Publicly Offered Research
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
本研究課題では、B リンパ球分化のエピジェネティクス制御の分子機構を解明する。具体的には、B リンパ球分化を担う主要分化制御因子である Pax5 のエピジェネティックな遺伝子発現制御機構の解明を目指し、iChIP 法を利用することで、Pax5 遺伝子プロモーター領域に存在する分子、特に DNA および蛋白質の網羅的同定を行う。同定した分子については、分子生物学的手法を用いて、その機能を解明する。Pax5 遺伝子転写開始点近傍に LexA 結合配列が挿入された DT40 細胞に、タグを付けた LexA DNA 結合ドメイン (3xFNLDD) を恒常的に発現させた細胞株 (DT40/LexA-Pax5/3xFNLDD: DLPF) および、陰性対象として、同程度の3xFNLDDを発現しているが LexA 結合配列を持たない DT40 細胞株 (DT40/3xFNLDD: DF) を用いて、以下の実験を行った。(1) Pax5 遺伝子プロモーター領域に相互作用しているゲノム領域の同定：DLPF 細胞および DF 細胞を用い、iChIP 法と次世代シーケンスを組み合わせることで、Pax5 遺伝子プロモーター領域に相互作用しているエンハンサー等のゲノム領域の同定を試みた。その結果、Pax5 遺伝子プロモーター領域と相互作用しているゲノム領域の同定に成功した。(2) Pax5 遺伝子プロモーター領域に相互作用している蛋白質の同定：DLPF 細胞および DF 細胞を用い、iChIP 法と質量分析法を組み合わせることで、 Pax5 遺伝子プロモーター領域に相互作用している蛋白質の同定を試みた。その結果、Pax5 遺伝子プロモーター領域に結合する蛋白質の同定に成功した。同定した蛋白質の1つについて Pax5 遺伝子発現への作用について調べた結果、転写活性化に必要であることが判明した。
24年度が最終年度であるため、記入しない。
All 2013 2012 2011 Other
All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results) Presentation (4 results) Remarks (2 results)
ISRN Biochem.
Volume: 2013 Pages: 913273-913273
10.1155/2013/913273
Mol. Biol. Rep.
Volume: 39 Issue: 10 Pages: 9613-9619
10.1007/s11033-012-1825-3
Adv. Biosci. Biotechnol.
Volume: 3 Issue: 05 Pages: 626-629
10.4236/abb.2012.35081
PLoS ONE
Volume: 6 Issue: 10 Pages: e26109-e26109
10.1371/journal.pone.0026109
http://www.biken.osaka-u.ac.jp/lab/microimm/fujii/top/index.html
http://www.biken.osaka-u.ac.jp/lab/microimm/fujii/index.html
