酸化ストレスセンサーＫｅａｐ１と選択的蛋白質分解系による新規シグナリング複合体

Publicly Offered Research

Project Area	Structural basis of cell-signalling complexes mediating signal perception, transduction and responses
Project/Area Number	23121502
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	黒河博文東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80359546)
Project Period (FY)	2011-04-01 – 2013-03-31
Project Status	Completed (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help	¥8,970,000 (Direct Cost: ¥6,900,000、Indirect Cost: ¥2,070,000) Fiscal Year 2012: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000) Fiscal Year 2011: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Keywords	シグナル伝達 / タンパク質 / 結晶構造解析 / オートファジー / 酸化ストレス / Nrf2
Research Abstract	細胞は癌や生活習慣病等の様々な疾患を引き起こす酸化ストレスを消去する機構を有する．この生体防御機構には酸化ストレスセンサーKeap1が重要な役割を果たしている．Keap1は生体防御転写因子Nrf2を酸化ストレス依存的に抑制制御するが，その制御には様々なシグナリング複合体が関与している．本研究はこれらのシグナリング複合体構造解析を通して，プロテアソーム系とオートファジー系という異なる選択的タンパク質分解系によって織りなされる酸化ストレス応答分子シグナリング機構の解明を目指すものである．このシグナリング制御の構造的基盤を解明するために，具体的にはプロテアソーム系に重要な1)Keap1センサードメインおよび2)オートファジー系と相互作用するKeap1 Kelchドメインが関わる複合体構造解を実施する． 1)についてはKeap1センサードメイン及びプロテアソーム系のE3酵素複合体のパートナーであるCul3の大量発現系の構築と高純度精製を実施した．得られたサンプルを用いてKeap1とCul3との酸化ストレス依存的な相互作用解析を実施した．さらにKeap1センサードメインの結晶化に成功し，Ｘ線回折データの取得を行った． 2)についてはKeap1 Kelchドメインと選択的オートファジー基質p62との定量的相互作用解析を実施した。さらにKeap1-リン酸化p62複合体結晶の調製に成功し，Ｘ線回折データの取得および構造決定に成功した．
Current Status of Research Progress	Reason 25年度が最終年度であるため、記入しない。
Strategy for Future Research Activity	25年度が最終年度であるため、記入しない。