ｍｉＲＮＡの成熟制御によるＲＮＡネットワークの解明

• Project Area: Functional machinery for non-coding RNAs
• Project/Area Number: 24115707
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 淺原 弘嗣 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (70294460)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2014-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2013)
• Budget Amount: ¥10,140,000 (Direct Cost: ¥7,800,000、Indirect Cost: ¥2,340,000); Fiscal Year 2013: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000); Fiscal Year 2012: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
• Keywords: miRNA / Let7 / Lin28 / 非コードRNA / 遺伝子発現制御

Research Abstract

本研究では、Lin28aノックアウトマウスの表現型解析を基盤とし、Lin28aの新たな標的遺伝子、及びLin28aを介した新規RNA制御機構を明らかにすることで、RNA階層における新規遺伝子発現制御機構の解明を目的とした。本年度は、前年度に引き続きLin28aノックアウトマウスの表現型の解析を行った。Lin28aノックアウトマウスの発生期における表現型を詳細に解析した結果、発生初期に体軸を規定する遺伝子群の発現増加や発現領域の拡大が表現型の直接の原因であることが示唆された。Lin28aがlet-7の制御因子であることから、let-7を過剰発現するトランスジェニックマウスを作製したが、現在までにLin28aノックアウトマウスと同様の表現型は確認されておらず、本研究で明らかとなった表現型がlet-7の発現亢進に起因するのかは依然不明のままである。また、Lin28aがRNA制御タンパク質であることから、マイクロアレイ、及びTaqmanアレイを用いて、Lin28aノックアウトマウスにおいて発現が上昇しているmRNA、及びmiRNAの探索を行った。これまでの報告と同様に、Lin28aノックアウトマウスではlet-7ファミリーの発現が顕著に亢進していることが明らかとなった。興味深いことに、これまでにLin28aとの関連が報告されていない複数のmiRNAの発現上昇が確認された。これらのmiRNAは既知のLin28a結合配列を持たないことから、Lin28aを介した新たなmiRNA制御機構の存在が示唆された。

Current Status of Research Progress

Reason

25年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

25年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] FOXL2 transcriptionally represses Sf1 expression by antagonizing WT1 during ovarian development in mice. (2014)
  • Author(s): Takasawa K, Kashimada K, Pelosi E, Takagi M, Morio T, Asahara H, Schlessinger D, Mizutani S, Koopman P.
  • Journal Title: The FASEB Journal Volume: 28(5) Pages: 2020-8
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The Mohawk homeobox transcription factor regulates the differentiation of tendons and volar plates (2014)
  • Author(s): Onizuka N, Ito Y, Inagawa M, Nakahara H, Takada S, Lotz M, Toyama Y, Asahara H
  • Journal Title: J Orthop Sci Volume: 19(1) Issue: 1 Pages: 172-80
  • DOI: 10.1007/s00776-013-0485-z
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Production of Sry knockout mouse using TALEN via oocyte injection. (2013)
  • Author(s): Kato T, Miyata K, Sonobe M, Yamashita S, Tamano M, Miura K, Kanai Y, Miyamoto S, Sakuma T, Yamamoto T, Inui M, Kikusui T, Asahara H, Takada S.
  • Journal Title: Scientific reports Volume: 3 Issue: 1 Pages: 3136-3136
  • DOI: 10.1038/srep03136
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Targeted gene deletion of miRNAs in mice by TALEN system. (2013)
  • Author(s): Takada S, Sato T, Ito Y, Yamashita S, Kato T, Kawasumi M, Kanai-Azuma M, Igarashi A, Kato T, Tamano M, Amahara H.
  • Journal Title: PLoS One. Volume: 8 Issue: 10 Pages: e76004-e76004
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0076004
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The AERO System : a 3D-like Approach for Recording Gene Expression Patterns in the Whole Mouse Embryo (2013)
  • Author(s): Shimizu H, Kubo A, Uchibe K, Hashimoto M, Yokoyama S, Takada S, Mitsuoka K, Asahara H
  • Journal Title: PLOS One Volume: 8(10) Issue: 10 Pages: e75754-e75754
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0075754
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Analysis of microRNAs expressions in chondrosarcoma (2013)
  • Author(s): Yoshitaka T, Kawai A
  • Journal Title: J Orthop Res Volume: 31(12) Issue: 12 Pages: 1992-1998
  • DOI: 10.1002/jor.22457
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Transcription factor mohawk and the pathogenesis of human anterior cruciate ligament degradation (2013)
  • Author(s): Nakahara H, Hasegawa A, Otabe K, Ayabe F, Matsukawa T, Onizuka N, Ito Y, Ozaki T, Lotz MK, Asahara H
  • Journal Title: Arthritis Rheum Volume: 65(8) Issue: 8 Pages: 2081-9
  • DOI: 10.1002/art.38020
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] L-Sox5 and Sox6 proteins enhance chondrogenic miR-140 microRNA expression by strengthening dimeric Sox9 activity. (2012)
  • Author(s): Yamashita S, Miyaki S, Kato Y, Yokoyama S, Sato T, Barrionuevo F, Akiyama H, Scherer G, Takada S, Asahara H.
  • Journal Title: J Biol Chem Volume: 287(26) Pages: 22206-15
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Macro view of microRNA function in osteoarthritis. (2012)
  • Author(s): Miyaki S, Asahara H.
  • Journal Title: Nat Rev Rheumatol. Volume: 8(9) Pages: 543-52
  • Peer Reviewed