多能性造血幹細胞,白血病細胞に対するインタ-ロイキン,造血因子の作用機構の解析

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01480258
• Research Institution: Shinshu University
• Principal Investigator: 中畑 龍俊 信州大学, 医学部, 助教授 (20110744)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小池 健一 信州大学, 医学部, 講師 (40143979)
• Keywords: 多能性造血幹細胞 / インタ-ロイキン / 造血因子 / ILー3 / ILー6 / SCF / in vitro / Ca^<2+>

Research Abstract

正常多能性造血幹細胞,白血病細胞に対する各種インタ-ロイキン(IL),造血因子(GーCSF,GMーCSF,EPO,LIF,SCF)の作用機構に関する基礎的検討を行った。本年度の主要成績として以下のごとき結果がえられた。
1).ヒト多能性造血幹細胞をin vitroで増殖させるための最も効果的なIL,造血因子の組み合せを,ヒト骨髄細胞,未梢血単核封より分離したCD34陽性細胞を標的細胞としてメチルセルロ-ス法を用いて検討した。ヒトCD34陽性細胞の増殖を最も刺激する因子はILー3,GMーCSF,SCFを組み合せた条件であった。この組み合せにより液体培養下で前駆細胞(CFUーGM,BFUーEなど)は数倍に増幅することが可能であった。
2).マウス骨髄,ヒト骨髄細胞よりそれぞれSCAー1,CD34モノクロ-ナル抗体および各種lineage特異抗体を組み合せたイムノビ-ズを用いて造血幹細胞の純化を行った。最終段階での細胞はマウス,ヒトいずれにおいても約30%〜50%がin vitroでコロニ-を形成した。
3).白血病細胞のなかにはGーCSF,GMーCSF,ILー3(骨髄性),ILー2,ILー6,ILー7,ILー3(リンパ性)に反応しして増殖する例がみられた。
4).純化した造血幹細胞を用いて,各種インタ-ロイキン,造血因子反応後の細胞内Ca^<2+>,PHの変化,PKCを終時的に測定したが,現在の方法では明らかな変化は観察されなかった。
5).培養造血幹細胞を用いたマウス骨髄移植実験は実施できなかった。

Research Products

• [Publications] Kohichiro Tsuji: "Effects of interleukinー3 and interleukinー4 on the development of connective tissueーtype mast cells:Interleukinー3 supports their survival and interleukinー4 triggers and supports their proliferation synergistically with interleukinー3." Blood. 75(2). 421-427 (1990)
• [Publications] Kohichiro Tsuji: "Synergistic action of phorbol ester and ILー3 in the induction of connective tissueーtype mast cell proliferation." J.Immunol.144(2). 678-684 (1990)
• [Publications] Kazunaga Agematsu: "Successful bone marrow transplantation in a patient with severe Pretransplant pneumonia." Transplantation. 50(2). 326-327 (1990)
• [Publications] Sigetaka Asano: "In vivo effects of recombinant human interleukinー6 in primates:Stimulated production of platalets." Blood. 75(8). 1602-1605 (1990)
• [Publications] Kenichi Koike: "Interleukinー6 enhances murine megakaryocytopoiesis in serum free culture." Blood. 75(12). 2286-2291 (1990)
• [Publications] Mineo Takagi: "Antiproliferative effect of IFNーon proliferation of mouse connective tissueーtype mast cells." J.Immunol.145(6). 1880-1884 (1990)
• [Publications] 高橋 聡: "Recombinant human granulocyte colonyーstimulating factor(rG・CSF)の同種骨髄移植における臨床評価" Biotherapy. 4(8). 1437-1444 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "ILー3,ILー6による幹細胞治療への応用" 臨床科学. 26(9). 1198-1204 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "骨髄系細胞の増殖,分化・機能発現とサイトカイン" Immunohaematology. 12(3). 302-310 (1990)
• [Publications] 小島 勢二: "再生不良性貧血におけるKRN8601(rhGーCSF)の臨床効果に関する検討" 臨床血液. 31(7). 929-936 (1990)
• [Publications] 中村 文彦: "土生体重1500g未満の未熟児貧血児における血液エリスロポエチン濃度と未梢血のBFUーE rEPOに対する反応性の検討" 日本小児科学会雑誌. 94(9). 2002-2006 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "ILー3/ILー4と好塩基球/肥満細胞" 造血因子. 1(4). 42-51 (1990)
• [Publications] Yoichi Takaue: "Effects of recombinant human GーCSF,GMーCSF,ILー3,and ILー1 on the growth of purified human pereipheral blood progenitors." Blood. 76(2). 330-335 (1990)
• [Publications] Nobusuke Nishi: "Induction of mixed erythroidーmegakaryocyte colonies and bipotential blast cell colonies by recombinant human erythropoietin in serumfree culture." Blood. 76(7). 1330-1335 (1990)
• [Publications] Seiji Kojima: "Down's syndrome and acute leukemia in children." Blood. 76(11). 2348-2353 (1990)
• [Publications] Satoshi Kimura: "Efficacy of recombinant human granulocyte colonyーstimulating factor on neutropenia in patients with AIDS." AIDS. 4(12). 1251-1255 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "造血幹細胞とILー3,ILー6" 臨床科学. 26(2). 206-213 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "造血幹細胞の多様性と分化・増殖因子" 小児内科. 22(7). 1005-1010 (1990)
• [Publications] 岡野 明: "ILー6とILー3を用いたヒト及びマウス造血幹細胞液体培養法の検討" 日血会誌. 53(7). 1213-1221 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "造血幹細胞の自己複製とその応用" 医学のあゆみ. 156(9). 572-576 (1991)
• [Publications] 中畑 龍俊: "顆粒球コロニ-刺激因子ーGーCSFの基礎と臨床好中球減少症" 医薬ジャ-ナル, 13 (1990)
• [Publications] 中畑 龍俊: "肥満細胞ー生理と病理ーサイトカイン" メディカルレビュ-社, 15 (1990)