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2008 Fiscal Year Annual Research Report

シャペロニンの構造揺らぎとフォールディング介助機能

Planned Research

Project AreaMolecular Science of Fluctuations toward Biological Functions
Project/Area Number 20107009
Research InstitutionNational Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities

Principal Investigator

桑島 邦博  National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities, 岡崎統合バイオサイエンスセンター, 教授 (70091444)

Keywords生物物理 / 分子機械 / 分子認識 / 生体分子 / 蛋白質 / 分子シャペロン / アロステリック転移 / シャペロニン
Research Abstract

分子シャペロンは細胞内のタンパク質フォールディングに関わり、分子レベルの生命現象であるタンパク質フォールディングと細胞レベルの生命現象とを結びつける重要な概念である。本研究では、分子シャペロンの構造揺らぎと機能発現との関係を物理化学的に明らかにする。ジメチルスルフォキシド(DMSO)停止水素重水素交換法と二次元NMRを利用して、さまざまなシャペロニン複合体中のGroESの水素交換反応を追跡し、生物機能が構造揺らぎをどのように利用しているかを明らかにする。
平成20年度は、以下の研究を行った。
(1)二次元NMRスペクトルにおけるGroESの主鎖アミドプロトンの帰属:^<13>C-^<15>N二重標識したGroESを調整し、分子研の920MHzNMR装置を利用して95%DMSOの中におけるGroESのアミドプロトンの帰属をHNCACBとCBCACONHスペクトルを測定して行った。現在、約7割のアミドプロトンの帰属を終えている。
(2)遊離GroESの水素交換反応の測定:上記の帰属結果を基に、遊離GroESの水素交換反応測定を500MHzNMR装置を用いて行い、反応を定量的に追跡することが十分可能であることを確認した。水素交換反応は天然条件下で行い、NMR測定は溶媒を95%DMSOに置換後に行った。

  • Research Products

    (7 results)

All 2009 2008 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (2 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Non-native α-helix formation is not necessary for folding of lipocalin : Comparison of burst-phase folding between tear lipocalin and β-lactoglobulin2009

    • Author(s)
      S. TSUKAMOTO
    • Journal Title

      Proteins (掲載確定 印刷中)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Sequential Action of ATP-dependent Subunit Conformational Change and Interaction between Helical Protrusions in the Closure of the Built-in Lid of Group II Chaperonins2008

    • Author(s)
      T. KANZAKI
    • Journal Title

      J. Biol. Chem. 283

      Pages: 34773-34784

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Probing force-induced unfolding intermediates of a single staphylococcal nuclease molecule and the effect of ligand binding2008

    • Author(s)
      T. ISHII
    • Journal Title

      Biochem. Biophys. Res. Commun. 375

      Pages: 586-591

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Molecular Mechanisms of the Chaperone Function of GroEL2008

    • Author(s)
      桑島 邦博
    • Organizer
      8th KIAS-Yonsei Conference on Protein Structure and Function
    • Place of Presentation
      Seoul, Korea
    • Year and Date
      2008-10-11
  • [Presentation] Folding Mechanisms of Homologous Proteins : A Comparative Study between Lysozyme and α-Lactalbumin2008

    • Author(s)
      桑島 邦博
    • Organizer
      ACS 236^<th> National Meeting Symposium
    • Place of Presentation
      Philadelphia, U. S. A.
    • Year and Date
      2008-08-21
  • [Book] Water and Biomolecules-Physical Chemistry of Life Phenomena2009

    • Author(s)
      K. Kuwajima
    • Total Pages
      307
    • Publisher
      Springer-Verlag, Berlin & Heidelberg
  • [Remarks]

    • URL

      http://gagliano.ims.ac.jp/Welcome.html

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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