1991 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子の発現を制御する卵細胞質因子に関する分子生物学的研究
Project/Area Number |
01044077
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
佐藤 矩行 京都大学, 理学部, 助教授 (30025481)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
JEFFERY Will カリフォルニア大学デイビス校ボデガ海洋研究所(米国), 教授
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Keywords | ホヤ胚 / 筋肉細胞分化 / 筋肉アクチン遺伝子 / 発現制御 / 卵細胞質因子 / 直接発生 / シス・エレメント / ロイシン・ジッパ- |
Research Abstract |
1.筋肉アクチン遺伝子の解析:マボヤHrMA4(筋肉特異的アクチン)遺伝子を含むジェノミック断片を単離して解析したところ、約20Kbのジェノミック断片中に、HrMA2,HrMA4a,b,HrMA5,HrMA6の少くとも5つの遺伝子がクラスタ-をなしていることがわかった。HrMA2および4は同一のアクチンタンパク質をコ-ドする。HrMA4遺伝子は2つのイントロンを含むが、その位置は脊椎動物の骨格型筋肉アクチン遺伝子のそれに類似しており、細胞骨格型アクチン遺伝子のそれとは似ていない。この遺伝子の5'上流域の塩基配列を調べると、そこには、TATAボックスを初めとして、他の動物で筋肉アクチン遺伝子の発現制御に関わるとされているCArGボックス・Eボックスなどのコンセンサス配列が認められた。さらに、このHrMA4遺伝子の5'上流域約1Kbに大腸菌のCAT遺伝子をつないだ人工遺伝子を作り受精卵に顕微注入したところ、尾芽胚の筋肉細胞に限ってその発現が認められた。このことは、この約1Kbの上流域にこの遺伝子の発現制御に関するシスエレメントがそろっていることを示唆する。今後、この領域に結合するトランスファクタ-を検索する予定である。 2.卵細胞質因子の解析:オタマジャクシ幼生(筋肉を作る)を発生させるホヤとオタマジャクシ幼生を発生させないホヤ(筋肉を作らない)の各々の卵巣からcDNAをつくり、両者をサブトラクションすることによって、前者にのみ存在し後者に存在しないcDNAクロ-ンを3種類得た。その中の一つはその塩基配列中にロイシンジッパ-モチ-フを含む。このことはこのcDNAクロ-ンが筋分化に関わる可能性を示唆する。 このように、両者の側でかなりの進展が得られた。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Marikawa,Y.: "Gray and red fragments of the egg of the ascidian Ciona savignyi:preferential development of muscle cells from gray fragments" Develop.Growth Differ.33. 307-316 (1991)
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[Publications] Kusakabe,T.: "Temporal and spatial expression of a muscle actin gene during embryogenesis of the ascidian Halocynthia roretzi" Develop.Growth Differ.33. 227-234 (1990)
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[Publications] Makabe,K.W.: "Specific expression of myosin heavy chain gene in muscle lineage cells of the ascidian embryo" Roux's Arch.Dev.Biol.199. 307-313 (1990)
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[Publications] Satoh,N.: "Cellular and molecular mechanisms of muscle cell differentiation in ascidian embryos" Int.Rev.Cytol.122. 221-258 (1990)
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[Publications] Makabe,K.W.: "Failure of muscle myosin heavy-chain gene expression in quarter ascidian embryos developed from the secondary muscle lineage cells" Zool.Sci.9. (1992)
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[Publications] Kusakabe,T.: "Organization and structure of muscle-type actin genes in the ascidian Halocynthia roretzi"
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[Publications] Satoh,N.: "Frontiers in Muscle Research" Excerpta Medica, 450 (1991)
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[Publications] 佐藤 矩行: "発生・分化の遺伝子的背景" 東京大学出版会, 288 (1990)