2019 Fiscal Year Annual Research Report
Repertoire analysis of neo-self-recognizing receptors
| Project Area | Creation, function and structure of neo-self |
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| Project/Area Number |
16H06499
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
岸 裕幸 富山大学, 学術研究部医学系, 教授 (60186210)
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| Project Period (FY) |
2016-06-30 – 2021-03-31
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| Keywords | ネオ・セルフ / レパートリー解析 / TCR / 抗体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
T細胞はT細胞受容体（TCR）を用いて、標的細胞表面の主要組織適合抗原（MHC）分子に抗原ペプチドが結合したMHC/ペプチド複合体を認識し活性化される。近年、抗原ペプチドに加えて変性したタンパク質そのものがMHC分子に結合し抗原提示されることが明らかにされた。本新学術領域では、セルフのMHC分子にこのような抗原が結合した複合体を「ネオ・セルフ」として包括的に抗原提示を理解することで、自己免疫疾患の発症機序等を明らかにすることを目的としている。我々は、B細胞、T細胞の単一細胞解析により、B細胞からは抗原特異的抗体、T細胞からは抗原特異的TCRを効率よく取得する方法を開発してきた。本新学術領域ではリンパ球の単一細胞解析により、ネオ・セルフに反応するリンパ球のレパートリー解析およびその抗原受容体を取得し、ネオ・セルフとの反応を解析する。2019年度は、ネオ・セルフを認識する抗体の取得法の開発を行った。すなわち、ウサギに可溶化MHC/ペプチド複合体を免疫し、マイクロウェルアレイチップを用いた単一細胞解析により、MHC/ペプチド複合体を認識する抗体の取得を試みた。通常通り、チップ上で、MHC/ペプチド複合体に結合する抗体を産生している細胞を同定し、その細胞より抗体を取得すると、取得される抗体は、抗原ペプチド非特異的にMHC分子に結合する抗体がほとんどであった。そこで、チップ上でMHC/ペプチド複合体に結合する抗体を産生する細胞を同定する際に、抗原でないペプチドを結合したMHC分子でブロッキングを行ったところ、取得された抗体のほとんどが目的の抗原ペプチドが結合したMHC分子を特異的に認識する抗体であった。現在、本方法を用いて、ネオ・セルフを特異的に認識する抗体の取得を試みている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
抗原ペプチド/MHC分子複合体を認識する受容体は通常T細胞のTCRである。TCRの抗原ペプチド/MHC分子複合体に対する親和性は通常10^-5M以下であり、非常に弱い。可溶化TCRを作製しても細胞表面上の抗原ペプチド/MHC分子複合体への結合を検出することは困難である。それに対し、今回作製した抗原ペプチド/MHC分子複合体を認識する抗体の親和性は高く、細胞表面上の抗原ペプチド/MHC分子複合体の検出は可溶化TCRに較べ容易と予想される。従って、抗原ペプチド/MHC分子複合体を認識する抗体の作製は、今後のネオ・セルフの解析に有用であると期待され、おおむね順調に進展していると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
ネオ・セルフに対するTCRおよび抗体を取得し、ネオ・セルフの構造・発現、TCR等との反応様式等を解析していく。
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[Journal Article] T cell receptor (TCR) repertoire analysis of tumor-infiltrating lymphocytes of primary and metastatic tumors in colorectal cancer shows the relationship between TCR clonotype and PD-1 expression.2020
Author(s)
Sukegawa K, Shitaoka K, Hamana H, Kobayashi E, Miyahara Y, Fujii K, Tsuda K, Saeki S, Nagata T, Ozawa T, Saito S, Fujii T, Muraguchi A, Shiku H, Kishi H.
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Journal Title
Eur. J. Immunol.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] The identification of a common loss-function mutation across different HLA class alleles frequently detected in patients with acquired aplastic anemia.2019
Author(s)
Mizumaki H, Hosomichi K, Tanabe M, Yoroidaka T, Imi T, Hosokawa K, Katagiri T, Takamatsu H, Ozawa T, Azuma F, Kishi H, Tajima A, Nakao S.
Organizer
24th Congress of European Hematology Association
Int'l Joint Research
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[Presentation] Identification of T-cell receptors specific to antigens presented by HLA-B4002 and B5401 in acquired aplastic anemia.2019
Author(s)
Hosokawa K, Kobayashi E, Akatsuka Y, Espinoza L, Nakagawa N, Tanabe M, Tsuji N, Yoroidaka T, Mizumaki H, Mai A.T.N., Katagiri T, Shitaoka K, Hamana H, Kishi H, Nakao S.
Organizer
61st Annual Meetings of American Society of Hematology
Int'l Joint Research
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[Presentation] Identification of T cell receptors specific to antigens presented by HLA-B4002 in aplastic anemia.2019
Author(s)
Hosokawa K, Kobayashi E, Akatsuka Y, Espinoza L, Nakagawa N, Tanabe M, Tsuji N, Yoroidaka T, Mizukami H, Mai A. T. N, Katagiri T, Shitaoka K, Hamana H, Kishi H, Nakao S.
Organizer
第81回日本血液学会学術集会
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