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複数種類miRNAの強制発現及び機能阻害による人工癌幹細胞作製法の開発

Publicly Offered Research

Project AreaDevelopment of Novel Treatment Strategies Targeting Cancer Stem Cells
Project/Area Number 23130504
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

原口 健  東京大学, 医科学研究所, 助教 (10549455)

Project Period (FY) 2011-04-01 – 2013-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help
¥9,360,000 (Direct Cost: ¥7,200,000、Indirect Cost: ¥2,160,000)
Fiscal Year 2012: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2011: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Keywords癌 / 癌幹細胞 / miRNA / 乳がん / miRNA inhibitor / ライブラリー
Outline of Annual Research Achievements

microRNA(miRNA)は癌の形成に重要な役割を担っており、近年では特に癌幹細胞を維持においても機能を果たしていることが明らかとなってきた。申請者はその中でも特に、ヒトの乳がん患者の癌組織からがん幹細胞とがん非幹細胞とを分け、それぞれのmiRNA発現プロファイルについて詳細に比較した報告に着目した。(Cell.138:592-603,2009、PNAS.108:1397-1402,2011)。本研究では、miRNA阻害ベクターと申請者がこれまでに開発したmiRNA阻害ベクターを用いて乳がん幹細胞のmiRNA発現パターンを再現し、これにより人工乳癌幹細胞を作製することを目的とする。
本年度においては、文献情報を基にライブラリーを拡充し、miRNA発現レンチウイルスベクターを34種、miRNA阻害レンチウイルスベクターを25種とした。これらを前年度に作製した安定miR-200c阻害MCF-7細胞に導入し、CD44,CD24の発現量変化を解析した。ランダムスクリーニングの他に特定のレンチウイルスベクターを組み合わせての導入実験も行った。その中で、CD44発現を2倍程度上昇させる組み合わせを発見した。それぞれのレンチウイルスベクターを導入してもCD44発現上昇があまり見られないことから組み合わせによって効果を増強しうることが分かった。そのため今後も当初の計画通りに複数種類のベクターを混合導入してスクリーニングを進める必要があると考えられる。また、このCD44が上昇した細胞は今後のスクリーニングの対象として有望である。

Research Progress Status

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2012 Annual Research Report
  • 2011 Annual Research Report
  • Research Products

    (15 results)

All 2013 2012 2011 Other

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results) Presentation (7 results) (of which Invited: 2 results) Book (2 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] Extracellular ATP mediates mast cell-dependent intestinal inflammation through P2X7 purinoceptors2012

    • Author(s)
      Y. Kurashima, T. Amiya, T. Nochi, K. Fujisawa, T. Haraguchi, H. Iba, H. Tsutsui, S. Sato, S. Nakajima, H. Iijima, M. Kubo, J. Kunisawa, H. Kiyono
    • Journal Title

      Nat Commun.

      Volume: 3-1034 Issue: 1 Pages: 1034-1034

    • DOI

      10.1038/ncomms2023

    • Related Report
      2012 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Multiple microRNAs induced by Cdx1 suppress Cdx2 in human colorectal tumour cells2012

    • Author(s)
      Tagawa T
    • Journal Title

      Biochem J

      Volume: 447 Issue: 3 Pages: 449-455

    • DOI

      10.1042/bj20120434

    • Related Report
      2012 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A potent 2'-O-methylated RNA-based microRNA inhibitor with unique secondary structures2012

    • Author(s)
      Haraguchi,T., Nakano, H., Tagawa, T., Ohki, T., Ueno, Y., Yoshida, T., Iba, H.
    • Journal Title

      Nucleic Acids Res.

      Volume: (in press) Issue: 8 Pages: 1-13

    • DOI

      10.1093/nar/gkr1317

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] MicroRNA regulation of vaccinia virus for enhanced oncolytic activity and reduced pathogenicity in oncolytic virotherapy2011

    • Author(s)
      Hikichi M, Kidokoro M, Haraguchi T, Iba H, Shida H, Tahara H & Nakamura T.
    • Journal Title

      Molecular Therapy

      Volume: 19巻 Issue: 6 Pages: 1107-15

    • DOI

      10.1038/mt.2011.36

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] miRNA発現及びmiRNA阻害レンチウイルスベクターライブラリーを用いた人工乳癌幹細胞作製法の開発2013

    • Author(s)
      原口 健
    • Organizer
      平成24年度 文部科学省新学術領域研究  がん研究分野の特性等を踏まえた支援活動  公開シンポジウム
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2013-01-30
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] 独自の二次構造を持つ2’-OME RNAオリゴを基盤としたmicroRNA阻害剤「S-TuD」2012

    • Author(s)
      原口 健
    • Organizer
      第12回分子複合医薬研究会
    • Place of Presentation
      大阪
    • Year and Date
      2012-11-12
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 独自の二次構造を持つ2’-OME RNAオリゴ新規microRNA阻害剤「S-TuD」2012

    • Author(s)
      原口 健
    • Organizer
      第28回日本DDS学会学術集会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2012-07-05
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Two methods for microRNA inhibition-TuD RNA expression vector 2’-O-methylated RNA-based microRNA inhibitor, S-TuD.2012

    • Author(s)
      Haraguchi, T
    • Organizer
      The 10th Stem Cell Research Symposium
    • Place of Presentation
      淡路
    • Year and Date
      2012-06-01
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] Development of S-TuD, a novel 2'-O-methylated RNA based microRNA inhibitor with unique secondary structures2011

    • Author(s)
      原口健、中野春男、吉田哲郎、伊庭英夫
    • Organizer
      第34回日本分子生物学会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2011-12-13
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] miRNA as an epigenetic switch2011

    • Author(s)
      伊庭英夫、原口健、櫻井浩平、小林和善
    • Organizer
      第18回東アジアシンポジウム
    • Place of Presentation
      中国・上海(招待講演)
    • Year and Date
      2011-12-07
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] A potent 2'-O-Methylated RNA based microRNA inhibitor with unique secondary structures2011

    • Author(s)
      原口健、中野春男、吉田哲郎、伊庭英夫
    • Organizer
      第70回日本癌学会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      2011-10-04
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Book] 遺伝子医学MOOK23号 「臨床・創薬利用が見えてきたmicroRNA」2012

    • Author(s)
      原口 健
    • Total Pages
      236
    • Publisher
      メディカルドゥ社
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Book] 遺伝子医学MOOK2012

    • Author(s)
      原口健、伊庭英夫
    • Publisher
      メディカルドゥ(印刷中)
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Remarks] 東京大学医科学研究所 宿主寄生体学分野

    • URL

      http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/div-host-parasite/Version1.html

    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/div-host-parasite/Versionl.html

    • Related Report
      2011 Annual Research Report

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Published: 2011-04-06   Modified: 2018-03-28  

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