にC/EBPが結合することで近位と遠位の両プロモーターを活性化することが分かった。C/EBP結合部位に変異を加えた組換えウイルスではLMP1の発現量が減少し、さらに、shRNAを用いてC/EBPをノックダウンさせると、LMP1タンパク質の発現量が減少することが分かった。
（２）EBV潜伏感染の維持に関与する転写因子の同定： BZLF1プロモターの発現制御がEBVの潜伏感染の維持とウイルス産生感染への再活性化の鍵を握っている。BZLF1プロモター(Zp)を活性化する新規宿主転写因子を同定する為に cDNA発現ライブラリーを用いたスクリーニングを遂行し、MEF2B, KLF、b-zip因子等を見いだしている。これらの結合部位に変異を導入した組替えEBV BACDNAをそれぞれ作成し、HEK293細胞にトランスフェクションすることによりそれぞれの組替えEBウイルスが潜伏感染する細胞株を樹立した。b-zip因子の結合部位に変異を持つEBV潜伏感染細胞ではBZLF1の発現量が顕著に低下したが、KLFの結合部位変異株ではあまり影響しなかった。MEF2の結合部位変異株ではBZLF1の発現量は顕著に低下した。

Research Progress Status

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Epstein-Barr virus deubiquitinase downregulates TRAF6-mediated NF-κB signaling during productive replication. (2013)
  • Author(s): Saito S, Murata T, Kanda T, Isomura H, Narita Y, Sugimoto A, Kawashima D, Tsurumi T.
  • Journal Title: Journal of Virology Volume: 87 Issue: 7 Pages: 4060-4070
  • DOI: 10.1128/jvi.02020-12
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epigenetic Histone Modification of Epstein-Barr virus BZLF1 Promoter during Latency and Reactivation in Raji Cells (2012)
  • Author(s): Murata T, Kondo Y, 8名
  • Journal Title: Journal of Virology Volume: 86 Issue: 9 Pages: 4752-4761
  • DOI: 10.1128/jvi.06768-11
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification and characterization of CCAAT enhancer-binding protein (C/EBP) as a transcriptional activator for Epstein-Barr virus oncogene latent membrane protein 1 (2011)
  • Author(s): Noda C, et.al
  • Journal Title: J.Biol.Chem. Volume: 286(49) Issue: 49 Pages: 42524-42533
  • DOI: 10.1074/jbc.m111.271734
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Involvement of Jun dimerization protein 2 (JDP2) in the maintenance of Epstein-Barr virus latency (2011)
  • Author(s): Murata T, et.al
  • Journal Title: J.Biol.Chem. Volume: 286(25) Issue: 25 Pages: 22007-22016
  • DOI: 10.1074/jbc.m110.199836
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Spatiotemporally different DNA repair systems participate in Epstein-Barr virus genome maturation (2011)
  • Author(s): Sugimoto A, et.al
  • Journal Title: J.Virol. Volume: 85(13) Issue: 13 Pages: 6127-6135
  • DOI: 10.1128/jvi.00258-11
  • Peer Reviewed
• [Presentation] EBV再活性化におけるエピジェネティックヒストン修飾 (2012)
  • Author(s): 鶴見達也
  • Organizer: 第71回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪）
  • Year and Date: 2012-11-15
• [Presentation] Induction of Epstein-Barr virus Oncogene LMP1 by Transcription Factor AP-2 in Epithelial Cells (2012)
  • Author(s): 鶴見達也
  • Organizer: 第71回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 札幌教育文化ホール（札幌）
  • Year and Date: 2012-09-19
• [Presentation] EBV陽性細胞の増殖を制御するウイルス遺伝子の発現調節機構 (2012)
  • Author(s): 鶴見達也
  • Organizer: 感染と癌 -感染癌のエフェクター分子とその標的-
  • Place of Presentation: 北海道大学学友会間（札幌）
  • Year and Date: 2012-09-18
  • Invited
• [Presentation] Epstein-Barr virus Replication Factory (2012)
  • Author(s): Tsurumi T
  • Organizer: The 11th Awaji International Forum on Infection and Immnity
  • Place of Presentation: 国際会議場（淡路）
  • Year and Date: 2012-09-11
  • Invited
• [Presentation] Cis- and trans-elements that affect reactivation of Epstein-Barr virus from latency (2012)
  • Author(s): Tsurumi T
  • Organizer: International Congress on Oncogenic Herpesviruses and Associated Diseases
  • Place of Presentation: Convention center (Philadelphia)
  • Year and Date: 2012-08-03
• [Presentation] Spatiotemporally different DNA repair systems, HRR and MMR, participate in Epstein-Barr virus genome maturation (2012)
  • Author(s): Tsurumi, T., et al
  • Organizer: Maintenance of Genome Stability 2012
  • Place of Presentation: Sheraton Nassau, Nassau, Bahamas
  • Year and Date: 2012-03-05