PGD蛋白質をはじめとする細胞接着因子の機能と臨床応用に関する総合的研究

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01300014
• Research Institution: University of Shizuoka
• Principal Investigator: 伊勢村 護 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 教授 (40028197)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 林 正男 お茶の水女子大学, 理学部, 助教授 (60110516) ; 東 市郎 北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (50028411) ; 宮崎 香 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 助教授 (70112068) ; 藤本 大三郎 東京農工大学, 農学部, 教授 (40004288) ; 関口 清俊 藤田学園保健衛生大学, 医学部, 講師 (50187845)
• Keywords: 細胞接着 / RGD配列 / フィブロネクチン / 癌転移 / 胎盤 / プロテオグリカン / 細胞外マトリックス / 組織修復

Research Abstract

RGD配列が細胞接着に関係しているRGD蛋白質およびそのレセプタ-の機能と臨床応用に関する研究を進めた結果得られた主たる新知見を次に挙げる。1.羊膜上皮細胞のフィブロネクチン表面への接着にはRGD配列関与の接着機構が働いていることがわかり、胎盤から生成したフィブロネクチン結合性プロテオグリカンが、羊膜上皮細胞のフィブロネクチン表面での細胞進展を促進する活性をもつことが明らかになった。この結果は、細胞外マトリックス成分が複合的に細胞活動の制御に関与していることを示すものである。2.RGDシグナルを遺伝子工学的にプロテインAに移植することにより、人工的な細胞接着蛋白質が作製できることがわかった。この方法により、本来の生理活性と細胞接着活性を併せもつ多機能細胞接着分子の作製が可能となった。3.ヒト血漿中に新しい細胞接着性免疫グロブリンMが存在することを明らかにした。この蛋白質の細胞接着活性はRGDペプチドにより阻害されるので、新しいRGD蛋白質であると考えられる。4.フィブロネクチン、ラミニンを分解する酵素を癌細胞培養上清から分離、精製し、その性質を明らかにした。癌の転移にも関与する新しい細胞外マトリックス分解酵素と考えられる。5.RGD配列を繰り返し単位にもつポリペプチドは、実験転移系および自然転移系において、癌細胞の肺転移を顕著に抑制した。また、このポリペプチドは癌細胞により惹起される血小版の凝集を阻害した。これらの結果は、癌転移阻止に有効な薬剤の開発が可能なことを示唆している。6.角膜上皮細胞層の修復にフィブロネクチンが有効であること、修復過程にある上皮細胞はフィブロネクチン受容体を発現していることなどの新知見が得られた。以上のように、数多くの新知見が見られ、臨床的応用への道が拓かれるなど、本研究の当初の目的をほぼ達成することができた。

Research Products

• [Publications] Masaya Takamoto: "Structures of asparagine-linked oligosaccharides of human placental fibronectin" Journal of Biochemistry. 105. 742-750 (1989)
• [Publications] Masaya Takamoto: "Detection of bisected biantennary from in the asparagine-linked oligosaccharides of fibronectin isolated from human term amniotic fluid" Journal of Biochemistry. 106. 228-235 (1989)
• [Publications] Atsuko Oomura: "Alteractions in the extracellular matrix components in human glomerular diseases" Virchows Archiv A. 415. 151-159 (1989)
• [Publications] Takashi Kazama: "Immunohistochemical localization of heparn sulfate-Containing proteoglycan in normal human skin with monoclonal antibodies:comaprison with that of fibronectin" Archives of Dermatological Research. 281. 440-442 (1989)
• [Publications] Keiko Oguro: "Immunohistochemical alterations in basement membrane components of squamous cell carcinoma"
• [Publications] 伊勢村護: "細胞接着とインテグリンス-パ-ファミリ-" ファルマシア.
• [Publications] Toshihiro Akaike: "Separation of Parenchymal Liver Cells Using a Lactose-Substituted Styrene Polymer Substratum" J.Bioactive Compatible Polym.4. 51 (1989)
• [Publications] 真栄田篤: "ハイブリッド型人工肝臓用合成基質の開発-糖側鎖を有するポリスチレン誘導体による多面的な応答制御-" 人工臓器. 18. 1261-1264 (1989)
• [Publications] 赤池敏宏: "ハイブリッド人工肝臓と肝臓シミュレ-タ-めざして-肝細胞特異性材料の分子設計-" 細胞工学. 8. 219-226 (1989)
• [Publications] 赤池敏宏: "肝細胞によるオリゴ糖鎖置換ポリスチレンの認識" 農芸化学会誌.
• [Publications] I.Saiki: "Biological activities of sythetic polypeptide containing a repetitive core sequence(Arg-Gly-Asp)of cell adhesion molecules" Internationa Journal of Biological Macromolecules. 11. 23-25 (1989)
• [Publications] I.Saiki: "The inhibition of murine lung metastasis by synthetic polypeptides[poly(Arg-Gly-Asp)and poly(Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg)]with a core sequence of cell adhesion molecules" British Journal of Cancer. 59. 194-197 (1989)
• [Publications] J.Murata: "Inhibitory effect of a synthetic polypeptide,poly(Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg),on the metastatic formation of malignant tumor cells" International Journal of Biological Macromolecules. 11. 97-99 (1989)
• [Publications] I.Saiki: "Inhibition of the metastases of murine malignant melanoma by synthetic polymeric peptides containing core sequences of cell adhesive molecules" Cancer Research. 49. 3815-3822 (1989)
• [Publications] J.Murata: "Inhibition of tumor cell adhesion by anti-metastatic polypeptide containg a repetitive Arg-Gly-Asp sequence" International Journal of Biological Macromolecules. 11. 226-232 (1989)
• [Publications] I.Saiki: "Antimetastatic effects of synthetic polypeptides containing repeated structures of the cell adhesive Arg-Gly-Asp(RGD)and Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg(YIGSR)sequences" British Journal of Cancer. 60. 722-728 (1989)
• [Publications] E.Yaoita: "Isolation and characterization of proteoglycans synthesized by cultured mesangial cells" Journal of Biological Chemistry. 265. 522-531 (1990)
• [Publications] 赤間高雄: "膿瘍の好中球内に存在するフィブロネクチンの証明" 医学のあゆみ. 149. 163 (1989)
• [Publications] 赤間高雄: "慢性関節リウマチ患者の関節液好中球と末梢好中球におけるフィブロネクチンの存在" リウマチ科. 1. 678 (1989)
• [Publications] M.Ono: "Ascorbic acid phosphate stimulates type IV collagen synthesis and accelerates adipose-conversion of 3T3-L1 cells" Experimental Cell Research.
• [Publications] M.Yamagata: "Regulation of Cell-Substrate Adhesion by Proteoglycans Immobilizes on Extracellular Substrates" Journal of Biological Chemistry. 264. 8012-8018 (1989)
• [Publications] H.Morita: "Aortic Endothelial Cells Synthesize a Large Chodroitin Sulphate Proteoglycan Capable of Binding to Hyaluronate" Biochemical Journal. 265. 61-68 (1989)
• [Publications] A.Honda: "Abnormal Synthesis of Cartilage-characteristic Proteglycan in Azaserine-induced micromelial limbs" Biochemical Journal. 261. 627-635 (1989)
• [Publications] 森典子: "乳腺の分化と増殖" 病理と臨床. 7. 410-415 (1989)
• [Publications] 鈴木孝典: "ヒト癌の新しい基質糖蛋白テネイシン" 病理と臨床. 7. 387-391 (1989)
• [Publications] M.Taga: "Identication and partial characterization of Mesenchyme-derived growth factor that stimulates proliferation and inhibits functional differentiation of mouse mammary epithelium in culture" Endocrinologia Japonica. 36. 559-568 (1989)
• [Publications] T.Maeda: "A novel cell adhesive protein engineered by insertion of the Arg-Gly-Asp-Ser tetrapeptide" Journal of Biological Chemistry. 264. 15165-15168 (1989)
• [Publications] F.Oyama: "Patterns of alternative splicing of fibronectin pre-mRNA in human adult and fetal tissues" Biochemistry. 28. 1428-1434 (1989)
• [Publications] K.Sekiguchi: "Probing molecular polymorphism of fibronectins with antibodies directed to the alternatively spliced peptide segments" Biochemistry. 28. 3293-3298 (1989)
• [Publications] F.Oyama: "Deregulation of alternative splicing of fibronectin pre-mRNA in malignant liver tumors" Journal of Biological Chemistry. 264. 10331-10334 (1989)
• [Publications] M.Katayama: "Isolation and characterization of two monoclonal antibodies that recognize remote epitopes on the cell-binding domain of fibronectin" Experimental Cell Research. 185. 229-236 (1989)
• [Publications] K.Ichihara-Tanaka: "Recombinant carboxylterminal fibrin-binding domain of human fibronectin expressed in mouse L cells" Journal of Biological Chemistry. 265. 401-407 (1990)
• [Publications] H.Kitagaki-Ogawa: "Diversities in animal vitronectins.Differences in molecular weight,immunoreactivity and carbohydrate chains." Biochimica et Biophysica Acta. 1033. 49-56 (1990)
• [Publications] S.Nakagawa: "Spreading of cultured corneal epithelial cells on fibronectin and extracellular matrices" Cornea.
• [Publications] 大橋秀行: "角膜熱傷による遷延性角膜上皮欠損に対するフィブロネクチン点眼治療" 日本眼科紀要.
• [Publications] M.Izumi: "Vitronectin exists in two structurally and functionally distinct forms in human plasma" Biochimica et Biophysica Acta. 990. 101-108 (1989)
• [Publications] Y.Miyamoto: "Adsorption of vitronectin in human serum onto plastics is augmented by sodium dodecyl sulfate" Cell Structure and Function. 14. 151-162 (1989)
• [Publications] 加畑隆通: "ウサギ角膜上皮創傷治療過程に及ぼすビトロネクチンの影響" 日本眼科学会雑誌.
• [Publications] 加畑隆通: "角膜上皮疾患に対するビトロネクチン点眼の臨床応用の試み" 眼科臨床医報.
• [Publications] 泉雅子: "細胞外マトリックスから細胞骨格系へ" 細胞工学. 18. 41-49 (1989)
• [Publications] 林正男: "ビトロネクチンと細胞接着" 代謝. 26. 221-228 (1989)
• [Publications] 泉雅子: "フィブロネクチンレセプタ-(インテグリンファミリ-)" 日本臨床増刊「レセプタ-」. 529-533 (1989)
• [Publications] 窪田歴: "ビトロネクチンの構造と機能" 血液と脈管. 20. 273-284 (1989)
• [Publications] 石川総子: "ビトロネクチンの生化学と細胞進展" 組織培養. 15. 464-467 (1989)
• [Publications] S.Takahashi: "Cell-adhesive immunoglobulin M in human plasma" Biochemistry. 28. 7623-7329 (1989)
• [Publications] M.Miyazaki: "Growth inhibitors-molecular diversity and roles in cell proliferation" In Vitro Cell.Developmental Biology. 25. 866-872 (1989)
• [Publications] 伊勢村護: "細胞外マトリックスのバイオサイエンスとバイオテクノロジ-" アイピ-シ-,
• [Publications] 坂倉照好: "細胞コミュニティ-の形成" 丸善, 19 (1989)
• [Publications] Kiyotoshi Sekiguchi: "Protein Engineering '89" The Japan Scientific Societies Press,
• [Publications] Teruo Nishida: "Healing Processes in the Cornea" Wood Lands Co., 9 (1989)
• [Publications] Teruo Sakakura: "Breast Cancer:Cellular and Molecular Biology 2" Kruwer Academic Publishers,
• [Publications] R.Yatani: "Prostate Cancer:The Second Symposium 1989" Elsevier Science Publishing Co., 3 (1989)
• [Publications] 林正男: "脳代謝とその異常" 中山書店, 5 (1989)
• [Publications] Kaoru Miyazaki: "Intracellular Proteolysis-Mechanisms and Regulations" Japan Scientific Societies Press, 7 (1989)
• [Publications] 宮崎香: "無血清細胞マニュアル" 講談社, 16 (1989)
• [Publications] 宮崎香: "新しいサイトカイン" 金芳堂, 17