2015 Fiscal Year Annual Research Report
| Project Area | Quality of lipids in biological systems |
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| Project/Area Number |
15H05904
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
横溝 岳彦 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60302840)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 雄一 東京工業大学, 大学院生命理工学研究科, 教授 (90153650)
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| Project Period (FY) |
2015-06-29 – 2020-03-31
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| Keywords | 脂肪酸 / 免疫細胞 / 抗炎症性脂質 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
免疫担当細胞に準備済みの脂肪酸ライブラリー(64種類)を終濃度10 uMで添加し、種々のサイトカインのmRNAとタンパク質の定量を行い、各種脂肪酸の分化への影響を観察した。
a)樹状細胞分化における脂肪酸の影響：B6マウスの骨髄細胞を10 ng/mlのGM-CSFで6日間培養した。分化途中の培養0, 2, 4日目に各脂肪酸を終濃度10 uMで添加した。培養6日目にLPSを終濃度100 ng/mlになるよう添加し、4時間後に細胞からTotal RNAを回収し、定量的PCR法にてIL-12 p35、p40、IL-4、IL-6、TGFβ、IL-23p19のmRNA量を測定した。複数の脂肪酸が、LPSによるIL-12 p35産生を抑制した。
b)T細胞Th0/1/2/17分化における脂肪酸の影響：B6マウスの脾臓とリンパ節より細胞浮遊液を作製し、TER119、pan-NK、CD8α、CD11b、CD11c、B220、CD25抗体でdepletionを行い、naive CD4陽性細胞を単離した。これらを5 ug/mlの濃度でプレートに固相化した抗CD3抗体と0.5 ug/ml抗CD28抗体で4日間刺激し、Th0分化を行うが、刺激開始時と2日後に各脂肪酸を終濃度10 uMで添加した。4日後に培養上清中のIFNγとIL-4をELISAで定量した。同様に、既に確立されている培養条件でTh1/2/17にも分化させる際にも各脂肪酸を終濃度10 uMで添加し、サイトカイン産生への各種脂肪酸の影響を観察した。Th1分化ではIFNγ、Th2分化ではIL-13、Th17分化ではIL-17量を定量した。複数の脂肪酸がサイトカイン産生を阻害した。
c)有機合成法が確立されず、クオリティ研究の遅れている不飽和脂肪酸代謝産物(レゾルビンD4、レゾルビンE1代謝産物) の合成法を確立した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ほぼ申請書の平成27年度に記載した通りに研究が遂行できているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
申請書の平成28年度に記載した通りに研究を遂行する。
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[Journal Article] Resolvin E1 inhibits dendritic cell migration in the skin and attenuates contact hypersensitivity responses.2015
Author(s)
Sawada Y, Honda T, Hanakawa S, Nakamizo S, Murata T, Ueharaguchi-Tanada Y, Ono S, Amano W, Nakajima S, Egawa G, Tanizaki H, Otsuka A, Kitoh A, Dainichi T, Ogawa N, Kobayashi Y, Yokomizo T, Arita M, Nakamura M, Miyachi Y, Kabashima K.
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Journal Title
J Exp Med
Volume: 212
Pages: 1921-1930
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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