1991 Fiscal Year Annual Research Report
胸腺細胞における細胞接着分子発現のT細胞分化及び活性化における意義
Project/Area Number |
01480167
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Research Institution | Sapporo Medical College |
Principal Investigator |
松浦 晃洋 札幌医科大学, 医学部, 講師 (70157238)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上出 利光 北海道大学, 免疫研究所免疫病態部門, 教授 (00160185)
岩木 宏之 札幌医科大学, 医学部, 助手 (60203353)
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Keywords | 胸腺細胞 / 接着分子 / 細胞外基質 / cDNAクロ-ニング |
Research Abstract |
生体内における胸腺細胞の増殖分化は、単に外来性のリンホカインだけでなく、細胞と細胞の直接の相互作用によって調節されていると考えられる。我々は胸腺細胞が細胞外基質であるフィブロネクチンと接着することにより造殖することを明らかにし、その反応を阻害する8H3抗体を作成した。8H3抗原を精製し、8つの部分ペプチド配列を決定した。それをもとに合成したオリゴヌクレオチドをプロ-ブとして用い、8H3抗原を多量に発現しているT細胞性白血病細胞から作成したcDNAライブリ-をスクリ-ニングし、反応する計72個を単離した。オリゴヌクレオチドとの反応性から4群に分類したcDNAクロ-ンの塩基配列を決定中である。ま たペプチドを合成し家兔に免疫して、ポリクロ-ナル抗体を作成して上記クロ-ン中に融合蛋白(LacZー8H3)が検出されるか否かを検討している。また胸腺細胞と胸腺上皮細胞との接着を阻害する7D3抗体を作成した。胸腺より真核細胞発現ベクタ-CDM8を用いてcDNAライブラリ-を作成した。 ライブラリ-DNAをCOS細胞にトランスフェクションし、一過性発現したものを7D3抗体にて染色しセルソ-タ-によって陽性細胞を回収し、候補クロ-ンを得た。しかしながら確実な陽性クロ-ンはまだ得られておらず、同時にスクリ-ニングした中からCD82鎖は得られているので、cDNAライブラリ-を作成しなおして、再度スクリ-ニングを行なっている。 以上のように、胸腺細胞の接着に関与する分子の一次構造決定が進行中であり、まもなく全構造が明らかにされるものと確信している。
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[Publications] Nagoya,S.,Kikuchi,K.and Uede,T.,: "Monoclonal antibody to a structure expressed on rat T cell subset." Microbiol.Immunol.
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[Publications] Nomura.,Uede,T.,and Kikuchi,K.,: "Functional analysis of mononuclear cells infiltrating into tumors.VI.Modulation of lymphocyte adhesion to high endothelial venule by LMFーb." J.Immunol.
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[Publications] Hara,I.,Sato,N.,Matsuura,A.,Cho,JーM.,Qi,W.,Torigoe,T.,Shinnick,T.M.,Young,R.A.,Kamidono,S.,and Kikuchi,K.,: "Development of monoclonal antibodies reacting against mycobacterial 65 kd heat shock protein by using recombinant truncated proteins." Microbiol.Immunol.35. 995-1007 (1991)
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[Publications] Nomura,N.,Uno,E.,Tamura,Y.,Suzuki,A.,Kikuchi,K.,and Uede,T.: "Vascular endothelial cells capable of binding lymphocytes express R2・1A6 antigen.Life Science.Adv." Immunology and Allergy,.
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[Publications] Kinebuchi,M.,Uede,T.,Matsuura,A.,and Kikuchi,K.: "A novel cell surface antigen involved in thymocyte and thymic epithelial cell adhesion." J.Immunol.146.
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[Publications] 上出 利光,鳥本 悦宏,菊地 浩吉: "臨床免疫 T細胞の活性化と接着分子" 日本臨牀社, 9 (1989)
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[Publications] 杵渕 幸,菊地 浩吉,上出 利光: "日本臨牀増刊,臨床免疫下巻 モノクロ-ナル抗体を用いた免疫機構の解析" 日本臨牀社, 6 (1990)