2019 Fiscal Year Annual Research Report
網羅的3次元観察技術による細胞のダイバーシティー検証
| Project Area | Integrated analysis and regulation of cellular diversity |
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| Project/Area Number |
17H06328
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
洲崎 悦生 東京大学, 大学院医学系研究科(医学部), 准教授 (10444803)
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| Project Period (FY) |
2017-06-30 – 2022-03-31
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| Keywords | 細胞・組織 / イメージング / 組織透明化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
CUBIC技術における種々のラベリング手法およびイメージング法の検証(前年度よりの継続計画): 透明化した組織から生物学的に意味のある情報を抽出するためには、研究目的に応じた細胞ラベリング法とイメージング法の組み合わせが必須となる。この目的のため、これまで検証が進んでいる種々の遺伝学的手法、ウイルスベクター、組織化学的染色等の各種ラベリング手法を本領域内で使用する各種臓器、オルガノイド、動物発生胚、昆虫等の様々な検体に適用し、CUBIC技術とのコンパチビリティや各ラベル法の最適条件の検証を昨年度に引き続き進めた。また、取得した3次元画像から生物学的情報を抽出する目的のため、ラベルされた細胞や解剖学的構造を抽出(セグメンテーション)し定量解析するのに必要な 種々の画像解析法を適応し検討した。特に今年度は、染色剤や抗体の組織内浸透原理の解明に基づくボトムアップなプロトコル構築を完了させ、多色全臓器染色の例や霊長類組織の例を含む実証データを多数取得し、プロトコル構築のアイデアや基礎データと合わせて論文投稿した。また、領域内でCUBICの利用を促進するためのコンサルティングや共同研究等の支援を引き続き実施した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
全体的に研究計画に沿った形で研究が進行し、共同研究を含めた論文を発表したため、概ね順調な推移と判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
CUBIC技術における種々のラベリング手法およびイメージング法の検証(前年度よりの継続計画)：透明化した組織から生物学的に意味のある 情報を抽出するためには、研究目的に応じた細胞ラベリング法とイメージング法の組み合わせが必須となる。この目的のため、これまで検証が進んでいる種々のラベリング手法を本領域内で使用するオルガノイド、動物発生 胚 、昆虫等の様々な検体に適用し、CUBIC技術とのコンパチビリティや各ラベル法の最適条件の検証を昨年度に引き続き進める。特に今年度は、研究代表者が昨年までに構築した新規3次元染色手法(CUBIC-HV)を拡張し、神経組織だけでなくがん組織や炎症組織などを構造的・機能的にラベルするための各種抗体等のコンパチビリティをテストし、3次元観察の適用性を検討する。また、ウイルスベクターによるラベリング手法と、それ以外の手法を組み合わせた検出法についても検討を予定している。
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[Journal Article] Novel 3D analysis using optical tissue clearing documents the evolution of murine rapidly progressive glomerulonephritis.2019
Author(s)
Puelles VG,Fleck D,Ortz L,Papadouri S,Strieder T,B_hner AMC,van der Wolde JW,Vogt M,Saritas T,Kuppe C,Fuss A,Menzel S,Klinkhammer BM,M_ller-Newen G,Heymann F,Decker L,Braun F,Kretz O,Huber TB,Susaki EA,Ueda HR,Boor P,Floege J,Kramann R,Kurts C,Bertram JF,Spehr M,Nikolic-Paterson DJ,Moeller MJ
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Journal Title
Kidney international
Volume: 96
Pages: 505-516
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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