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DNA合成に干渉する非コード配列での複製フォーク適応機構の研究

Publicly Offered Research

Project AreaFunctions of non-coding DNA region for genome integrity
Project/Area Number 26114714
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

釣本 敏樹  九州大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (30163885)

Project Period (FY) 2014-04-01 – 2016-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2015)
Budget Amount *help
¥9,360,000 (Direct Cost: ¥7,200,000、Indirect Cost: ¥2,160,000)
Fiscal Year 2015: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2014: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Keywords複製フォーク / 脆弱配列 / 反復配列 / DNAポリメラーゼ
Outline of Annual Research Achievements

非コード領域は、脆弱部位、組換えホットスポット、へテロクロマチン、テロメア、セントロメア等、通常の配列と違う特性を持つ領域で、これらはDNA複製の進行に干渉する。染色体が安定に維持されるには、これら領域で複製フォークの機能適応が重要である。本課題ではDNA合成干渉の機能を持つヒトの非コード配列を単離する。さらにそのような配列でのヒト複製関連因子の挙動を解析し、ヒト細胞で非コード配列において複製フォークがどのようにして機能的適応をしているかを解明することを目的としている。
これまでに、脆弱配列、セントロメア、ウイルス由来の末端反復配列を、SV40ウイルス複製開始点を持つpcDNAベクターに挿入した。これらをSV40T抗原発現のヒト培養細胞に一過的に導入し、SV40複製開始点依存的な複製活性を制限酵素DpnIに対する感受性から測定した。その結果、脆弱領域由来のイントロン配列、セントロメア由来のアルフォイド配列、ウイルス由来の末端反復配列で複製能が約半分になる有為な複製干渉が見られた。
ウイルス由来の末端反復配列に関しては、ウイルス核抗原がこの配列に結合することが知られている。さらにこの核抗原は宿主複製因子RFCと強く結合する。我々は、この核抗原とRFCの結合が、複製クランプPCNAの効率のよい末端反復配列DNAへのロードディングに寄与することを示した。これは非コード配列に対してクランプが特異的にロードされることを示唆する。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Annual Research Report
  • Research Products

    (20 results)

All 2016 2015 2014 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (8 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 8 results,  Open Access: 4 results,  Acknowledgement Compliant: 3 results) Presentation (11 results) (of which Invited: 4 results)

  • [Int'l Joint Research] Harvard Medical School(米国)

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    • Author(s)
      Kawakami H, Ohashi E, Tsurimoto T, and Katayama T.
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      Front. Microbiol.

      Volume: in press

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    • Author(s)
      Okimoto H, Tanaka S, Araki H, Ohashi E, Tsurimoto T.
    • Journal Title

      Genes Cells.

      Volume: in press Issue: 5 Pages: 482-491

    • DOI

      10.1111/gtc.12356

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    • Author(s)
      Kawakami H, Ohashi E, Kanamoto S, Tsurimoto T, Katayama T.
    • Journal Title

      Sci Rep.

      Volume: 5 Issue: 1 Pages: 14929-14929

    • DOI

      10.1038/srep14929

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
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    • Author(s)
      Le HP, Masuda Y, Tsurimoto T, Maki S, Katayama T, Furukohri A, Maki H.
    • Journal Title

      Genes Cells.

      Volume: 10 Issue: 10 Pages: 817-833

    • DOI

      10.1111/gtc.12275

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      2015 Annual Research Report
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  • [Journal Article] Intramolecular Binding of the Rad9 C Terminus in the Checkpoint Clamp Rad9-Hus1-Rad1 Is Closely Linked with Its DNA Binding.2015

    • Author(s)
      Takeishi Y, Iwaya-Omi R, Ohashi E, Tsurimoto T.
    • Journal Title

      J Biol Chem.

      Volume: 290 Issue: 32 Pages: 19923-19932

    • DOI

      10.1074/jbc.m115.669002

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    • Author(s)
      Hirota K, Yoshikiyo K, Guilbaud G, Tsurimoto T, Murai J, Tsuda M, Phillips L, Narita T, Nishihara K, Kobayashi K, Yamada K, Nakamura J, Pommier Y, Lehmann, A, Sale J, Takeda S
    • Journal Title

      Nucleic Acids Res.

      Volume: 43 Issue: 3 Pages: 1671-1683

    • DOI

      10.1093/nar/gkv023

    • NAID

      120005825923

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      2014 Annual Research Report
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  • [Journal Article] Interaction between Rad9-Hus1-Rad1 and TopBP1 activates ATR-ATRIP and promotes TopBP1 recruitment to sites of UV-damage.2014

    • Author(s)
      Ohashi E, Takeishi Y, Ueda S, Tsurimoto T.
    • Journal Title

      DNA Repair (Amst)

      Volume: 21 Pages: 1-11

    • DOI

      10.1016/j.dnarep.2014.05.001

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      2014 Annual Research Report
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  • [Journal Article] Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus LANA recruits the DNA polymerase clamp loader to mediate efficient replication and virus persistence.2014

    • Author(s)
      Sun Q, Tsurimoto T, Juillard F, Li L, Li S, De Leon Vazquez E, Chen S, Kaye K.
    • Journal Title

      Proc Natl Acad Sci U S A.

      Volume: 111 Issue: 32 Pages: 11816-11821

    • DOI

      10.1073/pnas.1404219111

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  • [Presentation] Rad9 C末端によるチェックポイントクランプRad9-Hus1-Rad1の機能制御機構2015

    • Author(s)
      Ohashi E, Takeishi Y, Tsurimoto T.
    • Organizer
      第38回日本分子生物学会年会ワークショップ
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-12-03
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  • [Presentation] クランプ・ローダー系による進行障害時の複製フォークの機能制御2015

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      Tsurimoto T, Ohashi E, Fujisawa R, Takeishi Y
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      第38回日本分子生物学会年会ワークショップ
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-12-01
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      2015 Annual Research Report
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    • Author(s)
      Ohashi E, Takeishi Y, Tsurimoto T.
    • Organizer
      第23回DNA複製・組換え・修復ワークショップ
    • Place of Presentation
      焼津
    • Year and Date
      2015-10-19
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      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] Polεに結合したCtf18-RFCのPCNAローディング過程の解析2015

    • Author(s)
      Ryo Fujisawa, Ohashi E, Tsurimoto T.
    • Organizer
      第23回DNA複製・組換え・修復ワークショップ
    • Place of Presentation
      焼津
    • Year and Date
      2015-10-19
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] DNA損傷応答因子ATR-ATRIP, Rad9-Hus1-Rad1, TopBP1の3者間結合によるATR活性化機構2014

    • Author(s)
      Ohashi E, Takeishi Y, Ueda S, Tsurimoto T
    • Organizer
      日本分子生物学会年会ワークショップ
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2014-11-27
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      2014 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] ヒトCtf18-RFCはPolεと複合体となって機能的にPCNAをロードする2014

    • Author(s)
      Fujisawa R, Tsrurimoto T
    • Organizer
      日本分子生物学会年会ワークショップ
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2014-11-27
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      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] 出芽酵母ORC複合体の分子内外クロストークの同定2014

    • Author(s)
      Kawakami H, Kawanishi T, Ohashi E, Tsrurimoto T, Katayama T
    • Organizer
      日本分子生物学会年会ワークショップ
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2014-11-27
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] The C-terminal of Rad9 associates to the core ring structure of the checkpoint clamp, Rad9-Hus1-Rad1, and regulates its DNA binding activity.2014

    • Author(s)
      Takeishi Y, Ohashi E, Tsrurimoto T
    • Organizer
      第37回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2014-11-25
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      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] Novel mechanisms of PCNA loader complexes to specify their functions.2014

    • Author(s)
      Tsurimoto T, Fujisawa R, Ohashi E, Tanaka S, Araki H, Sun Q, Kaye K
    • Organizer
      The 9th 3R Symposium
    • Place of Presentation
      Gotemba, Shizuoka Japan
    • Year and Date
      2014-11-20
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      2014 Annual Research Report
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    • Author(s)
      Ohashi E, Takeishi Y, Tsrurimoto T
    • Organizer
      The 9th 3R Symposium
    • Place of Presentation
      Gotemba, Shizuoka Japan
    • Year and Date
      2014-11-20
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      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] Interaction of Ctf18-RFC with DNA polymerase ε specifies their functional sites for the active PCNA loading2014

    • Author(s)
      Fujisawa R, Tsrurimoto T
    • Organizer
      The 9th 3R Symposium
    • Place of Presentation
      Gotemba, Shizuoka Japan
    • Year and Date
      2014-11-19
    • Related Report
      2014 Annual Research Report

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Published: 2014-04-04   Modified: 2018-03-28  

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