2023 Fiscal Year Annual Research Report
Comprehensive research of signal transduction of cell
Project Area | Information physics of living matters |
Project/Area Number |
19H05797
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
石島 秋彦 大阪大学, 大学院生命機能研究科, 教授 (80301216)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福岡 創 大阪大学, 大学院生命機能研究科, 准教授 (50447190)
蔡 栄淑 大阪大学, 大学院生命機能研究科, 助教 (40378716)
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Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2024-03-31
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Keywords | 走化性 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究は,バクテリア走化性に関わるすべてのタンパク質の挙動を1 細胞レベルでイメージングすることにある. 特に, 走化性に関わるCheYとCheZ双方に蛍光色素を導入しFRET計測を行った.その結果,セリンなどの誘因物質投与後にFRET効率が下がり,数十秒後にFRET効率が復活した.これは適応現象を観察したことになる.今まで使ってきた大腸菌は複数の受容体が混在しているWildタイプを用いてきた.しかし,セリンに応答する受容体は,Tsrという受容体のみである.この受容体の混在とセリン応答に対する感度との関係を調べた.その結果,予想とは逆にTsr単体ではセリン感受性が減少した.これは受容体ファミリーが混在した状況の方が,セリンを含めてより感度が上昇するということになる.現在,Tsr単体にあえて他の受容体を混在させることでその応答を調べている. また,適応現象に必要なCheBに蛍光標識を行い,細胞極への局在状況を計測した.イソロイシンなどの忌避物質投与後の極の蛍光強度,持続時間は,同じ条件においても実験結果がかなりばらつくことがわかり,その原因について検討した.その対策として,個々の大腸菌の応答を調べるのではなく,系全体の複数の菌の応答を同時に計測することによって実験誤差を減少させたときの応答を計測した.この系では蛍光とモーターの回転を同時に計測することはできないが,100個単位の大腸菌の応答を同時に計測・解析することが可能となる.その結果,個々の計測に比べて明らかにばらつきが減少した.このことは,実験の環境,季節,気温,湿度,研究者の体調によってデータがばらついていたことをしめす.しかし,まだ有意なばらつきは存在する.現在,このばらつきが大腸菌固有のものなのか,実験条件(菌の体積,長さ,濃度などなど)なのかを検討しているところである.
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Research Progress Status |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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