1989 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
01440006
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Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
蓬原 雄三 名古屋大学, 農学部, 教授 (70023405)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
服部 一三 名古屋大学, 農学部, 助手 (40023494)
手塚 修文 名古屋大学, 農学部, 助教授 (10109316)
平井 篤志 名古屋大学, 農学部, 助教授 (60023470)
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Keywords | イネ / タバコ属植物 / 細胞質置換系統 / 細胞融合 / 葉緑体 / プロトプラスト培養 / SDSーPAGE / 遺伝子導入 |
Research Abstract |
葉緑体遺伝子は多くの場合核遺伝子との協調により機能を発揮している。そのため遺伝子の機能効率を比較するためには核遺伝子と葉緑体遺伝子を組替えた植物体間で調査する必要がある。そのために細胞融合・遺伝子導入などにより葉緑体遺伝子を置換し、同じ核遺伝子を持ち異なる葉緑体遺伝子を持つ植物を作製し、これらの植物から葉緑体の構成成分を抽出し、酵素活性などの機能を相互に比較することが重要であるので、このような実験に使用するための植物体の育成などについていくつかの実験を行った。 1)タバコ属植物を用いて細胞質置換系統を作製するために種々の組合せで細胞融合を試みたが、その結果、いままで多くの報告がなされているようにNicotiana glaucaとN__ー.langsdorffiiの組み合せが実験に最適であることがわかった。そのため、これら両種を用いて細胞融合を行い、効率的な細胞質置換系統の作出のための条件設定を行っている。 2)イネのプロトプラスト培養については現在培養細胞がコロニ-まで生育しており、これらのコロニ-から効率的な植物体再分化系の確立のために、条件検討を始めている。さらに、イネの葉緑体DNAに関する突然変異系統作出のために品種日本晴を用いて胚照射を行った後代について、チラコイド膜タンパク質のSDSーPAGEによりポリペプチド分析を行った。その結果、照射当代においてバンドパタ-ンに差の見られた個体が得られた。これらを用いて細胞質置換系統を作出することを試みる。 3)葉緑体DNAへの遺伝子導入法を開発するために、空気銃を用いた高速微粒子法を用いて予備実験を行った。そのため葉緑体のプロモ-タ-とカナマイシン耐性遺伝子を持つプラスミドを構築し実験を続けている。
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[Publications] Hiratsuka,J.: "The complete sequence of the rice(Oryza sativa)chloroplast genome." Mol.Gen.Genet.217. 185-194 (1989)
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[Publications] Nishizawa,Y.: "The nucleotide sequences and expression of genes for the beta and epsilon subunits of ATp synthase from rice(Oryza sativa L.)" Jpn.J.Genet.64. 223-229 (1989)
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[Publications] Shimada,H.: "A Physical map and clone band of the rice chloroplast genome" Plant Mol.Biol.Report.7. 284-291 (1989)
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[Publications] Abe,T.: "Selection of higher regenerative callus and change in isozyme pattern in rice(Oryza sativa L.)" Theor.Appl.Genet.78. 684-652 (1989)
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[Publications] Tezuka,T.: "Aspects regarding the action of CCC in hollyhock plants" J.Exp.Bot.40. 689-692 (1989)
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[Publications] Hattori,K.: "Genetic studies on chloroplast proteins in rice.I.Simple analytical procedure for the analysis of chlorophyll protein complex." Japan.J.Breed.
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[Publications] Hirai,A.: "BIOTECHNOLOGY IN AGRICULTURE AND FORESTRY,Vol.14 Molecular Structure of Chloroplast DNA from Rice" SpringerーVerlag,