• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2012 Fiscal Year Annual Research Report

配偶子形成とゲノム刷込みのエピゲノム制御機構

Planned Research

Project AreaThe germline: its developmental cycle and epigenome network
Project/Area Number 20062010
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

佐々木 裕之  九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (30183825)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 秦 健一郎  国立成育医療研究センター, 周産期病態研究部, 部長 (60360335)
Project Period (FY) 2008-04-01 – 2013-03-31
Keywords発生・分化 / 発現制御 / 生殖細胞 / エピゲノム / ゲノム刷込み
Research Abstract

交付申請書の実施計画にそって最終年度の研究を行い、以下の成果を得た。(1)DNAメチル化酵素制御因子Dnmt3Lと相互作用する機能未知Ca依存性プロテアーゼ様タンパク質の機能を解析した。自己消化アッセイではプロテアーゼ活性は検出限界以下だった。同遺伝子周辺の特殊な構造により、ターゲティングベクターによるノックアウトマウスが得られなかったため、化学変異原誘発突然変異ライブラリーの利用を進めている(分担者の秦が担当)。(2)雄性生殖細胞でpiRNAの生合成に関わるMitoPLDのノックアウト卵子を用いて、同因子が卵子では特定のレトロトランスポゾン由来のpiRNAの合成だけに関与すること、及びインプリンティングに関わらないことを見つけた。また、パキテン期精母細胞で外来DNAからpiRNAを合成することに成功し、これが遺伝子サイレンシングのツールとして利用可能であることを報告した(Genome Res,2013)。(3)アイコンプローブ(5-メチルシトシンに高い親和性を示す)による蛍光in situハイブリダイゼーションとオスミウムによる固定化で、サテライト配列のメチル化状態を単一細胞レベルで可視化し、これまで非メチル化であると考えられていた雄性生殖細胞のサテライト配列が実はヒドロキシメチル化されていることを論文にまとめて投稿した。シングルコピー配列の検出には至らず、さらなるブレイクスルーが必要である。(4)各種DNAメチル化酵素Dnmtのノックアウト卵子を用いて、我々が発見した卵子の非CpGメチル化はDnmt3aとDnmt3Lの複合体により触媒されることを見出した。また、DNA複製時にメチル化パターンをコピーする維持メチル化酵素Dnmt1が、DNA複製を終えた卵子でヘミメチル化CpGをメチル化することで、de novoメチル化の補助を行なっていることを見つけた。以上の結果を取りまとめて報告した(PLoSGenet.印刷中)。

  • Research Products

    (7 results)

All 2013 2012 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Accumulation and loss of asymmetric non-CpG methylation during malegerm-cell development3.2013

    • Author(s)
      Ichiyanagi, T., et al
    • Journal Title

      Nucl. Acids Res.

      Volume: 41 Pages: 738-745

    • DOI

      10.1093/nar/gks1117

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Targeted gene silencing in mouse germ cells by insertion of a homologous DNA into a piRNA generating locus. Genome Res. 23, 292-2992013

    • Author(s)
      Yamamoto, Y., et al
    • Journal Title

      Genome Res.

      Volume: 23 Pages: 292-299

    • DOI

      10.1101/gr.137224.112

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Mouse oocyte methylomes at base resolution reveal genome-wide accumulation of non-CpG methylation and role of DNA methyltransferases.2013

    • Author(s)
      Shirane, K., et al
    • Journal Title

      PLoS Genet.

      Volume: (in press)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Sequences in the H19 ICR that are transcribed as small RNA in oocytes are dispensable for methylation imprinting in YAC transgenic mice.2012

    • Author(s)
      Takahashi, T., et al
    • Journal Title

      Gene

      Volume: 508 Pages: 26-34

    • DOI

      10.1016/j.gene.2012.07.062

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An atomic model of ZFP57 recognition of CpG methylation within a specific DNA sequence.2012

    • Author(s)
      Liu, Y., et al
    • Journal Title

      Genes Dev.

      Volume: 26 Pages: 2374-2379

    • DOI

      10.1101/gad.202200.112

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 次世代遺伝子解析技術を用いた生殖発生異常のゲノム研究2012

    • Author(s)
      秦健一郎
    • Organizer
      第30回日本受精着床学会学術講演会
    • Place of Presentation
      大阪国際会議場(グランキューブ大阪)(招待講演)
    • Year and Date
      2012-08-31
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.brc.riken.go.jp/lab/mcd/germline/index.html#

URL: 

Published: 2014-07-16  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi