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Wnt受容体共役タンパク質-細胞内Wntシグナル伝達因子複合体群の構造生物学

Publicly Offered Research

Project AreaStructural basis of cell-signalling complexes mediating signal perception, transduction and responses
Project/Area Number 23121526
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionUniversity of Hyogo

Principal Investigator

柴田 直樹  兵庫県立大学, 生命理学研究科, 准教授 (30295753)

Project Period (FY) 2011-04-01 – 2013-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help
¥7,280,000 (Direct Cost: ¥5,600,000、Indirect Cost: ¥1,680,000)
Fiscal Year 2012: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Fiscal Year 2011: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Keywords結晶構造解析 / Wntシグナル伝達系 / シグナル伝達 / 発生・分解 / タンパク質
Outline of Annual Research Achievements

Wingless (Wnt)は,細胞の増殖や分化・運動・初期胚発生時の体軸形成や器官形成等の生物学的機能を制御する.Wntシグナルの細胞内への伝達は,そのレセプターであるFrizzledがLRP5/6と共役して働くことにより達成される.LRP5/6の細胞内領域がWntシグナルの負因子であるAxinの働きを抑制することによってWntシグナルがオンになると考えられている.本研究ではWntシグナルが細胞内で最初に伝達される経路に関わると考えられている3種類のタンパク質 (LRP6, Axin,Dishevelled) が構築する一連の複合体の結晶構造を解明することを目指す.平成24年度では LRP6, Axin,Dishevelled及び,LRP6細胞内領域 (LRP6-ctail)をリン酸化するキナーゼ(Glycogen synthase kinase 3, Casein kinase I)とそれらの複合体の大量発現系を利用した複合体調製を行った.また,Axin-Dishevelled 間の相互作用様式を解明すべく,DIXドメインを介する複合体調製のための新たな大腸菌発現系の構築と結晶化を行ったところ,結晶が得ることが出来た.放射光によるX線回折実験を行ったが,回折点を確認することが出来なかった.そこで,両者をリンカーで繋いだ発現系を用いて結晶化を行った所,より大きく,外形がはっきりとした結晶を得ることが出来た.新しいタイプの結晶についてはまだX線回折実験を行っていないが,回折点が得られるものと期待できる.

Research Progress Status

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2012 Annual Research Report
  • 2011 Annual Research Report
  • Research Products

    (1 results)

All 2012

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] Wnt シグナル伝達経路で機能するDIX ドメインを介した相互作用の構造生物学2012

    • Author(s)
      勝谷拓也、寺脇慎一、柴田直樹、山本英樹、Marc Fiedler、Mariann Bienz、菊池 章、樋口芳樹
    • Organizer
      平成24年度日本結晶学会年会
    • Place of Presentation
      東北大学 片平キャンパス(宮城県)
    • Year and Date
      2012-10-25
    • Related Report
      2012 Annual Research Report

URL: 

Published: 2011-04-06   Modified: 2018-03-28  

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