1990 Fiscal Year Annual Research Report
メ-プルシロップ尿症の分子遺伝学的研究,特に病態との関連性について
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01480553
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
松田 一郎 熊本大学, 医学部, 教授 (10000986)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
遠藤 文夫 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (00176801)
永田 憲行 熊本大学, 教育学部, 助教授 (20109698)
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| Keywords | メ-プルシロップ / ゲノムDNA解析 / 変異遺伝子解析 |
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| Research Abstract |
1.分枝鎖ケト酸脱水素酵素(BCKDH)のE_1βサブユニットのゲノムDNAの全構造解明:E_1βサブユニットはメ-プルシロップ尿症の病因酵素の構成成分の1つであり、そのcDNAは昨年我々の手で世界に先駆けて解明された。今回、それのゲノムDNAを解析し、100kb以上の長さを有し10エキソンからなり、スプライシングドナ-,アクセプタ-サイトは全てGT/AGル-ルに従うこと、転写開始部位はコドン開始部位の47b上流、CAATボックスはキャップサイトの37,及び74b上流に存在するが、TATAボックスは存在していないことを見いだした。また本遺伝子は6番染色体上に存在することを解明した。
2.メノナイト メ-プルシロップ尿症の変異遺伝子の解明:メノナイト メ-プルシロップは米国ペンシルバニアの一地方にみられる極めて頻度の高い疾患で、これまで多くの研究者の注目を集めてきた。われわれは患者由来の培養細胞の遺伝子解析を行い、BCKDHのE_1αサブユニットのT→A変異により394番アミノ酸がチロシンからアスパラギンに変異していることを見いだした。さらに3家系の調査を行い、この変異が患者ではホモ、両親ではヘテロであることを確認した。
3.我が国のメ-プルシロップ尿症患者の変異遺伝子の解明:2家系について行った。第一の家系ではBCKDHのE_2サブユニットのスプライシング異常による78bの欠失が見いだされた。第二の家系では、E_1βサブユニットのリ-ダ-ペプチドをコ-ドする,エクソン1に11bpの欠失が見いだされた。いずれの家系でも両親が変異遺伝子についてヘテロであり、家族内にはホモもしくはヘテロが存在することを確認した。
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[Publications] Yoshitaka Nobukuni: "Isolation and characterization of a complementary DNA clone coding for the E_1β subunit of the bovine branchedchain αーketoacid dehydrogenase complex:Complete amino acid sequence of the precursor protein and its proteolytic processing" Biochemistry. 29. 1154-1160 (1990)
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[Publications] Yoshitaka Nobukuni: "Maple syrup urine disease:complete primary structure of the E_1β subunit of human branched chain αーketoacid dehydrogenase complex deduced from the nucleotide sequence and a gene analysis of patients with this disease" J.Clin.Invest.86. 242-247 (1990)
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[Publications] Ichiro Matsuda: "A TーtoーA substitution in the E_1β subunit gene of the branchedーchain αーketoacid dehydrogenase complex in two cell lines derived from menonite maple syrup urine disease patients" Biochem.Biophy.Res.Comm.172. 646-651 (1990)
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[Publications] Hiroshi Mitsubuchi: "Maple syrup urine disease caused by a partial deletion in the inner E_2 core domain of the branched chain αーketo acid dehydrogenase complex due to aberrent splicing.A single base deletion at a 5′ーsplice donor site of an intron of the E_2 gene disrupts the consensus sequenc in this region." J.Clin.Invest.
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[Publications] Yoshitaka Nobukuni: "Maple syrup urine disease;Complete defect of the E_1β subunit of the branched chain αーketoacid dehyfrogenase complex due to a deletion of an 11ーbase pair repeat seguence which encodes a mitochondrial tarqetting leader peptide in a family with the disease" J.Clin.Invest.
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[Publications] Yoshitaka Nobukuni: "Maple syrup urine disease;Clinical and biochemical significance of gene analysis" J.Inher.Met.Dis.
