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3次元SHG応力顕微鏡による細胞内外の応力歪分布計測

Publicly Offered Research

Project AreaFrom molecules, cells to organs : trans-hierarchical logic for higher-order pattern and structures
Project/Area Number 23127510
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionUniversity of Hyogo

Principal Investigator

吉木 啓介  兵庫県立大学, 工学(系)研究科(研究院), 助教 (60432548)

Project Period (FY) 2011-04-01 – 2013-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help
¥9,750,000 (Direct Cost: ¥7,500,000、Indirect Cost: ¥2,250,000)
Fiscal Year 2012: ¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2011: ¥4,940,000 (Direct Cost: ¥3,800,000、Indirect Cost: ¥1,140,000)
Keywords第2高調波発生 / コラーゲン / 微小管 / 応力計測 / 電気化学法 / 第2高調波発生 / 応力分布計測 / ミオシン
Outline of Annual Research Achievements

細胞内外の応力分布を計測するため,正倒立SHG(第2高調波発生)顕微鏡を構築し,透過側,反射側におけるSHGの強度を偏光情報を含めて計測することで,コラーゲン,微小管の応力負荷時の構造変化を検出し,応力の計測を可能とした.
応力とSHG光信号の相関は顕微鏡上マイクロ引っ張り試験機を作成することで実現した.マイクロ引張り試験機はMEMSデバイス製造技術を用いて作成したシリコン製であり,試験片作製用と把持,引張り用の2対の電極からなる.試験片作製は電気化学法を用い,試験片材料の溶液からpH分布を発生させることによって,至適pH領域において線維が自己組織化することを確認した.この時,元の溶液のpHを調整することによって線維の形成位置を制御できるほか,溶液の流動性によって,安定的に線維を形成を制御できることが分かった.本手法によって,コラーゲン試験片は安定的に生成できることが確認され,太さの制御が電極間隔と電圧によって可能であることが確認された.また,微小管に関しては,pH以外の要因にも支配され,イオン濃度の影響で微小管の形成が阻害されている可能性があり,溶液の組成比を変更することによって,コラーゲンと同様の試験片の作製が可能であると考えられる.
現在,コラーゲンにおいて引張試験を行うことに成功しており,SHG顕微下のマイクロ引張試験において,応力とSHG偏光計測の結果の相関が得られたが,低応力領域と高応力領域でSHGの発生効率の応力に対する依存性が変化することが新たに確認された.これはコラーゲン線維組織の高次構造が変化認めであると考えられる.本結果を利用して,コラーゲンの応力分布マッピングが可能となり,今後微小管の応力計測の実現と併せて細胞内外の応力計測を完成させる.

Research Progress Status

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2012 Annual Research Report
  • 2011 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All 2013 2012 2011

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (8 results)

  • [Journal Article] Measurement of stress and strain applied to electrochemically aligned collagen fibers2011

    • Author(s)
      K.Yoshiki, N.Goami, T.Namazu, S.Inoue
    • Journal Title

      Proc.SPIE

      Volume: 81130E Pages: 1-6

    • DOI

      10.1117/12.894151

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of strain visualization system for microstructures using single fluorescent molecule tracking on three dimensional orientation microscope2011

    • Author(s)
      K.Yoshiki, S.Yoshida, T.Namazu, M.Hashimoto, S.Inoue
    • Journal Title

      Proc.SPIE

      Volume: 81340E Pages: 1-7

    • DOI

      10.1117/12.894329

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Stress Mapping of Achilles’ Tendon by Second-Harmonic-Generation Microscope2013

    • Author(s)
      Keisuke Yoshiki
    • Organizer
      The 7th world congress on Biomimetics, Artificial Muscles and Nano-Bio (BAMN2013)
    • Place of Presentation
      Jeju (South Korea)
    • Year and Date
      2013-08-26
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] Fabrication of Highly Aligned Collagen Micro-Scaffolds and its Evaluation by SHG Microscopy and Mechanical Tensile Test2013

    • Author(s)
      Keisuke Yoshiki
    • Organizer
      Bangkok International Conference on Biological Engineering Natural Science 2013
    • Place of Presentation
      Bangkok (Thailand)
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] 小角X線散乱およびSHG顕微鏡観察下における電気化学法生成コラーゲンの引張試験2012

    • Author(s)
      五網信貴, 吉木啓介, 宮田篤志, 生津資大, 井上尚三
    • Organizer
      バイオエンジニアリング講演会
    • Place of Presentation
      大阪大学基礎工学研究科(大阪府)
    • Year and Date
      2012-01-01
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] Micro Tensil Test on Second Harmonic Generation Microscope to Achieve Stress and Strain Distribution Measurement in Collagen2012

    • Author(s)
      Keisuke Yoshiki
    • Organizer
      Focus on Microscopy 2012
    • Place of Presentation
      Singapore (Singapore)
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] Observation of inhomogeneous strain distribution on collagen fibers using single molecule tracer2011

    • Author(s)
      K.Yoshiki, S.Yoshida, K.Yonezawa, T.Namazu, S.Inoue
    • Organizer
      第49回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      兵庫県立大学書写キャンパス(兵庫県)
    • Year and Date
      2011-09-16
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] SHG顕微鏡下におけるコラーゲン線維の引張ひずみ試験2011

    • Author(s)
      吉木啓介, 五網信貴, 生津資大, 井上尚三
    • Organizer
      第72回応用物理学会学術講演会
    • Place of Presentation
      山形大学小白川キャンパス(山形県)
    • Year and Date
      2011-09-01
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] 単一分子マーカーを用いたマイクロ構造体の歪分布可視化技術の開発2011

    • Author(s)
      吉田慎太郎, 吉木啓介, 生津資大, 荒木望, 橋本守, 井上尚三
    • Organizer
      日本実験力学会講演論文集
    • Place of Presentation
      奈良県文化会館(奈良県)
    • Year and Date
      2011-08-30
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] Measurement of stress and strain applied to electrochemically aligned collagen fibers2011

    • Author(s)
      K.Yoshiki, S.Yoshida, T.Namazu, N.Araki, M.Hashimoto, M.Kurihara, N.Hashimoto, S.Inoue
    • Organizer
      MEMS 2011
    • Place of Presentation
      Cancun, MEXICO
    • Related Report
      2011 Annual Research Report

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Published: 2011-04-06   Modified: 2018-03-28  

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