2013 Fiscal Year Annual Research Report
| Project Area | Regulation of polarity signaling during morphogenesis, remodeling, and breakdown of epithelial tubular structure |
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| Project/Area Number |
23112003
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
大野 茂男 横浜市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10142027)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 癌 / 再生医学 / 細胞・組織 / シグナル伝達 / 発生・分化 / 細胞極性 / プロテインキナーゼ / 細胞接着 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
幹前駆細胞の単離濃縮法、同定法、非対称分裂の検定法がほぼ確立している乳腺組織をモデルとして、幹細胞の自己更新、非対称分裂の検定法を利用し、細胞極性制御因子の役割、運命決定因子の役割を解析した。さらに、両者の相互作用を解析し、乳腺組織幹細胞の自己更新の 分子機構、自己更新における非対称分裂の役割、その分子機構の解析を進めた。
これまでに、管腔前駆細胞におけるaPKCラムダの特別な役割を見いだしてきたが、乳腺組織幹細胞における役割は不明であった。そこで、乳腺組織のプライマリー細胞中にごく微量に存在する、乳腺組織幹細胞、乳腺管腔前駆細胞などを生物学的に区別して定量・評価する手法の解析をすすめ、好感触を得た。具体的には試験管内のいくつかの培養系を検討し、乳腺組織幹細胞、乳腺管腔前駆細胞などを、区別して定量評価する事が可能となってきた。さらに、aPKCラムダのshRNAを発現するレンチウィルスベクター、aPKCの阻害ペプチドなどを用いて、その役割の解析を進めた。そして、aPKCラムダの乳腺前駆細胞における役割と乳腺管腔前駆細胞における役割が大きく異なるとの、予備的な結果を得た。
p53 系、Notch 系、Hippo 系の分子群についても検討を進めるツールの作成を進めた。
一方、上述の試験管内での実験と平行して、マウスレベルでaPKCの役割を評価するために、aPKCラムダのcKOマウスを用いて乳腺組織幹細胞で確実にaPKCラムダ遺伝子をKOデキルマウスラインの樹立を進めた。さらに、aPKCゼータのKOマウスとの掛け合わせを進め、aPKCラムダとゼータを明確に区別する実験系を揃えた。また、p53 系、Notch 系、Hippo 系の分子群についてのKOマウスの準備も進めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
性成熟後の乳腺組織前駆細胞に加えて、乳腺組織幹細胞の維持機構に関して、初代培養細胞に試験管内で遺伝子操作を施す新たな解析系を確立し、極めて興味深い予備的な結果を得た。
平行して、生体レベルでの検証に向けて、組織幹細胞で遺伝子操作を確実に行う為の系を整えた。全体を通じて、本研究は概ね順調に進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
性成熟後の乳腺組織前駆細胞及び幹細胞の維持機構に関して、試験管内での培養系を用いて、極めて興味深い結果が得られてきたので、その検証を様々な角度から進める。さらに、生体マウスを用いる系の準備が整ったので、vivoでの検証も平行して進める。 さらに、aPKC-PAR系の上流及び制御因子、下流因子などの同定も進んだので、これらとの関係を調べる準備も進める。
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[Journal Article] The phosphorylation of HIV-1 Gag by atypical protein kinase C facilitates viral infectivity by promoting Vpr incorporation into virions.2014
Author(s)
Kudoh A, Takahama S, Sawasaki T, Ode H, Yokoyama M, Okayama A, Ishikawa A, Miyakawa K, Matsunaga S, Kimura H, Sugiura W, Sato H, Hirano H, Ohno S, Yamamoto N, Ryo A
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Journal Title
Retrovirology
Volume: 11
Pages: 9
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Polarity-dependent distribution of angiomotin localizes Hippo signaling in preimplantation embryos.2013
Author(s)
Hirate Y, Hirahara S, Inoue K, Suzuki A, Alarcon V. B, Akimoto K, Hirai T, Hara T, Adachi M, Chida K, Ohno S, Marikawa Y, Nakao K, Shimono A, Sasaki H
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Journal Title
Curr Biol
Volume: 23
Pages: 1181-94
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] aPKClambda/iota is a beneficial prognostic marker for pancreatic neoplasms.2013
Author(s)
Kato S, Akimoto K, Nagashima Y, Ishiguro H, Kubota K, Kobayashi N, Hosono K, Watanabe S, Sekino Y, Sato T, Sasaki K, Nakaigawa N, Kubota Y, Inayama Y, Endo I, Ohno S, Maeda S, Nakajima A
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Journal Title
Pancreatology
Volume: 13
Pages: 360-8
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Conditionally replicative adenoviral vectors for imaging the effect of chemotherapy on pancreatic cancer cells.2013
Author(s)
Kimura J, Ono H. A, Kosaka T, Nagashima Y, Hirai S, Ohno S, Aoki K, Julia D, Yamamoto M, Kunisaki C, Endo I
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Journal Title
Cancer Sci
Volume: 104
Pages: 1083-90
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] The novel PAR-1-binding protein MTCL1 has crucial roles in organizing microtubules in polarizing epithelial cells.2013
Author(s)
Sato Y, Akitsu M, Amano Y, Yamashita K, Ide M, Shimada K, Yamashita A, Hirano H, Arakawa N, Maki T, Hayashi I, Ohno S, Suzuki A
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Journal Title
J Cell Sci
Volume: 126
Pages: 4671-83
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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