1990 Fiscal Year Annual Research Report
非相同性の遺伝的組換によるDNA再編成と遺伝子の発現
Project/Area Number |
01480540
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Research Institution | Science University of Tokyo |
Principal Investigator |
飯田 滋 東京理科大学, 基礎工学部, 教授 (30012777)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮崎 力 東京理科大学, 基礎工学部, 助手 (40190764)
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Keywords | 遺伝的組換え / 非相同性組換え / DNA再編成 / 遺伝子発現 / 可動遺伝因子 / 転移因子 / 高等植物 / 薬剤耐性標識遺伝子 |
Research Abstract |
遺伝的組換えはDNA塩基配列に相同性のある領域内で起る相同性組換えと相同性がないにもかかわらず組換えの起る非相同性組換えに大別され、非相同性組換えは転移、逆転、挿入、欠失など種々のDNA再編成を引き起し、その結果遺伝子の発現に影響を与えることが多い。DNA再編成は部位特異的組換えのようにDNA上のどこでどのような再編成が起るかがあらかじめプログラムされている場合と、転移因子の関与する再編成のようにプログラムされていない場合に分けられる。本研究では種々の非相同性の遺伝的組換えによるDNA再編成とその遺伝子発現への影響との関連を明らかにせんとして、以下の組換え系で研究を行った。 (1)部位特異的組換えとして、大腸菌15T^-中のプラスミドp15Bには部位特異的組換え点が6点あり、これらの間で起る組換えのため240通りの構造をとり得る多重DNA逆転領域がある。この領域の中にある遺伝子の構造と機能や組換酵素遺伝子の構造を明らかにした。 (2)転移因子による組換えとして、トウモロコシの転移因子<Ac>___ーや<Ds>___ーが転移に伴って切り出されると薬剤耐性遺伝子が活性化されるようなプラスミドをタバコとイネのプロトプラストに導入、活性化された耐性遺伝子を指標とした形質転換体を分離、作出したトランスジェニック植物中で導入転移因子が転移し得ることを明らかにした。 (3)高等植物の挿入突然変異法開発のための基礎実験として、プロモ-タ-を持たぬ導入標識遺伝子が植物遺伝子のエキソンに挿入され活性化される場合を想定、二種の薬剤耐性遺伝子がdicistronic mRNAの生成により発現されるようなプラスミドをタバコに導入、両耐性を示すトランスジェニックタバコの種子繁殖を行い、導入両耐性遺伝子が安定に次世代へ伝達し得ることを明らかにした。現在三世代目において希に起る不安定性を検出し得るか否かを検討中である。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] H.Sandmeier: "Siteーspecific DNA recombination system Min of plasmid p15B:A cluster of overlapping invertible DNA segments." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 1109-1113 (1990)
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[Publications] S.Iida: "The Min DNA in__ーversion enzyme of plasmid p15B of <Escherichia>___ー <coli>___ー 15T:A new member of the Din family of sitespecific recombinases." Molecular Microbiology. 4. 991-997 (1990)
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[Publications] R.Bilang: "The 3'ーterminal region of the hygromycin B resistance gene is important for its activity in <Escherichia>___ー <coli>___ー and in <Nicotiana>___ー <tabacum>___ー." Gene.
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[Publications] T.Izawa: "Introduction and transposition of the maize transposable element <Ac>___ー in rice (<Oryza>___ー <sativa>___ー L.)." Mol.Gen.Genet.
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[Publications] H.Sandmeier: "Gene organization in the multiple D__ーNA inversion region Min of plasmid p15B of E__ー. <coli>___ー 15T:Creation of a gene with a variable 3' end." Nucleic Acids Res.
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[Publications] S.Iida: "Expression of the downstream <ntpII>___ー gene on bicistronic transcription units in transgenic tobacco plants." Gene.
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[Publications] 飯田 滋(分担執筆): "シリ-ズ分子生物学の進歩13.高等植物の情報発現と制御" 丸善株式会社, 292 (1990)
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[Publications] 飯田 滋(分担執筆): "医薬バイオテクノロジ-事典" 株式会社広川書店, (1991)