Ｇタンパク質シグナル複合体の解析
Publicly Offered Research
| Project Area | Structural basis of cell-signalling complexes mediating signal perception, transduction and responses |
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| Project/Area Number |
23121522
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Review Section |
Biological Sciences
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| Research Institution | Nara Institute of Science and Technology |
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Principal Investigator |
伊東 広 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (10183005)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2013-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2012)
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| Budget Amount *help |
¥9,360,000 (Direct Cost: ¥7,200,000、Indirect Cost: ¥2,160,000)
Fiscal Year 2012: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2011: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
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| Keywords | Gタンパク質 / シグナル伝達 / 受容体複合体 / Gタンパク質複合体 / ユビキチン化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Gタンパク質を介するシグナルは、数多くのホルモンや神経伝達物質によって誘導される様々な細胞応答において働いており、そのシグナル伝達構成因子を標的とした薬剤が広く使用されている。近年、私共の研究等から新しいGタンパク質シグナル制御機構が見つかってきた。本研究は、新たなGタンパク質シグナル複合体を同定し、その構造と機能を明らかにして、創薬研究の基盤を築くことを目的としている。本年度、以下の成果が得られた。（１）リガンド不明のオーファンGPCRの一つであるヒトGPR56に対するモノクローナル抗体の作成と評価を行ったところ、ヒトグリア腫細胞U87-MGの遊走を阻害する抗体がいくつか得られた。（３）GPR56の細胞外ドメインをN末及びC末より順次部分欠失した変異体をHEK293細胞に発現させ免疫染色とウエスタンブロット解析を行ったところ、アゴニスト様に働く３つの抗体はN末側１００アミノ酸あるいは細胞膜近傍の１００アミノ酸を認識していることが明らかとなった。（３）抗体による細胞遊走阻害作用はGq特異的阻害剤YM-254890、Rhoキナーゼ阻害剤によりキャンセルされた。（４）これらの抗体が細胞内カルシウム上昇を引き起こし、その効果がYM-254890により阻害されることも判明した。以上、GPR56を介してGqが活性化されカルシウム応答が引き起こされるとともにRhoキナーゼの活性化が起こると遊走が阻害されることが明らかとなった。（５）ショウジョウバエの原腸陥入に異常を示すGタンパク質制御分子Ric-8の変異体atxを用いた解析を進めたところ、atx変異により哺乳動物Gα12のショウジョウバエホモログCtaとRic-8の相互作用が減弱することが明らかとなった。（６）ショウジョウバエS2細胞を用いた解析から細胞形態変化やミオシンとCtaの局在をRic-8が調節していることが判明した。
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| Research Progress Status |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Maintenance of the hematopoietic stem cell pool in bone marrow niches by EVI1-regulated GPR562013
Author(s)
Saito Y., Kaneda K., Suekane A., Ichihara E., Nakahata S., Yamakawa N., Nagai K., Mizuno N., Kogawa K., Miura I., Itoh H., and Morishita K..
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Journal Title
Leukemia
Volume: 27
Issue: 8
Pages: 1637-1649
DOI
Related Report
Peer Reviewed
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