1991 Fiscal Year Annual Research Report
口腔領域における循環不全とその病態生理に関する薬理学的解析:エンドトキシンによって修飾を受けた内因性血管作動物質と微小循環動態反応機構の解明
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01480438
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| Research Institution | Kanagawa Dental College |
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Principal Investigator |
伊藤 春生 神奈川歯科大学, 歯学部, 教授 (10084716)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 俊介 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (60206810)
冨川 重治 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (40197918)
塗々木 和男 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (90139577)
岡部 栄一郎 神奈川歯科大学, 歯学部, 助教授 (50097276)
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| Keywords | エンドトキシン / 血管平滑筋 / キニン / 活性酸素フリ-ラジカル / 微小循環 / 電子スピン共鳴 |
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| Research Abstract |
単離イヌ筋形質膜(sarcolemma;SL)と筋小胞体(sarcoplasmic reticulum;SR)を試料とし,それぞれNa^+,K^+ーATPase活性とCa^<2+>ーATPase活性を指標にLPSの影響を検討した。また,特異的ハイドロキシルラジカル( ^・OH)発生系であるジヒドロキシフマル酸(dihydroxyーfumarate;DHF)/Fe^<3+>ーADP系を用い比較実験とした。LPSと活性酸素ラジカル発生系の効果を明確にしたのち,電子スピン共鳴(ESR)法によるLPSおよびDHF/Fe^<3+>ーADPで生ずる活性酸素ラジカルの測定とSLおよびSRのス-パ-オキサイド消去能の定量を行なった。さらに脂質過酸化最終産物であるmalondialdehyde(MDA)の測定をthioarubiturate(TBA)法により行ない脂質過酸化との関連性も検討した。LPSは,SLのNa^+,K^+ーATPase活性とSRのCa^<2+>ーATPase活性をsuperoxide dismutase(SOD)抑制性に低下させた。DHF/Fe^<3+>ーADPはSLのNa^+,K^+ーATPase活性とSRのCa^<2+>ーATPase活性をSOD抑制性に低下させ,さらにこれらの低下は鉄キレ-タ-であるdeferoxamine(DFX)の存在下で濃度依存性に抑制された。LPS,DHF/Fe^<3+>ーADP系は ^・OH特有のESRシグナルを発現させたがLPSによって得られるシグナルの相対強度はDFXでほとんど影響を受けず,DHF/Fe^<3+>ーADPによって得られたシグナルの相対強度はDFXで強く減弱した。SL,およびSRは,その蛋白量依存性にLPSで生ずるESRシグナル相対強度を減弱させた。SL,およびSRはほとんどス-パ-オキサイド消去能を示さなかった。LPSはSLとSRのMAD量を濃度依存性に増加させた。以上の結果からLPSは ^・OH発生を介してSLおよびSRの酵素活性を低下させていることが示唆された。これはLPSによりSLおよびSRで脂質過酸化が生じたことと,SLあるいはSR自身ESRシグナル相対強度を減弱させたことから膜成分が活性酸素ラジカルを捕捉しそのため障害を受けるとする可能性に矛盾はない。
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[Publications] 岡部 栄逸朗: "フリ-ラジカルと冠血管の収縮ー弛緩反応" 活性酸素・フリ-ラジカル. 2. 690-701 (1991)
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[Publications] Ryusei Taga: "Hydroxyl radical participation in the in vitro effects of gram-negative endotoxin on cardiac sarcolemmal Na,K-ATPase activity" Japan J.Pharmacol.339-349 (1991)
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[Publications] Kazuo Todoki: "Oxygen free radical-mediated selective endothelial dysfunction in isolated coronary artery" Am.J.Physiol.(1992)
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[Publications] Shun-suke Takahashi: "Evidence for generation of hydroxyl radical from gram-negative endotoxin itself" Dentistry in Japan. (1992)
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[Publications] Kazuo Todoki: "Active Oxygen,Lipid Peroxides and Antioxidants" Elsevier,Amsterdam,The Netherlands., (1992)
