線虫の生殖巣形成における上皮と基底膜のクロストーク

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project Area: Cross-talk between moving cells and microenvironment as a basis of emerging order in multicellular systems
• Project/Area Number: 22111005
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Research Institution: Kwansei Gakuin University
• Principal Investigator: 西脇 清二 関西学院大学, 理工学部, 教授 (30342827)
• Keywords: 線虫 / ADAMTS family / MIG-17 / GON-1 / 基底膜 / アクチン繊維 / 微小管

Research Abstract

1.生殖巣リーダー細胞DTCの細胞骨格の詳細な挙動解析:
Moesin(ABD)-EGFPおよびVAB-10(MTBD)-Venusを発現するトランスジェニック株を用いて、DTCのアクチンおよび微小管の挙動を、共焦点レーザー顕微鏡を用いて解析した。アクチン繊維は細胞表層に沿ったネットワークが見られ、z-slice画像を3次元で再構築すると、DTCは背側に移動する際に表皮と消化管の間に大きな葉状仮足を伸ばしていることが分かった。移動過程でのDTCの形態変化を初めて明かにした。抗VAB-10抗体はDTCの微小管全体を染色したが、VAB-10(MTBD)-VenusはDTCの後端の微小管に強く局在し、微小管のマーカーとしてはあまり適切ではないと思われる。
2.基底膜の制御に関わるADAMTSプロテアーゼGON-1の解析:
GON-1分子のC-末端のGONドメインに対するポリクローナル抗体を作成した。免疫組織染色ではシグナルを検出できなかったが、IPウエスタンでは期待される250kDaの位置にバンドが検出された。
goη-1変異体は生殖巣形成不全のため不妊となる。gon-1変異体に野生型gon-1遺伝子を染色体外アレイとして導入すると、生殖巣形成不全がレスキューされ、ホモで増殖可能となる。このようなトランスジェニック株を変異原EMSで処理することにより、染色体外アレイが脱落してもホモで増殖可能となった抑圧変異体16株を分離した。これらのうち4株は強い抑圧変異であり、今後これらを中心に解析を進めて行きたい。

Research Products

• [Journal Article] Chondroitin sulfate synthase-2/chondroitin polymerizing factor has two variants with distinct function (2010)
  • Author(s): Ogawa, H.
  • Journal Title: J.Biol.Chem Volume: 285 Pages: 34155-34167
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 線虫ADAMTSの細胞移動における役割 (2010)
  • Author(s): 菊地哲宏
  • Journal Title: 生化学 Volume: 82 Pages: 957-962
• [Presentation] The C.elegans spectraplakin VAB-10 regulates nuclear migration by linking actin and microtubule cytoskeletons in the gonadal distal tip cells (2010)
  • Author(s): Hon-Song Kim
  • Organizer: BMB2010
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-07
• [Presentation] Mutations Affecting Cessation of Gonadal Leader Cell Migration in C.elegans (2010)
  • Author(s): Tetsuhiro Kikuchi
  • Organizer: BMB2010
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-07
• [Presentation] C.elegansの生殖巣形成に働くGON-1/ADAMTS familyマトリックス分解酵素の欠損をIV型コラーゲンの変異が抑圧する (2010)
  • Author(s): 掛樋正樹
  • Organizer: BMB2010
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-07
• [Presentation] 線虫C.elegansの生殖巣形態形成を制御するmig-18遺伝子の解析 (2010)
  • Author(s): 森将隆
  • Organizer: BMB2010
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-07
• [Presentation] 線虫C.elegansのdrag-1遺伝子は神経軸索の分枝形成に機能する (2010)
  • Author(s): 筒井要
  • Organizer: BMB2010
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-07
• [Presentation] Mutations Affecting Cessation of Gonadal Leader Cell Migration in C.elegans (2010)
  • Author(s): Tetsuhiro Kikuchi
  • Organizer: 4th East Asia C.elegans Meeting
  • Place of Presentation: 国立オリンピック記念青少年総合センター(東京)
  • Year and Date: 2010-07-11
• [Presentation] The C.elegans spectraplakin VAB-10 regulates nuclear migration by linking actin and microtubule cytoskeletons in the gonadal distal tip cells (2010)
  • Author(s): Hon-Song Kim
  • Organizer: 4th East Asia C.elegans Meeting
  • Place of Presentation: 国立オリンピック記念青少年総合センター(東京)
  • Year and Date: 2010-07-11
• [Presentation] The C.elegans spectraplakin VAB-10 regulates nuclear migration by linking actin and microtubule cytoskeletons in the gonadal distal tip cells (2010)
  • Author(s): Kiyoji Nishiwaki
  • Organizer: EMBO Conference: C.elegans Development and Gene Expression
  • Place of Presentation: Heidelberg, Germany
  • Year and Date: 2010-06-17