1989 Fiscal Year Annual Research Report

慢性骨髄性白血病の慢性期におけるチロシン・キナーゼ不活化機序

Research Project

Project/Area Number	01015076
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	西村純二九州大学, 医学部, 講師 (20112336)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	柴田恵介九州大学, 医学部, 医員井手口裕福岡大学, 医学部, 講師 (30131808)
Keywords	慢性骨髄性白血病 / P210^<bcr@abl>蛋白 / チロシン・キナーゼ / ホスホチロシン・ホスファターゼ
Research Abstract	Ph^1転座に伴うbcr/abl fusion遺伝子に由来するP210^<bcr/abl>(P210)蛋白はチロシン・キナーゼ活性を有し、慢性骨髄性白血病(CML)の病因や急性期への進展との関係が注目される。われわれはP210機能の細胞内調節、特に分化に伴う抑制機構を明かにするために、抗ホスホ・チロシン抗体および抗abl抗体を用い、CML細胞株K562のP210を分離し、細胞内のホスホチロシン・フォスファターゼ活性(PTPase)およびチロシン・キナーゼ阻害活性(PTKーI)を検討した。 1.抗体の作製:抗ホスホ・チロシン抗体はホスホチラミンーKLH複合体を、抗abl抗体は合成ペプチド(SerーAspーGluーValーGluーLysーGluーLeuーGlyーLys)ーチログロブリン複合体をそれぞれ家兎に免疫し作製した。これらの抗体はいずれもK562細胞のP210を特異的に沈降させた。 2.PTPase活性:K562細胞より抗ホスホ・チロシン抗体にてP210蛋白を分離し、in vivoあるいはin vitroでチロシンをリン酸化させ、細胞中のPTPaseの基質とした。PTPaseは慢性期CML細胞、正常好中球に認められたが、CML細胞株K562,RMー10,Pl90^<cーabl>を発現するMR87や正常リンパ球には認められず、細胞分化にともなうP210のチロシン・キナーゼの抑制との関連が示唆された。このPTPaseはZn^<2+>でのみ阻害され、Na_3VO_4,NaF,PNPP,EDTA等では影響されなかった。また膜PTPaseであるCD45に対する抗体にても中和されなかった。 3.PTKーI活性:K562細胞より抗abl抗体にてP210蛋白を分離し、immune complex kinase assayの阻害により、PTKーIを測定した。PTKーI慢性期CML細胞、正常好中球の他にK562,RMー10,MR87にも認められたが、この活性は細胞可溶分画によるATP分解の可能性を否定できず、更に検討を要する。成熟顆粒球PTPaseのP210キナーゼ抑制への関与が示唆される。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Keisuke SHIBATA et al.: "Phosphotyrosine phosphatase activity prevents the detection of P210^<bcr/abl> ptotein in mature cells in chronic myelogenous leukemia even by an immunoblotting technique." Leukemia. 3. 615-619 (1989)
[Publications] Hiroyuki TAKAHIRA et al.: "Reduction in the expression of P210^<bcr/abl> in the CML cells,KUー812ーF during both erythroid and granuloid lineage differentiation." Leukemia Research.
[Publications] Keisuke SHIBATA et al.: "Alterations of thrombinーinduced protein tyrosine phophorylation in platelets from patients with chronic myelogenous leukemia."
[Publications] Junji NISHIMURA et al.: "Characterization of phosphotyrosine phosphatase for P210^<bcr/abl> in mature myeloid cells."
[Publications] Keisuke SHIBATA et al.: "Interferonーmekifies phosphorylation of P210^<bcr/abl> during heminーinduced differentiation in K 562 cells."

1989 Fiscal Year Annual Research Report

慢性骨髄性白血病の慢性期におけるチロシン・キナーゼ不活化機序

Principal Investigator

西村 純二 九州大学, 医学部, 講師 (20112336)

Research Products

[Publications] Keisuke SHIBATA et al.: "Phosphotyrosine phosphatase activity prevents the detection of P210^<bcr/abl> ptotein in mature cells in chronic myelogenous leukemia even by an immunoblotting technique." Leukemia. 3. 615-619 (1989)

[Publications] Hiroyuki TAKAHIRA et al.: "Reduction in the expression of P210^<bcr/abl> in the CML cells,KUー812ーF during both erythroid and granuloid lineage differentiation." Leukemia Research.

[Publications] Keisuke SHIBATA et al.: "Alterations of thrombinーinduced protein tyrosine phophorylation in platelets from patients with chronic myelogenous leukemia."

[Publications] Junji NISHIMURA et al.: "Characterization of phosphotyrosine phosphatase for P210^<bcr/abl> in mature myeloid cells."

[Publications] Keisuke SHIBATA et al.: "Interferonーmekifies phosphorylation of P210^<bcr/abl> during heminーinduced differentiation in K 562 cells."

西村純二九州大学, 医学部, 講師 (20112336)