1989 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
01480012
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Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
杉浦 昌弘 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 教授 (80027044)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
若杉 達也 日本学術振興会, 特別研究員 (10212317)
杉田 護 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (70154474)
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Keywords | タバコ / 葉緑体 / リボソ-ム / アミノ酸配列 / DNA / クロ-ン / mRNA |
Research Abstract |
葉緑体は独自の遺伝情報系を持ち、その構成成分は葉緑体DNAと核DNAにコ-ドされている。我々は、タバコとイネ葉緑体DNAの全塩基配列を決定し(合計29万bp)、葉緑体DNAに含まれる同構成成分の遺伝子のすべてを明らかにした。本計画では核DNAに含まれる同構成成分の遺伝子をクロ-ン化し、その構造を明らかにする。 (1)タバコ葉より、葉緑体の50Sと30Sリボソ-ムサブユニットをショ糖密度勾配遠心法で分画し、50Sサブユニットよりタンパク成分を抽出した。これを逆相カラムにかけ、更に1次元アクリルアミドゲル電気泳動で分画し、約40成分を得た。それぞれのN…末端アミノ酸配列を気相プロテインシ-ケンサ-で分析した。5個のタンパクはN-末端がブロックされていて分析できなかったが、40個については分析を完了し、28種に分類できることを明らかにした。最新のデ-タベ-スを用いてホモロジ-サ-チをしたところ、S7など4種のリボソ-ムタンパクは葉緑体ゲノムにコ-ドされており、残りは核ゲノムにコ-ドされていることを明らかにした。 (2)タバコ葉緑体抽出液より、一本鎖DNAカラムに吸着する成分を得て、更にアクリルアミドゲル電気泳動で分画したところ、28kd、31kd,33kdのタンパク成分を得た。これらのN-末端を気相プロテインシ-ケンサ-で分析した。この配列をもとにオリゴヌクレオチドを合成し、タバコ葉mRNAより調製したcDNAクロ-ンバンクより、対応するcDNAクロ-ンの単離を試みている。
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[Publications] 杉浦昌弘: "Compilation and comparison of transfer RNA genes from tobacco chlorplasts." Critical Reviews in Plant Sciences. 8. 89-101 (1989)
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[Publications] 蒙冰原: "Genes for the ribosomal proteins S12 and S7 and elongation factors EF-G and EF-Tu of the cyanobacterium,Anacystis nidulans:Structural homology between 16S rRNA and S7 mRNA." Molecular and General Genetics. 216. 25-30 (1989)
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[Publications] 平塚純造: "The complete sequence of the rice(Oryza sativa)chloro-Plast genome:Intermolecular recombination between distinct tRNA genes accounts for a major plastid DNA inversion during the evolution of the cereals" Molecular and General Genetics. 217. 185-194 (1989)
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[Publications] 島田浩章: "Pseudogenes and short repeated sequences in the rice Chloroplast genome." Current Genetics. 16. 293-301 (1989)
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[Publications] 島田浩章: "A Physical map and clone bank of the rice(Oryza sativa)Chloroplast genome." Plant Molecular Biology Reporter. 7. 284-291 (1989)
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[Publications] 姚文彪: "An additional promoter within the protein-coding region of the psbD-psbC gene cluster in tobacco chloroplast DNA." Nueleic Acids Research. 17. 9583-9591 (1989)
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[Publications] 杉浦昌弘: "Annual Review of Cell Biology The chloroplast chromasomes in land plants." Annual Reviews Inc., 51-70 (1989)
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[Publications] 杉浦昌弘(編集): "植物バイオテクノロジ-実験マニュアル クロ-ニングとシ-クエンス" 農村文化社, 314 (1989)