2016 Fiscal Year Annual Research Report
フラビウイルスの共生と進化に関与する宿主及びウイルス因子の解析
Project Area | Neo-virology: the raison d'etre of viruses |
Project/Area Number |
16H06432
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
松浦 善治 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (50157252)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉住 朋晴 九州大学, 医学研究院, 准教授 (80363373)
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Project Period (FY) |
2016-06-30 – 2021-03-31
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Keywords | フラビウイルス |
Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、膜結合性の分泌蛋白質であるペスチウイルスのErnsとフラビウイルスのNS1がフラビウイルス科のウイルスに共通して粒子産生に関与するかを調べた。まず、ペスチウイルスの完全長cDNAクローンからErns遺伝子を欠失させたクローンを作出した。ウイルス由来のErnsあるいはNS1蛋白質、および宿主由来のアポリポ蛋白質を培養細胞に強制発現させ、Erns遺伝子を欠失したウイルスRNAを導入した。その結果、NS1蛋白質、あるいは、アポリポ蛋白質を発現させた細胞でペスチウイルスの粒子産生を認めた。次に、ヘパシウイルスの粒子形成に必須なアポ蛋白質を欠失させた培養細胞に、ペスチウイルスのErns蛋白、あるいはフラビウイルスのNS1蛋白質を強制発現させてヘパシウイルスを感染させた。その結果、Erns、あるいはNS1蛋白質を強制発現させた細胞で粒子産生が回復した。以上の成績から、フラビウイルスの粒子産生には膜結合性の分泌蛋白質が重要な役割を演じることが示唆された。特に、ヘパシウイルスは種および組織特異性を獲得する間に、自身の遺伝子から膜結合性の分泌蛋白質を欠失させ、宿主の蛋白質を利用するように進化したと考えられる。一方、ペギウイルスはコア蛋白質を欠損しているが、その分子機構を解明するため、ペギウイルスの定量系を確立し、肝臓移植患者で健常人よりもペギウイルスの陽性率が有意に高いことが明らかになった。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
フラビウイルスの粒子形成における、宿主由来およびウイルス由来の膜結合性蛋白質の関与を解明し、論文を投稿し、マイナーリバイスとなっている。また、ペギウイルスに関しても、ウイルス価が高い患者を同定できており、研究は順調に進展していると判断できる。
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Strategy for Future Research Activity |
遺伝子構造が類似するヘパシウイルスとペスチウイルスに着目し、ヘパシウイルスゲノムにペスチウイルスのErns、あるいは宿主由来の分泌性膜結合蛋白質の遺伝子を挿入し、ヘパシウイルスの粒子産生に必須なアポリポ蛋白質を欠損させた培養細胞で組換えウイルスが感染性粒子を産生できるか否かを検証する。また、ペスチウイルスのErns遺伝子を宿主由来の分泌性膜結合蛋白質遺伝子と置換し、培養細胞で継代して適応変異の挿入を検証する。さらに、感染環に昆虫と哺乳動物を持つウイルスと、昆虫だけで増殖するウイルスでキメラウイルスを作出し、昆虫由来と哺乳動物由来の培養細胞で交互に継代し、変異ウイルスの性状を解析することで、フラビウイルスの宿主域の拡大を実験的に検証する。この様な進化モデルの解析のため、感染性を容易に解析可能なレポーターウイルスを作出する。また、ペギウイルスに関しては、ウイルス価の高い患者の末梢血単核球からRNAを抽出し、ペギウイルスゲノムの感染性cDNAを確立し、コア蛋白質欠損機構を解明する。
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[Journal Article] Quasispecies of Hepatitis C Virus Participate in Cell-Speci c Infectivity2017
Author(s)
Takasuke Fukuhara, Satomi Yamamoto, Chikako Ono, Shota Nakamura, Daisuke Motooka, Hiroyuki Mori, Takeshi Kurihara, Asuka Sato, Tomokazu Tamura, Takashi Motomura, Toru Okamoto, Michio Imamura, Toru Ikegami, Tomoharu Yoshizumi, Yuji Soejima, Yoshihiko Maehara, Kazuaki Chayama, Yoshiharu Matsuura
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Journal Title
SCIENTIFIC REPORTS
Volume: 7
Pages: 1-10
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] CD14+ monocyte-derived galectin-9 induces natural killer cell cytotoxicity in chronic hepatitis C2017
Author(s)
Nishio A, Tatsumi T, Nawa T, Suda T, Yoshioka T, Onishi Y, Aono S, Shigekawa M, Hikita H, Sakamori R, Okuzaki D, Fukuhara T, Matsuura Y, Hiramatsu N, Takehara T
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Journal Title
Hepatology
Volume: 65
Pages: 18-31
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Human Cathelicidin Compensates for the Role of Apolipoproteins in Hepatitis C Virus Infectious Particle Formation2016
Author(s)
Francesc Puig-Basagoiti*, Takasuke Fukuhara*, Tomokazu Tamura, Chikako Ono, Kentaro Uemura, Yukako Kawachi, Satomi Yamamoto, Hiroyuki Mori, Takeshi Kurihara, Toru Okamoto, Hideki Aizaki and Yoshiharu Matsuura
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Journal Title
Journal of Virology
Volume: 90
Pages: 8464-8477
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] TRC8-dependent degradation of hepatitis C virus immature core protein regulates viral propagation and pathogenesis.2016
Author(s)
Aizawa S., Okamoto T., Sugiyama Y., Kouwaki T., Ito A., Suzuki T., Ono C., Fukuhara T., Yamamoto M., Okochi M., Hiraga N., Imamura M., Chayama K., Suzuki R., Shoji I., Moriishi K., Moriya K., Koike K., and Matsuura Y.
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Journal Title
Nat. Commun.
Volume: 7
Pages: 1-12
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Lipoprotein receptors redundantly participate in entry of hepatitis C virus2016
Author(s)
Yamamoto S., Fukuhara T., Ono C., Uemura K., Kawachi Y., Shiokawa M., Mori H., Wada M., Shima R., Okamoto T., Hiraga N., Suzuki R., Chayama K., Wakita T., Matsuura Y.
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Journal Title
PLoS Pathogens
Volume: 12
Pages: 1-24
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Viral secretory glycoproteins of Flaviviridae virus have similar roles with apolipoproteins on the formation of infectious HCV particles2016
Author(s)
Takasuke Fukuhara, Tomokazu Tamura , Mai Shiokawa , Chikako Ono , Satomi Yamamoto , Hiroyuki Mori , Takeshi Kurihara , Kentaro Uemura , Toru Okamoto , Hiroshi Aoki , Yoshihiro Sakoda , Yoshiharu Matsuura
Organizer
第64回日本ウイルス学会学術集会
Place of Presentation
札幌
Year and Date
2016-10-23 – 2016-10-25
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[Presentation] G28A mutation facilitates an efficient propagation of HCV in miR-122-independent manner2016
Author(s)
Chikako Ono, Takasuke Fukuhara, Daisuke Motooka, Shota Nakamura, Satomi Yamamoto, Hiroyuki Mori, Kentaro Uemura, Toru Okamoto, Su Su Hmwe, Kazuaki Chayama, Takaji Wakita, Kazuhiko Koike, and Yoshiharu Matsuura
Organizer
第64回日本ウイルス学会学術集会
Place of Presentation
札幌
Year and Date
2016-10-23 – 2016-10-25
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[Presentation] Non-canonical LC3 lipidation induced by HCV inhibits autophagic flux2016
Author(s)
Hiroyuki Mori, Takasuke Fukuhara, Chikako Ono, Tomokazu Tamura, Satomi Yamamoto, Kentaro Uemura, Toru Okamoto1, Masami Wada, Takeshi Noda, Tamotsu Yoshimori, Yoshiharu Matsuura
Organizer
第64回日本ウイルス学会学術集会
Place of Presentation
札幌
Year and Date
2016-10-23 – 2016-10-25
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[Presentation] Hepatitis C virus core protein interacts with Bnip3 and soppresses its dimerizatin and binding with LC32016
Author(s)
Takeya Tsusumi,Akari Kado,Kazuya Okushin,Kenichiro Enooku,Hidetaka Fiujinaga,Kyoji Moriya,Hiroshi Yotsuyanagi,Yumi Kanegae,Izumu Sauto,Yoshiharu Mtsuura,Kazuhiko Koike
Organizer
23rd International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
Place of Presentation
京都
Year and Date
2016-10-10 – 2016-10-14
Int'l Joint Research
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[Presentation] Human hepatic stellate cells are permissive for hepatitis C virus infection/replication and play important role in fibrosis2016
Author(s)
Takuma Zaitsu,Haruyo Aoyagi,Mami Matsuda,Noriyuki Watanabe,Akira Fujimoto,Koichi Watashi,Ryosuke Suzuki,Takasuke Fukuhara,Yoshiharu Matsuura,Kenjiro Wake,Tetsuro Suzuki,Tomokazu,Matsuura,Koji Tamura,Takaji Wakita,Hideki Aizaki
Organizer
23rd International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
Place of Presentation
京都
Year and Date
2016-10-10 – 2016-10-14
Int'l Joint Research
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[Presentation] Single peptide peptidase a target for anti-HCV drug2016
Author(s)
Toru Okamoto,Junki Hirano,Tatsuya Suzuki, ,Shinji Kusakabe,Takasuke Fukuhara Kohji Moriishi,Kazuhiko Koike and Yoshiharu Matsuura
Organizer
23rd International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
Place of Presentation
京都
Year and Date
2016-10-10 – 2016-10-14
Int'l Joint Research
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