表皮細胞間接着構造とその分化に伴う制御(シグナルトランスダクション)と異常

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01480267
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 北島 康雄 自治医科大学, 医学部, 助教授 (70111797)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 金沢 一也 自治医科大学, 医学部, 助手 (20169543)
• Keywords: 表皮細胞 / デスモソ-ム / 細胞間接着 / プロテインキナ-ゼC / リポコルチン / 表皮水疱症 / ダリエ病 / ヘイリ-ヘイリ-病

Research Abstract

本研究の目的は表皮細胞の細胞間接着構造およびその形成と脱着の制御に関する正常と病的状態の解明である。
表皮細胞は低Ca^<2+>培地中ではデスモソ-ム(DS)を形成しないが、Ca^<2+>添加でこれを形成する。この培地中のCa^<2+>増加をどのような情報伝達系で細胞は認知し、どのように反応するかを、我々の分離株化した扁平上皮癌細胞を用いて研究した。この系においてプロテインキナ-ゼC(PKC)が関与することを我々はさきに報告しているので、本年度はCa^<2+>の添加、PKCの活性化(TPA、ジグリセロ-ルの添加)によって、DSの構成分子であるデスモプラキン(DPK)の動態を観察したところ、これらの薬剤の添加によって、DPKが15分ー60分で細胞質から膜へ移行し、DSを形成した。これはPKC阻害剤によって阻害された。このことからDSの形成におけるDPKの細胞膜への移行に、PKCが関与していることが明らかとなった(Exp.Cell Res.185:176ー190.1989に発表)。一方、この系におけるPKCの基質を検索する過程でリポコルチン(EGF.PKCの基質)がCa^<2+>添加で細胞質から膜へ移行すること、また、LPCが尋常性乾癬では正常とは異なって細胞膜に移行していることを見出した(Annual Meeting 1990.Washington.Society for Invest.Dermatol.発表予定、論文は投稿中)。
先天性の表皮細胞間接着障害性の皮膚疾患に関しては、ダリエ病とヘイリ-ヘイリ-病において、DS構成分子のDPK、デスモカルミン、デスモヨ-キン、デスモグリエンの分子欠損の有無と分布異常を検討した結果、無疹部における分子の欠損も分布異常もなかった(第4回角化症研究会発表:89年5月、89回日本皮膚科学会発表予定:90年5月)。単純型表皮水疱症については培養表皮細胞においてケラチンの分布異常と滴状化を発見し報告した(Ach.Dermatol.Res.281:5ー10.1989)。

Research Products

• [Publications] Yasuo Kitajima,Shunichiro Inoue,Hideo Yaoita: "Abnormal organization of keratin intermediate filaments in cultured keratinocytes of epidermolysis bullosa simplex" Archive of Dermatological Research. 281. 5-10 (1989)
• [Publications] 北島康雄: "表皮疾患と細胞骨格" 生体の化学. 40. 212-216 (1989)
• [Publications] 北島康雄,許漢銘,矢尾板英夫: "Ca^<2+>誘導デスモソ-ム形成における細胞内Ca^<2+>の増加とCキナ-ゼの関与:蛍光抗体法と電顕" 日本皮膚科学会誌. 99. 1347-1349 (1989)
• [Publications] Hamm-Ming Sheu,Yasuo Kitaima,Hideo Yaoita: "Involvement of protein kinase C in translocation of desmoplakins from cytosole to plasma membrane during desmosome formation in human squamous carcinoma cells grown low to normal calcium concentration" Experimental Cell Research. 185. 176-190 (1989)
• [Publications] Hayashi,K.Owada,S.Sonobe,K.Domae,T.Yamonouchi,T.Kakunaga,Y.Kitajima,H.Yaoita: "Monoclonal antibodies specific to a Ca^<2+>-bound form of lipocortin I distinguish its Ca^<2+>-dependent phopholipid-binding ability from its ability to inhibit phospholipase A_2" Biochemical Journal.
• [Publications] Yasuo Kitajima,M.Koji Owada,Hiromi Mitsui,Hido Yaoita: "Lipocortin I is preferentially localized on the plasma membrane in keratinocytes of psoriatic epidermis as shown by immunofluorescence in tissue sections" J.Clinical Investigation.
• [Publications] 北島康雄: "皮膚科MOOK No.15 角化異常症 表皮細胞のサイトスケルトン" 金原出版, 9 (1989)
• [Publications] 北島康雄: "皮膚科MOOK No.15 角化異常症 表皮細胞の増殖と分化" 金原出版, 8 (1989)