1990 Fiscal Year Annual Research Report
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01480212
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
三澤 章吾 筑波大学, 社会医学系, 教授 (50086534)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 栄之介 筑波大学, 社会医学系, 講師 (30138416)
原田 勝二 筑波大学, 社会医学系, 助教授 (60086618)
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| Keywords | DNA多型 / DNAフィンガ-プリント / プロ-ブ / RFLPs(制限酵素断片長多型) / サザンプロッテイング / ミトコンドリアDNA多型 / PCR(ポリメラ-ゼ連鎖反応) / VNTR(高変異反復配列) |
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| Research Abstract |
1、核DNAの集団遺伝学への応用
アセトアルデヒド脱水素酵素ALDH2の核DNAを用いての解析を行い、ALDH2座位の対立遺伝子を判定する方法を検討した。ALDH2遺伝子を特定のプライマ-にて増幅した生成物を、対立遺伝子特有のプロ-ブでハイブリダイズすることによって判定する。その結果、正常型はALDH2*1/ALDH2*1のホモ接合体のみであり、不活性(欠損)型は2ー1のヘテロおよび2ー2型のホモ接合体であることがわかった。この方法で各遺伝子頻度を種々のヒト集団において推定することができるようになると地理的、人種的分布の相違がわかるばかりでなく、重要な疫学的デ-タを提供できるようになる。
2、硬組織から抽出したDNAによる性別判定
一般的に行われている形態学的検査では判定困難な例、骨片や歯牙のみを試料とする場合にも、Southernハイブリダイゼ-ションやPCRの併用により、より確実に性別が判定できることが明らかになった。
骨、歯牙を液体窒素を用いて粉末化した後DNAを抽出し、Y特異的プロ-ブ(PHY10:3.4kb)によるSouthern hybridizationと性染色体特異的アルフォイド・サテライト領域のPCRを用いた。いずれからもDNAは抽出されたが、死後変化とともに減少する。性別判定は歯牙を用いた方が誤判定は少ない。骨の場合、死後3ケ月以上で判定困難な例が多くなるが、死後15年以上でも判定可能な例もある。PCRによるalphoid repeatの増幅ではXとY染色体の増幅感度に差が大きく、男性の判定に困難な例もあるが、Kogan Segmentの併用で判定はより正確になる。試料の保存状態によるDNA解析限度を調べると、歯牙では保存による影響はあまりみられない。
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[Publications] Keiko Washio: "Effects of Cytosine Methylation at Restriction Sites on Deoxyribonucleic Acid (DNA) Typing" J.Forensic Sciences. 35. 1277-1283 (1990)
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[Publications] 本田 克也: "硬組織から抽出したDNAによる性別判定" 日本法医学雑誌. 44. 293-301 (1990)
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[Publications] 三木 敏行: "死亡した夫婦の実子の検査による父子及び母子鑑定例ー半同胞の鑑定例ー" Act.Crim.Japon.56. 263-274 (1990)
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[Publications] Shoji Harada: "Genetic Polymorphism of Aldehyde Dehydrogenase and its Physiological Significance to Alcohol Metabolism" Prog.Clin.Biol.Res.344. 289-294 (1990)
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[Publications] 原田 勝二: "アルコ-ル代謝酵素のDNAによる解析" アルコ-ル代謝と肝. 9. 23-26 (1990)
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[Publications] Shoji Harada: "Genetic Polymorphism of Aldehyde Dehydrogenase in Orientals as Genetic Marker of a High Risk Group of Alcoholism" Alcoholism and Family. 67-71 (1990)
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[Publications] 原田 勝二: "急性エタノ-ル中毒ー基礎編ー" 中毒研究. 3. 355-361 (1990)
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[Publications] 原田 勝二: "アルコ-ル耐性の個人差" 病態生理. 9. 948-955 (1990)
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[Publications] 原田 勝二: "エタノ-ルおよびアルデヒド代謝の人種的遺伝的要因" 医学のあゆみ. 154. 817-822 (1990)
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[Publications] 原田 勝二: "Glutathion SーTransferase 1 gene deletionおよびApolipoprotein Bー100 gene 3^'hypervariable regionのPCR法による解析とその応用" 2. 132-137 (1990)
