1991 Fiscal Year Annual Research Report
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01480214
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
佐々木 毅 東北大学, 医学部, 助教授 (50110656)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
遠藤 一靖 東北大学, 医学部, 講師 (60125507)
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| Keywords | 自己抗体 / V_H遺伝子 / 全身性エリテマト-デス |
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| Research Abstract |
自己抗体の起源を検索するために自己抗体の抗体活性を担う超可変部を規定する遺伝子を検討した。本年は(1)自己免疫疾患例でin vivoで免疫グロブリンV_H familyの使用に偏りがあるかを知ることを目的にDot blot hybridization及びin situ hybridization法にて検討した。SLE及び正常人由来EBvirusーtransformed B cell lineから得たtotal RNAをニトロセルロ-ス膜に転写後、^<32>P標識V_HI〜V_HIV遺伝子プロ-ブとハイブリダイズした。またSLE及び正常人の末梢血B細胞を^<35>Sで標識したV_HI,V_HII,V_HIII,V_HIV,V_HV及びV_HVIファミリ-プロ-ブとハイブリダイズしin situ hybidization(ISH)を行った。その結果(i)SLE B細胞株は、正常人由来B細胞株に比してV_HIV及びV_HVがより多く使用されていた。これよりSLE B細胞では特定のV_H遺伝子ファミリ-がより高頻度に使用されることがうかがわれた。この事は、SLE B細胞の分化初期段階での異常を示唆する。(ii)生体内のより正確な情報を得るにはISHによる個々のクロ-ンレベルでの検索が望ましい。ヒトモノクロナルIgM抗DNA抗体産生クロ-ン0ー81,NEー1,7F4或いは抗アセチルコリンレセプタ-IgG抗体産生クロ-ンT/G等を用い,ISHを行なった。その結果hybridization及び洗浄の条件の検討よりISHが可能であることが判明した。
(2)0ー81,NEー1イディオタイプは腎障害性抗体中に表現される。ヒト抗DNA抗産生クロ-ン0ー81,NEー1の抗体活性を規定するV_H,V_L遺伝子配列を決定した。このうち抗体活性発現に重要なCDR2部位の人工ペプタイドを合成し、更にこれを特異的に認識する抗ペプチド抗体を得た。この抗CDR抗体或いはCDRーDNAプロ-ブを用いて自己免疫疾患例リンパ球での0ー81ーId遺伝子の分布、発現様式を追求中である。
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[Publications] T.Sasaki,A.Hatakeyama,S.Shibata,H.Osaki,M.Suzuki,K.Horie,Y.Kitagawa,K.Yoshinaga: "Heterogeneity of immune complexーderived antiーDNA antibodies associated with lupus nephritis." Kidney International. 39. 746-753 (1991)
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[Publications] N.Harata,T.Sasaki,S.Shibata,J.Kameoka,Y.Hirabayashi,H.Osaki,E.Tamate,K.Yoshinaga: "Selective absorption of antiーDNA antibodies and their idiotypeーpositive cells in vitro using an antiidiotypic antibodyーaffinity column,possible application to plasmaexchange." J.Clinical Apheresis. 6. 34-39 (1991)
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[Publications] T.Sasaki: "AntiーDNA idiotypes and antiーidiotypes in systemic lupus erythematosus." Jpn.J.Med.19. 655-656 (1991)
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[Publications] M.Suzuki,A.Hatakeyama,E.Tamate,T.Kurosawa,T.Saito,T.Sasaki,K.Yoshinaga: "AntiーDNA idiotypes deposited in the renal glomeruli of patients with lupus nephritis." Am.J.Kidney Dis.18. 232-239 (1991)
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[Publications] H.Shiraishi,M.Nakamura,N.Yaegashi,T.Sasaki,K.Sugamura: "Laboratory infection of HPV/B19." J.Infection. 22. 308-310 (1991)
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[Publications] T.Sasaki,T.Muryoi,A.Hatakeyama,M.Suzuki,T.Seino,T.Saito,K.Yoshinaga: "Circulating immune complexes in active lupus nephritis." Am.J.Med.91. 355-362 (1991)
