1990 Fiscal Year Annual Research Report

ツメガエル正常胚およびミュ-タント胚に導入した外来性DNAの発現調節

Research Project

Project/Area Number	01540602
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	塩川光一郎東京大学, 理学部, 教授 (20037295)
Keywords	ツメガエル / 受精卵 / プロモ-タ- / マイクロインジェクション / アクチン遺伝子 / CAT遺伝子 / DNA複製 / コンカテマ-
Research Abstract	昨年度(平成1年度)においてツメガエル受精卵における外来性DNAの発現の一般的特徴を明らかにすることができたので,今年度は発現調節に関する研究に重点を移し,以下に述べる結果を得た。1.従来からツメガエルの正常発生過程では内在性のDNAも外から注入した外来性のDNAも,胚の細胞数が約4000個の胞胚中期になるまでは発現されないと報告されていた。すなわち,受精直後に始まる卵割期の間では細胞は同調的に分裂し,しかもG_2期が細胞周期には含まれていないので,その卵割期が終ってはじめて遺伝子発現が起こるのであるという考えがひろく受け入れられていて,その遺伝子発現の開始が丁度胞胚中期に当ることから,このような変化はMBT(midblastula transition)(中期胞胚変移)と呼ばれることになっていたわけである。本研究では,外来性DNAとしてSV40ウイルスのプロモ-タ-をもつpSV2CATを用いて,そのCAT発現を発生の時期を追って調べた。この遺伝子こそはツメガエル受精卵に注入されるとMBT期に発現されるものであるとして報告されたものである。実際に注意深く調べなおすと,このようなウイルスのプロモ-タ-をもつ遺伝子の発現はすでに卵割期から起こっていることをはっきりと証明し,従来の学説の誤まりを正すことができた.また,同時に本実験ではツメガエルの筋肉のアクチン遺伝子のプロモ-タ-を含むCAT遺伝子の注入も行ない,このような発生的な調節を受けるプロモ-タ-を注入した場合,その下流の遺伝子はそのプロモ-タ-の特性に従って,神経胚期になってはじめて発現することを示した。2.上記の研究はすべて環状プラスミドを用いて行なったので,次に直鎖DNAのかたちで同じ実験を行なった。その結果,直鎖DNAでは上期のようなプロモ-タ-の特性が失なわれ,いずれも注入後間もなく、発生段階に無関係に発現されることが明らかとなった。ミュ-タントは検討中である。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] K.Shiokawa et al.: "Expression of exogenously introduced bacterial chloramplenicol acetyltransferase genes in Xenopus laevis embryos before the midblastula transition." Roux's Archives of Developmental Biology. 198. 322-329 (1990)
[Publications] Y.Fu et al.: "Expression of circular plasmids which contain bacterial Chloramphenicol acetyltransferase gene connectel to the promoter of poly peptide gene of human adenovirus type 12 in oocytes,eggs and embryos of xenopus laeris." Zoological Science. 7. 195-200 (1990)
[Publications] K.Shiokawa et al.: "Temporally uncontrolled expression of linearized plasmid DNA which carries bacterial chloramphenicol acetyltramsferase gene with Xenopus cardiac αーactin promoter after injection into Xenopus fertilized eggs." Roux's Archives of Developmental Biology. 199. 174-180 (1990)
[Publications] Y.Gotoh et al.: "In vitro effects on microtubule dynamics of purified Xenopus M phaseーactirated MAP Kinase" Nature. 349. 251-254 (1991)
[Publications] K.Shiokawa: "Gene expression from endogenous and exogenouslyーintroduced DNAs in early embryogenesis of Xenopus laevis" Development,Growth of Differentiation. (1991)
[Publications] Y.Atsuchi et al.: "Expression of embryoーspecific epidermal XK81 Keratin gene in dissociated cells of Xenopus laevis animal caps coーcultured with mesodermーinducing vegetal cells." Development,Growth of Differentiation.(1991)
[Publications] 塩川光一郎: "分子発生学ー細胞分化のしくみー" 東京大学出版会, 217 (1990)

1990 Fiscal Year Annual Research Report

ツメガエル正常胚およびミュ-タント胚に導入した外来性DNAの発現調節

Principal Investigator

塩川 光一郎 東京大学, 理学部, 教授 (20037295)

Research Products

[Publications] K.Shiokawa et al.: "Expression of exogenously introduced bacterial chloramplenicol acetyltransferase genes in Xenopus laevis embryos before the midblastula transition." Roux's Archives of Developmental Biology. 198. 322-329 (1990)

[Publications] Y.Fu et al.: "Expression of circular plasmids which contain bacterial Chloramphenicol acetyltransferase gene connectel to the promoter of poly peptide gene of human adenovirus type 12 in oocytes,eggs and embryos of xenopus laeris." Zoological Science. 7. 195-200 (1990)

[Publications] Y.Gotoh et al.: "In vitro effects on microtubule dynamics of purified Xenopus M phaseーactirated MAP Kinase" Nature. 349. 251-254 (1991)

[Publications] K.Shiokawa: "Gene expression from endogenous and exogenouslyーintroduced DNAs in early embryogenesis of Xenopus laevis" Development,Growth of Differentiation. (1991)

[Publications] Y.Atsuchi et al.: "Expression of embryoーspecific epidermal XK81 Keratin gene in dissociated cells of Xenopus laevis animal caps coーcultured with mesodermーinducing vegetal cells." Development,Growth of Differentiation.(1991)

[Publications] 塩川 光一郎: "分子発生学ー細胞分化のしくみー" 東京大学出版会, 217 (1990)

塩川光一郎東京大学, 理学部, 教授 (20037295)

[Publications] 塩川光一郎: "分子発生学ー細胞分化のしくみー" 東京大学出版会, 217 (1990)