ヒト脳腫瘍で発現する各種がん遺伝子並びに細胞増殖期関連抗原の意義に関する研究

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01480551
• Research Institution: 佐賀医科大学
• Principal Investigator: 田渕 和雄 佐賀医科大学, 医学部, 教授 (50116480)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 白石 哲也 佐賀医科大学, 医学部, 助手 (70206275) ; 植田 清隆 佐賀医科大学, 医学部, 講師 (50144738) ; 辻 武寿 佐賀医科大学, 医学部, 助手 (40217302) ; 阿部 雅光 佐賀医科大学, 医学部, 助手 (20136427)
• Keywords: 脳腫瘍 / 癌遺伝子 / 癌遺伝子産物 / 細胞増殖期関連抗原 / 免疫組織化学 / ウエスタンブロッティング / RFLPs

Research Abstract

ヒト脳腫瘍の中には癌抑制遺伝子(劣性癌遺伝子)の変化あるいは欠失しているものが、当初予想していた以上に多く存在することが判明した。開頭術時に得られる脳昭瘍生検組織並びにこれらを培養して得られる培養脳腫瘍細胞について、癌抑制遺伝子産物の一つであるp53に対するモノクロ-ナル抗体を用いて免疫組織化学的検索およびウエスタンブロッティング、フロ-サイトメトリ-による検討も行った。その結果、検索を得たいずれの髄膜腫にもp53陽性反応はみられなかったが、グリオ-マの多くではp53の強い陽性反応が認められた。p53の発現の程度は各グリオ-マにより相違していることも明らかとなった。一方正常脳においては、p53の発現は極めて弱く、その局在は主に細胞核周囲、殊に核膜に一致して存在していることが推測された。しかしグリオ-マの細胞周期に依る変化は余り認められず、この点はPCNA/cyclin、DNAポリメラ-ゼ、Kiー67などの細胞増殖期関連抗原と発現様式を全く異にすることが明らかとなった。更にウエスタンブロッティングにより種々のグリオ-マで強い発現のみられるp53は、正常脳におけるp53と、分子量、等電点も殆んど同じであることが示された。これらの結果より、我々はグリオ-マで発現されるp53はこれをコ-ドしている遺伝子(第17染色体短腕上に存在する癌抑制遺伝子の一つと考えられている)の極く短い欠失あるいは点突然変異に起因したものではないかと推定している。このことをさらに究明すべく、脳腫瘍患者の白血球並びに腫瘍細胞よりRNA、DNAを抽出し、ノ-ザンブロッティング、サザンブロッティングによる解析を行うとともに、RFLPsを利用して得られたDNAマ-カ-を起点にクロモソ-ムウオ-キングを行い最終的に第17染色体短腕上の遺伝子欠失あるいは突然変異領域のクロ-ニングを開始した。

Research Products

• [Publications] 田渕和雄: "脳腫瘍のoncogene" Clinical Neuroscience. 7. 70-73 (1989)
• [Publications] 田渕和雄・他: "脳腫瘍の成長解析,BrdUrd,Kiー67およびPCNA陽性率の比較" 脳腫瘍病理. 6. 157-160 (1989)
• [Publications] 白石哲也・他: "Nucleolar organizer region銀染色法を用いたパラフィン切片による脳腫瘍増殖能の解析" 医学のあゆみ. 148. 125-126 (1989)
• [Publications] 白石哲也・他: "単クロ-ン抗体Kiー67が認識する抗原について" 脳腫瘍病理. 6. 149-156 (1989)
• [Publications] 本田千穂・他: "培養グリオ-マ細胞水溶性蛋白分画の二次元電気泳動による解析" Neurol Med Chir. 29. 465-470 (1989)
• [Publications] 池崎清信・他: "脳腫瘍における末梢性Benzodiazepine受容体の発現様式" 神経化学. 28. 270-271 (1989)
• [Publications] 田渕和雄(分担): "Annual Review 神経 1989" 中外医学社, 348 (1989)
• [Publications] 田渕和雄(分担): "悪性神経膠腫" 現代医療社, 254 (1989)