1989 Fiscal Year Annual Research Report
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01540592
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
桜井 勝 金沢大学, 理学部, 助教授 (80143874)
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| Keywords | 前胸腺 / 3-デヒドロエクジソン / エクジソン / 3-0×0-ecdysteroid-3β-reductase / 3β-リダクタ-ゼ |
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| Research Abstract |
昆虫の変態の内分泌調節の研究によく用いられる昆虫15種の前胸腺を培養し、その産生エクジステロイドを同定した結果、前胸腺は3カテゴリ-に分れることが判明した。すなわち、主としてエクジソンを分泌するもの(カイコ、ハエ、バッタ)、3-デヒドロエクジソンを主とするもの(タバコスズメが、アゲハ、モンシロチョウ等)、この中間のもの(オオハチミツが、ワモンゴキブリ等)である。これには目特異性はなく、種により異なるといえる。又体液中のデヒドロエクジソン還元酵素(3β-リダクタ-ゼ)活性を、5目19種について検討した結果、鱗翅目(10種)では例外なく3β-リダクタ-ゼ活性が強いのに比べ、他の4目ではいずれも相当に低い値であった。しかし、低い活性とはいえ、前胸腺が産生する3-デヒドロエクジソンを全てエクジソンに還元するに十分であることも明らかとなった。この結果、3-デヒドロエクジソン→エクジソンの系は昆虫で普遍的なものであると証明された。
リダクタ-ゼの精製は現在進行中である。体液中には分子量約20000のリダクタ-ゼが少くとも2種類あり、一方はNADPHを、他方はNADPHとNADHを補酵素とする。これらは硫酸アンモニウムの飽和度を変えた塩析でかなりよく分離できる。いずれの活性も2,6-ジクロロフェノ-ル-インドフェノ-ルを用いた呈色反応で検出できるので、3-デヒドロエクジソンを用いた差次的ラジオイムノアッセイを用いなくともよく、クロマトグラフィ-による精製が促進された。現在、DEAEセルロ-ス及びブル-セファロ-スによるカラムクロマトグラフィ-が終ったところであり、近い将来、β-リダクタ-ゼが抗体作成に十分量単離できるものと期待される。
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[Publications] Sho Sakurai: "Mediation of ecdysone synthesis in Manduca sexta by a hemolymph enzyme." Arch.Insect Biochem.Physiol.10. 179-197 (1989)
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[Publications] Sho Sakurai: "Short-loop negative and positive feedback on ecdysone secretion by prothoracic gland in the tobacco hornworm,Manduca sexta." Gen.Comp.Endocrinol.75. 204-216 (1989)
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[Publications] Sho Sakurai: "Juvenile hormone inhibits ecdysone secretion and responsiveness to prothoracicotropic hormone in prothoracic glands of Bombyx mori." Gen.Comp.Endocrinol.75. 222-230 (1989)
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[Publications] Shonosuke Kiriishi: "Prothoracic gland synthesis of 3-dehydroecdysone and its hemolymph 3β-reductase mediated conversion to ecdysone in representative insects." Experientia.
