神経細胞内の異常なリソソームとオートファゴソームの関わりについての遺伝学的研究
Publicly Offered Research
Project Area | Multidisciplinary research on autophagy: from molecular mechanisms to disease states |
Project/Area Number |
26111519
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
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Allocation Type | Single-year Grants |
Review Section |
Biological Sciences
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Research Institution | Juntendo University |
Principal Investigator |
小池 正人 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80347210)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2015)
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Budget Amount *help |
¥10,140,000 (Direct Cost: ¥7,800,000、Indirect Cost: ¥2,340,000)
Fiscal Year 2015: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2014: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
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Keywords | LAMTOR1 / リソソーム / mTORC1 / 髄鞘 / ノックアウトマウス / オートファジー / LC3 / 凍結超薄切片法 / p18/LAMTOR1 / ragulator / オリゴデンドロサイト / 髄鞘形成不全 |
Outline of Annual Research Achievements |
HeLa細胞において、Lamp1陽性リソソームにおけるp18(LAMTOR1)の免疫陽性反応が分裂期で低下する傾向を見いだした。そこで、同調培養によりS・early G1・late G1・G2/M期の細胞を分取しウエスタンブロットを行い、G2/M期でp18、mTORC1の下流の標的タンパク質S6Kのリン酸化の減少を認めた。一方、WYE354投与や飢餓の誘導によるmTORC1の活性化の阻害はp18の量に影響を及ぼさなかった。以上は、分裂期のp18の減少がトリガーとなりmTORC1の活性化が抑制されることを示唆する。分裂期におけるepoxomicine投与によりp18の量が回複し、プルダウンアッセイによるユビキチン化タンパク質の検討により、G2/M期の細胞でp18抗体陽性のユビキチン化タンパク質の増加を認めたことから、分裂期のp18の減少へのユビキチン・プロテアソーム系の関与が示唆された。 次に、p18/LAMTOR1の中枢神経系特異的遺伝子欠損マウスを解析した結果、新生仔は体重が対照群より軽く、生後14日前後で致死となることを見出した。生後14日目のマウス脳を用いた免疫組織化学的解析により、ニューロン、アストロサイト、ミクログリアでは顕著な変化が観察されなかったのに対して、p18/LAMTOR1の中枢神経系特異的遺伝子欠損マウスでは、成熟したオリゴデンドロサイトのマーカータンパク質の発現が全脳にわたって消失していた。さらに、透過型電子顕微鏡をもちいた形態学的解析により、脳梁及び小脳における軸索の髄鞘化をほとんど認めなかった。以上の結果は、mTORC1の活性がオリゴデンドロサイトの分化に重要な働きがあることを示唆するものである。
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Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(55 results)
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[Journal Article] Neuroprotection by selective neuronal deletion of autophagy-related gene ATG7 in neonatal brain injury2016
Author(s)
Xie, C., Ginet, V., Sun, Y., Koike, M., Zhou, K., Li, T., Li, H., Li, Q., Wang, X., Uchiyama, Y., Truttmann, AC., Kroemer, G., Puyal, J., Blomgren, K., Zhu, C
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Journal Title
Autophagy
Volume: 12
Issue: 2
Pages: 410-423
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] The ablation of mitochondrial protein phosphatase pgam5 confers resistance against metabolic stress2016
Author(s)
Sekine S., Yao, A., Hattori, K., Sugawara, S., Naguro, I., Koike, M., Uchiyama, Y., Takeda, K., Ichijo, H
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Journal Title
EBioMedicine
Volume: 6
Pages: 82-92
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] <b>A specific tripeptidyl substrate for tripeptidyl peptidase activity is effectively hydrolyzed by alanyl aminopeptidase/</b><b>aminopeptidase N/CD13 in the rat kidney </b>2016
Author(s)
Shibata, M., Koike, M., Kusumi, S., Sato, N., Uchiyama, Y
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Journal Title
Archives of Histology and Cytology
Volume: 76
Issue: 1
Pages: 1-8
DOI
NAID
ISSN
0914-9465, 1349-1717
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Macroautophagy is essential for killing of intracellular Burkholderia pseudomallei in human neutrophils.2015
Author(s)
Rinchai D, Riyapa D, Buddhisa S, Utispan K, Titball RW, Stevens MP, Stevens JM, Ogawa M, Tanida I, Koike M, Uchiyama Y, Ato M, Lertmemongkolchai G.
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Journal Title
Autophagy
Volume: 11
Issue: 5
Pages: 748-755
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Ethambutol neutralizes lysosomes and causes lysosomal zinc accumulation.2015
Author(s)
Yamada D, Saiki S, Furuya N, Ishikawa K, Imamichi Y, Kambe T, Fujimura T, Ueno T, Koike M, Sumiyoshi K, Hattori N
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun.
Volume: 471
Issue: 1
Pages: 109-116
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Viable neuronopathic Gaucher disease model in medaka (Oryzias latipes) displays axonal accumulation of alpha-synuclein2015
Author(s)
Norihito Uemura, Masato Koike, Satoshi Ansai, Masato Kinoshita, Tomoko Ishikawa-Fujiwara, Hideaki Matsui, Kiyoshi Naruse, Naoaki Sakamoto, Yasuo Uchiyama, Takeshi Todo, Shunichi Takeda, Hodaka Yamakado, Ryosuke Takahashi
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Journal Title
PLoS Genetics
Volume: 11
Issue: 4
Pages: 1-14
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] P150glued-associated disorders are caused by activation of intrinsic apoptotic pathway.2014
Author(s)
Ishikawa K, Saiki S, Furuya N, Yamada D, Imamichi Y, Li Y, Kawajiri S, Sasaki H, Koike M, Tsuboi Y, Hattori N.
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Journal Title
PLoS One.
Volume: 9
Issue: 4
Pages: e94645-e94645
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Pancreatic β cell failure mediated by mTORC1 hyperactivity and autophagic impairment.2014
Author(s)
Bartolome A, Kimura-Koyanagi M, Asahara SI, Guillen C, Inoue H, Teruyama K, Shimizu S, Kanno A, Garcia-Aguilar A, Koike M, Uchiyama Y, Benito M, Noda T, Kido Y
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Journal Title
Diabetes
Volume: 未定
Issue: 9
Pages: 2996-3008
DOI
NAID
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Human IAPP-induced pancreatic β cell toxicity and its regulation by autophagy.2014
Author(s)
Shigihara N, Fukunaka A, Hara A, Komiya K, Honda A, Uchida T, Abe H, Toyofuku Y, Tamaki M, Ogihara T, Miyatsuka T, Hiddinga HJ, Sakagashira S, Koike M, Uchiyama Y, Yoshimori T, Eberhardt NL, Fujitani Y, Watada H.
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Journal Title
J Clin Invest.
Volume: 124
Issue: 8
Pages: 3634-44
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Nitric oxide-mediated injury of interstitial cells of Cajal and intestinal motility under endotoxemia of mice2014
Author(s)
Ueshima S., Nishida, T., Koike, M., Matsuda, H., Sawa, Y., Uchiyama, Y
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Journal Title
Biomed. Res.
Volume: 35
Pages: 251-62
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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