哺乳類の卵巣の自然発症的な雄性化の分子基盤

• Project Area: Molecular mechanisms for establishment of sex differences.
• Project/Area Number: 25132703
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 金井 克晃 東京大学, 農学生命科学研究科, 准教授 (30260326)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2014)
• Budget Amount: ¥17,940,000 (Direct Cost: ¥13,800,000、Indirect Cost: ¥4,140,000); Fiscal Year 2014: ¥8,970,000 (Direct Cost: ¥6,900,000、Indirect Cost: ¥2,070,000); Fiscal Year 2013: ¥8,970,000 (Direct Cost: ¥6,900,000、Indirect Cost: ¥2,070,000)
• Keywords: SRY / SOX9 / 卵巣 / 性転換 / マウス

Outline of Annual Research Achievements

申請者らは、マウス胎齢13日(E13)のXX卵巣を父性環境下に移植した場合、E12.5 XY,XX支持細胞での各々約1/4の精巣，卵巣特異的遺伝子の発現が逆転し、卵巣においてSOX9陽性のセルトリ様細胞が出現し、部分的な性転換が起こることが判明している。この性転換の分子基盤の解明のための最終年度においては、その性転換の鍵となる転写因子群を移植卵巣の各ステージでの網羅的なreal time PCRによる発現解析を行った。その結果, i) 10日目までに一過性に上昇し、15日目には減少するタイプI、ii) 移植15日目から発現が上昇するタイプII、iv) 18日目以降で発現が上昇するタイプIII、v)移植５日から20日を通して徐々に発現上昇するタイプIVに分類分けを行い、この全ての転写因子に関しては、網羅的なqPCRによる解析を終了した。また、最終年度には、この雄性化したセルトリ様細胞の機能評価のため、AMH-TRECKマウスを樹立し、個体にDTを投与によりセルトリ細胞のみを特異的に除去できる実験系を作出した。さらに、このAMH-TRECKマウスにDT処理後４日目の精巣に、別個体の健康な セルトリ細胞を移植することにより、１）移植セルトリ細胞は精細管に定着し,宿主の精細胞を支持すること、２）移植後一ヶ月半までには、移植セルトリ細胞は伸長型精子細胞を含む精子形成をサポートし、精子形成の部分的な回復が認められることを見出した。これにより、セルトリ細胞を高効率に移植、置換することが可能となり、今後，性分化異常症のセルトリ様細胞の機能的な評価法を確立した。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] A novel Amh-Treck transgenic mouse line allows toxin-dependent loss of supporting cells in gonads. (2014)
  • Author(s): Shinomura M, Kishi K, Tomita A, Kawasumi M, Kanezashi H, Kuroda Y, Tsunekawa N, Ozawa A, Aiyama Y, Yoneda A, Suzuki H, Saito M, Picard JY, Kohno K, Kurohmaru M, Kanai-Azuma M, Kanai Y.
  • Journal Title: Reproduction Volume: 148 Issue: 6 Pages: H1-H9
  • DOI: 10.1530/rep-14-0171
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Single administration of butylparaben induces spermatogenic cell apoptosis in prepubertal rats. (2014)
  • Author(s): Alam MS, Ohsako S, Kanai Y, and Kurohmaru M.
  • Journal Title: Acta Histochemical Volume: 116 Issue: 3 Pages: 474-480
  • DOI: 10.1016/j.acthis.2013.10.006
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Sox17 regulates liver lipid metabolism and adaptation to fasting. (2014)
  • Author(s): Rommelaere S, Millet V, Vu Manh TP, Gensollen T, Andreoletti P, Cherkaoui-Malki M, Bourges C, Escaliere B, Du X, Xia Y, Imbert J, Beutler B, Kanai Y, Malissen B, Malissen M, Tailleux A, Staels B, Galland F, Naquet P.
  • Journal Title: PLOS ONE Volume: 9 Issue: 8 Pages: e104925-e104925
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0104925
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Heterogeneity in sexual bipotentiality and plasticity of granulosa cells in developing mouse ovaries. (2013)
  • Author(s): Harikae K, et. al.
  • Journal Title: J Cell Sci. Volume: 126(Pt 13) Pages: 2834-2844
  • DOI: 10.1242/jcs.122663
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epigenetic regulation of sex determination by the histone demethylase Jmjd1a (2013)
  • Author(s): Kuroki S, Matoba S, Akiyoshi M, Matsumura Y, Miyachi H, Mise N, Abe K, Ogura A, Wilhelm D, Koopman P, Nozaki M, Kanai Y, Shinkai Y, and Tachibana, M
  • Journal Title: Science Volume: 341 Issue: 6150 Pages: 1106-1109
  • DOI: 10.1126/science.1239864
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Homeoproteins Six1 and Six4 regulate male sex determination and mouse gonadal development. (2013)
  • Author(s): Fujimoto Y, et. al.
  • Journal Title: Dev Cell. Volume: 26(4) Issue: 4 Pages: 416-430
  • DOI: 10.1016/j.devcel.2013.06.018
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Common molecular pathways between SRY-dependent and -independent testiculogenesis in mouse fetal gonads. (2014)
  • Author(s): Miura K, Kanai-Azuma M, Kanai Y
  • Organizer: The 4th SOX Meeting (organized by Veronique Lefebvre & Michael Weiss).
  • Place of Presentation: Cleaveland Botanical garden, OH, USA.
  • Year and Date: 2014-09-08 – 2014-09-12
• [Presentation] 哺乳類の精原幹細胞とそのニッチ領域の動態. (2013)
  • Author(s): 金井克晃
  • Organizer: 第32回日本アンドロジ学会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場
  • Invited
• [Presentation] 性分化と性転換
  • Author(s): 金井克晃
  • Organizer: Meet The Specialist
  • Place of Presentation: 東京ガーデンパレス
  • Invited
• [Book] 繁殖生物学 (日本繁殖生物学会編) (2013)
  • Author(s): 分担執筆 金井克晃
  • Total Pages: 313
  • Publisher: Interzoo
• [Remarks] 研究紹介・マウス生殖細胞／生殖腺の発生、性分化および精子発生の分子機構の解明
  • URL: http://www.vm.a.u-tokyo.ac.jp/kaibo/seibunnka.html
• [Remarks] 研究紹介・マウス生殖細胞／生殖腺の発生、性分化および精子発生の分子機構の解明
  • URL: http://webpark1370.sakura.ne.jp/seibunnka.html