2014 Fiscal Year Annual Research Report
新規ｉｎｔｒａｖｉｔａｌ蛍光イメージングシステムの開発とがん微小環境の解析
| Project Area | Mutli-dimensional fluorescence live imaging of cellular function and molecular activity |
|---|
| Project/Area Number |
22113004
|
|---|
| Research Institution | Ehime University |
|---|
Principal Investigator |
今村 健志 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (70264421)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2015-03-31
|
| Keywords | バイオテクノロジー / シグナル伝達 / 遺伝子 / 生体分子 / 細胞・組織 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では、蛍光実体顕微鏡をベースに、マウスが生きている状態で、その全体像から細胞レベルまでの観察を高空間分解能で可能な新規intravital(生体)蛍光観察システムを開発することである。さらに、細胞周期を可視化するFucciシステムを駆使して、生体内で冬眠状態にあるがん幹細胞を同定し、がん幹細胞マーカーをスクリーニングすることを試み、一方でがん細胞内部のシグナル伝達を可視化するバイオセンサーや微小環境を可視化する各種蛍光プローブを開発し、がん幹細胞とがん微小環境の相互作用を時空間的に可視化し、その分子メカニズムを明らかにすることを目的に研究を推進する。
本年度は、昨年度に構築し、最適化したマウス全体から細胞レベルまでズームアップで観察できる新規生体蛍光観察システムを用いて、実際にイメージングを行った。まず、昨年度のパイロットスタディーの結果をもとに、ヌードマウスの皮下にヒトがん細胞を移植したがんモデルを用いて、スキンフラップ法を施したのちにマクロからミクロのリアルタイムがん組織イメージングを行った。具体的には、腫瘍塊全体が観察可能な10x10 mm2から細胞レベルの観察可能な0.5x0.5 mm2までズームインを行い、同時に血管造影を行った。さらに応用として、透明な角膜組織で蛍光色素の流れをマクロからミクロで観察する機能解析に成功した。一方、細胞周期を可視化するFucciを導入したがん細胞株については、数種類の細胞株を用いて、in vitroとin vivoで抗がん剤耐性をスクリーニングした。mCherryやtdTomatoが発現するマウスおよび全身でSCAT3.1を発現するマウスの観察は終了した。
|
| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
Research Products
(2 results)
-
[Journal Article] In vivo subcellular imaging of tumors in mouse models using a fluorophore-conjugated anti-CEA antibody in TPEM2014
Author(s)
Shigehiro Koga, Yusuke Oshima, Naoki Honkura, Tadahiro Iimura, Kenji Kameda, Koichi Sato, Motohira Yoshida, Yuji Yamamoto, Yuji Watanabe, Atsuhiko Hikita, and Takeshi Imamura
-
Journal Title
Cancer Science
Volume: 105(10)
Pages: 1299-1306
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
