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2013 Fiscal Year Annual Research Report

アロ認証研究のための次世代技術の開発と活用

Planned Research

Project AreaElucidation of Common Mechanisms for Allogeneic Authentication in Animals and Plants
Project/Area Number 21112004
Research InstitutionUniversity of Tsukuba

Principal Investigator

稲葉 一男  筑波大学, 生命環境系, 教授 (80221779)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 笹倉 靖徳  筑波大学, 生命環境系, 准教授 (10400649)
Project Period (FY) 2009-07-23 – 2014-03-31
Keywordsカラクシン / 精子鞭毛 / ダイニン / プロテオミクス / イメージング / トランスジェニック技術 / ホヤ
Research Abstract

本研究では海産無脊椎動物カタユウレイボヤを中心として、主に海産動物を用いた精子の卵へのアクセス機構、運動活性化機構、ならびにアロ認証研究に必須である配偶子イメージング、プロテオミクス、トランスジェニック技術の開発と共同研究の推進を行うことを目的として研究を進めた。
(1)卵因子によるホヤ精子運動活性化の際に脱リン酸化を受ける内腕ダイニンの分離、精製を進め、2頭構造をもつf/I1ダイニンのサブユニット構造と1頭内腕ダイニンの構造の一部を明らかにした。
(2)精子運動活性化の際に重要な膜貫通型アデニリルシクラーゼtmACが卵因子を受容後に見られる一時的なcAMP増加に関与し、基本的な運動活性化に関与すること、および可溶型アデニリルシクラーゼsACは精子の基底状態のcAMP濃度の維持と、鞭毛の非対称化を伴う精子走化性、および振動数の増加に関与することが明らかになった。
(3)体内受精を行なう海産の巻貝であるマガキガイの精子運動の研究を進め、放出された精子束が解離するために、鞭毛を極端に非対称化させて後進する運動と、鞭毛の先端から根元に向かって屈曲が伝わる後進運動が存在することがわかった。
(4)カタユウレイボヤにおいて、組織特異的プロモーターを利用して条件的遺伝子破壊ができること、生殖細胞ゲノムに変異を導入し遺伝子機能欠損系統を樹立できることを示した。また、Crispr/Cas9システムを用いてもカタユウレイボヤに変異を導入できることやその変異効率、発現ベクター系の作製を達成した。
(5)領域内共同研究等により、ウズラ精子の貯蔵器官における運動調節とHSP70の機能、イモリ精子運動調節における異なるカルシウムチャネルの存在と機能調節、アサリ精子の5-HTによる運動活性化における細胞内pHとカルシウムの役割について明らかとなった。

Current Status of Research Progress
Reason

25年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

25年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (46 results)

All 2014 2013 Other

All Journal Article (13 results) (of which Peer Reviewed: 8 results) Presentation (28 results) (of which Invited: 9 results) Book (3 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] カルシウムシグナルによる哺乳類精子超活性化の制御2014

    • Author(s)
      稲葉一男
    • Journal Title

      細胞工学

      Volume: Vol.33(4) Pages: 366-371

  • [Journal Article] Tissue-specific and ubiquitous gene knockouts in Ciona by electroporating TALENs provide new approaches to investigate gene functions.2014

    • Author(s)
      Treen N, Yoshida K, Sakuma T, Sasaki H, Kawai N, Yamamoto T, Sasakura Y.
    • Journal Title

      Development

      Volume: 141 Pages: 481-487

    • DOI

      10.1242/dev.099572

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Germ cell mutations of the ascidian Ciona intestinalis with TALE nucleases.2014

    • Author(s)
      Yoshida K, Treen N, Hozumi A, Sakuma T, Yamamoto T, Sasakura Y.
    • Journal Title

      Genesis

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1002/dvg.22770

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] ホヤにおけるTALENを用いた遺伝子改変2014

    • Author(s)
      Nicholas Treen, 吉田慶太、佐々木陽香、笹倉靖徳
    • Journal Title

      実験医学

      Volume: 別冊 Pages: 161-168

  • [Journal Article] Autonomous changes in the swimming direction of sperm in the gastropod Strombus luhuanus.2014

    • Author(s)
      Shiba K, Shibata D, Inaba K.
    • Journal Title

      Journal of Experimental Biology

      Volume: 217 Pages: 986-996

    • DOI

      10.1242/jeb.095398

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Roles of extracellular ions and pH in 5-HT-induced sperm motility in marine bivalve.2014

    • Author(s)
      Alavi SM, Matsumura N, Shiba K, Itoh N, Takahashi KG, Inaba K, Osada M.
    • Journal Title

      Reproduction

      Volume: 147 Pages: 331-345

    • DOI

      10.1530/REP-13-0418

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Protease in sturgeon sperm and the effects of protease inhibitors on sperm motility and velocity2014

    • Author(s)
      Alavi SM, Inaba K, Ciereszko A, Linhart O. et al
    • Journal Title

      Fish Physiology and Biochemistry

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1007/s10695-014-9933-8

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Ascidians as excellent models for studying cellular events in the chordate body plan.2013

    • Author(s)
      Ogura Y, Sasakura Y.
    • Journal Title

      Biological Bulletin

      Volume: 224 Pages: 227-236

  • [Journal Article] 脊索動物ホヤにおけるゲノム改変技術2013

    • Author(s)
      河合成道、笹倉靖徳
    • Journal Title

      細胞工学

      Volume: 32 Pages: 553-557

  • [Journal Article] Sperm activation by heat shock protein 70 supports the migration of sperm released from sperm storage tubules in Japanese quail (Coturnix japonica).2013

    • Author(s)
      Hiyama G, Matsuzaki M, Mizushima S, Dohra H, Ikegami K, Yoshimura T, Shiba K, Inaba K, Sasanami T.
    • Journal Title

      Reproduction

      Volume: 147 Pages: 167-178

    • DOI

      10.1530/REP-13-0439

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Distinct Ca2+ channels maintain a high motility state of the sperm that may be needed for penetration of egg jelly of the newt, Cynops pyrrhogaster.2013

    • Author(s)
      Takahashi T, Kutsuzawa M, Shiba K, Takayama-Watanabe E, Inaba K, Watanabe A.
    • Journal Title

      Dev Growth Differ

      Volume: 55 Pages: 657-667

    • DOI

      10.1111/dgd.12073

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Glutathione transferase theta in apical ciliary tuft regulates mechanical reception and swimming behavior of Sea Urchin Embryos.2013

    • Author(s)
      Jin Y, Yaguchi S, Shiba K, Yamada L, Yaguchi J, Shibata D, Sawada H, Inaba K.
    • Journal Title

      Cytoskeleton

      Volume: 70 Pages: 453-470

    • DOI

      10.1002/cm.21127

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 精子が卵を目指すしくみ―運動の方向転換を司るタンパク質「カラクシン」2013

    • Author(s)
      水野克俊、柴小菊、稲葉一男
    • Journal Title

      遺伝

      Volume: 67 Pages: 610-617

  • [Presentation] Genome editing with TALENs and Crispr/Cas9 in the ascidian Ciona intestinalis2014

    • Author(s)
      Treen N, Sasakura Y
    • Organizer
      International symposium on RNAi and genome editing method
    • Place of Presentation
      徳島大学 (徳島)
    • Year and Date
      20140315-20140315
    • Invited
  • [Presentation] カタユウレイボヤにおけるCRISPR/Cas システムを用いたゲノム編集2013

    • Author(s)
      佐々木陽香、笹倉靖徳、他
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド
    • Year and Date
      20131205-20131205
  • [Presentation] Calaxin is a calcium sensor for turning of sperm movement2013

    • Author(s)
      Inaba K
    • Organizer
      ICBME 2013
    • Place of Presentation
      National University of Singapore
    • Year and Date
      20131205-20131205
    • Invited
  • [Presentation] 人工ヌクレアーゼTALEN を用いたカタユウレイボヤの突然変異体系統の作製2013

    • Author(s)
      吉田慶太、笹倉靖徳、他
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド
    • Year and Date
      20131204-20131204
  • [Presentation] カタユウレイボヤ卵を用いた母性mRNAの新規発現抑制系の開発2013

    • Author(s)
      飯塚貴子、笹倉靖徳、他
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド
    • Year and Date
      20131204-20131204
  • [Presentation] Ascidian genome editing using TALENs2013

    • Author(s)
      Treen N、笹倉靖徳、他
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド
    • Year and Date
      20131203-20131203
  • [Presentation] 精子運動の方向転換を司るカルシウム結合タンパク質「カラクシン」:軸糸ダイニン調節の分子系統学的考察2013

    • Author(s)
      稲葉一男
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートピアホテル
    • Year and Date
      20131203-20131203
    • Invited
  • [Presentation] 受精時の精子運動性のイメージング2013

    • Author(s)
      稲葉一男
    • Organizer
      第58回日本生殖医学会学術講演会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場
    • Year and Date
      20131105-20131105
    • Invited
  • [Presentation] Calaxin is a Ca2+-dependent dynein modulator in opisthokonts: A phylogenetic consideration on the evolution of cilia and flagella2013

    • Author(s)
      Inaba K
    • Organizer
      International Workshop Dynein 2013
    • Place of Presentation
      Orbis Hall, Kobe
    • Year and Date
      20131031-20131103
    • Invited
  • [Presentation] THE EFFECT OF CYCLIC AMP-DEPENDENT PHOSPHORYLATION OF OUTER DYNEIN ARM ON SPERM FLAGELLAR MOVEMENTS OF CIONA2013

    • Author(s)
      Kutomi O, Inaba K
    • Organizer
      International Workshop Dynein 2013
    • Place of Presentation
      Orbis Hall, Kobe
    • Year and Date
      20131031-20131103
  • [Presentation] DISTINCT ROLES OF CENTRAL APPARATUS AND OUTER ARM DYNEIN IN THE Ca2+-DEPENDENT REGULATION OF FLAGELLAR BENDING2013

    • Author(s)
      Wang Y, Inaba K et al
    • Organizer
      International Workshop Dynein 2013
    • Place of Presentation
      Orbis Hall, Kobe
    • Year and Date
      20131031-20131103
  • [Presentation] Comparative analysis of flagellar motility of chytrid zoospores and metazoan sperm2013

    • Author(s)
      Shiba K, Inaba K
    • Organizer
      International Workshop Dynein 2013
    • Place of Presentation
      Orbis Hall, Kobe
    • Year and Date
      20131031-20131103
  • [Presentation] ウニ胚行動における頂毛GST の機械的な応答の制御2013

    • Author(s)
      金銀華、稲葉一男、他
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] ツボカビ類遊走子と動物精子鞭毛運動の比較解析2013

    • Author(s)
      柴小菊、稲葉一男
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] ホヤ精子形成における鞭毛内輸送(IFT)の役割2013

    • Author(s)
      櫻井晴佳、稲葉一男
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] マガキガイ異型精子特異的なタンパク質の同定2013

    • Author(s)
      柴田大輔、稲葉一男
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] 海産二枚貝の精子運動はセロトニンに誘導される2013

    • Author(s)
      Alavi H, InabaK, Osada N et al
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] リアノジンはイモリ精子中片後側の細胞内Ca2+を増加させる2013

    • Author(s)
      高橋智恵、稲葉一男、渡邊明彦、他
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] 体細胞核を移植したウズラ胚の発生2013

    • Author(s)
      水島秀成、稲葉一男、笹浪知宏、他
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] ホヤ精子運動性におけるpH の影響と受精2013

    • Author(s)
      泉水奏、稲葉一男、他
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      20130926-20130928
  • [Presentation] 脊索動物ホヤにおける遺伝学的技術を用いた発生メカニズムの解明2013

    • Author(s)
      笹倉靖徳
    • Organizer
      日本動物学会第84回大会
    • Place of Presentation
      岡山大学(岡山)
    • Year and Date
      20130926-20130926
    • Invited
  • [Presentation] カラクシンの微小管滑り運動活性抑制に対するダイニンリン酸化の効果2013

    • Author(s)
      久冨理、稲葉一男
    • Organizer
      第4回繊毛研究会
    • Place of Presentation
      東京大学
    • Year and Date
      20130906-20130906
  • [Presentation] 外腕ダイニン結合タンパク質「カラクシン」の進化系統学的考察2013

    • Author(s)
      稲葉一男
    • Organizer
      第4回繊毛研究会
    • Place of Presentation
      東京大学
    • Year and Date
      20130906-20130906
  • [Presentation] 精子運動の方向を制御するメカニズム2013

    • Author(s)
      稲葉一男
    • Organizer
      日本アンドロロジー学会第32回学術大会
    • Place of Presentation
      グランキューブ大阪
    • Year and Date
      20130727-20130727
    • Invited
  • [Presentation] Exploring functions of ascidian Hox genes in adult tissue formation2013

    • Author(s)
      Kawai N, Sasakura Y
    • Organizer
      7th Tunicate Meeting
    • Place of Presentation
      Naples, Italy
    • Year and Date
      20130725-20130725
  • [Presentation] Knockout of genes with TALE nucleases in the chordate Ciona intestinalis2013

    • Author(s)
      Sasakura Y
    • Organizer
      The 46th annual meeting for the Japanese society of developmental biologists
    • Place of Presentation
      くにびきメッセ(松江)
    • Year and Date
      20130531-20130531
    • Invited
  • [Presentation] TALEN gene targeting: A new frontier for ascidian genetics2013

    • Author(s)
      Treen N、笹倉靖徳、他
    • Organizer
      The 46th annual meeting for the Japanese society of developmental biologists
    • Place of Presentation
      くにびきメッセ(松江)
    • Year and Date
      20130528-20130531
  • [Presentation] Regulation of ciliary and flagellar movement by a novel calcium sensor calaxin2013

    • Author(s)
      Inaba K
    • Organizer
      TLL Seminar
    • Place of Presentation
      TEMASEK Lifesciences Laboratory, Singapore
    • Year and Date
      2013-12-09
    • Invited
  • [Book] Sexual Reproduction in Animals and Plants2014

    • Author(s)
      笹倉靖徳
    • Total Pages
      480
    • Publisher
      Springer
  • [Book] Sexual Reproduction in Animals and Plants2014

    • Author(s)
      稲葉一男
    • Total Pages
      480
    • Publisher
      Springer
  • [Book] 動植物の受精学2014

    • Author(s)
      稲葉一男、他
    • Total Pages
      340
    • Publisher
      東京化学同人
  • [Remarks] 筑波大学下田臨海実験センター

    • URL

      http://www.shimoda.tsukuba.ac.jp/~inaba/

  • [Remarks] 新学術領域研究「動植物に共通するアロ認証機構の解明」

    • URL

      http://allo-authentication.net

URL: 

Published: 2015-05-28  

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