1990 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトデ生殖巣刺激物質の構造決定

Research Project

Project/Area Number	01480028
Research Institution	Okayama University
Principal Investigator	白井浩子岡山大学, 理学部, 助教授 (50090478)
Keywords	ヒトデ / 生殖巣刺激物質(GSS) / ゴナドトロピン / 放卵誘発 / 生理活性ペプチド / 生殖生理学 / アミノ酸配列分析
Research Abstract	1.GSS抗体常法により作製したイトマキヒトデGSS半精製品を抗原とするモノクロナル抗体は天然GSSを中和しなかったので,ハイブリド-マを液体窒素中に保存した。キヒトデGSSアミノ酸配列分析に基づいた合成ペプチド(N末端から16残基)を抗原として与えたマウスの抗血清がイトマキヒトデGSSを中和した。従って分析されたアミノ酸配列は確かにキヒトデGSSの構造の一部であり、これとイトマキヒトデGSSの構造の間に免疫学的類似性があると判断された。またキヒトデGSSの合成ペプチドを改めて再び合成した。現在マウスに免疫して多量の抗血清を作製中である。 2.cDNAのバンクイトマキヒトデおよびキヒトデの神経からポリアデニルRNAをとりこれに基づきcDNAバンクを作製した。 3.PCR法キヒトデGSSのアミノ酸配列結果が確かにキヒトデGSSの構造の一部であると判定されたので、バンクのスクリ-ニングを抗体に依らずプロ-ブDNAを用いることに変更した。この際,16アミノ酸残基に基づく48ヌクレオチド鎖の両側からほぼ20ヌクレオチドプロ-ブを2本(センスとアンチセンス鎖)合成したが,コドンの3番目は可能性のあるヌクレオチドを全て混合させて合成した。2.で準備したキヒトデcDNAをプライマ-としてプロ-ブDNAと組み合わせることによりPCR法を導入した。30サイクル(アニ-リング温度45℃および50℃)後のサンプルが電気泳動で然るべきバンドを示さなかったため、プライマ-としてゲノムDNAを使用することにし,またプロ-ブについても若干の工夫を施すことにした。

Research Products
(3 results)

All Other

All Publications (3 results)

[Publications] H.Shirai: "Purification and partial amino acid sequence of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>___ー <amurensis>___ー." Journal of Biochemistry.
[Publications] H.Shirai: "Antibodies against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>___ー <amurensis>___ー." Zoological Science.
[Publications] H.Shira担: "Polyclonal antibodies by <in>___ー <vitro>___ー stimulation against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>___ー <amurensis>___ー." Journal of Biochemistry.

1990 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトデ生殖巣刺激物質の構造決定

Principal Investigator

白井浩子岡山大学, 理学部, 助教授 (50090478)

Research Products

[Publications] H.Shirai: "Purification and partial amino acid sequence of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>_ー <amurensis>_ー." Journal of Biochemistry.

[Publications] H.Shirai: "Antibodies against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>_ー <amurensis>_ー." Zoological Science.

[Publications] H.Shira担: "Polyclonal antibodies by <in>_ー <vitro>_ー stimulation against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>_ー <amurensis>_ー." Journal of Biochemistry.

1990 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトデ生殖巣刺激物質の構造決定

Principal Investigator

白井 浩子 岡山大学, 理学部, 助教授 (50090478)

Research Products

[Publications] H.Shirai: "Purification and partial amino acid sequence of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>___ー <amurensis>___ー." Journal of Biochemistry.

[Publications] H.Shirai: "Antibodies against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>___ー <amurensis>___ー." Zoological Science.

[Publications] H.Shira担: "Polyclonal antibodies by <in>___ー <vitro>___ー stimulation against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>___ー <amurensis>___ー." Journal of Biochemistry.

白井浩子岡山大学, 理学部, 助教授 (50090478)

[Publications] H.Shirai: "Purification and partial amino acid sequence of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>_ー <amurensis>_ー." Journal of Biochemistry.

[Publications] H.Shirai: "Antibodies against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>_ー <amurensis>_ー." Zoological Science.

[Publications] H.Shira担: "Polyclonal antibodies by <in>_ー <vitro>_ー stimulation against synthesized peptide of gonadーstimulating substance of the starfish,<Asterias>_ー <amurensis>_ー." Journal of Biochemistry.