1990 Fiscal Year Annual Research Report

微生物細胞溶解酵素生産菌の利用に関する研究

Research Project

Project/Area Number	01560223
Research Institution	Mie University
Principal Investigator	菅原庸三重大学, 生物資源学部, 教授 (80024826)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	木村俊夫三重大学, 生物資源学部, 助手 (50024831)
Keywords	微生物細胞溶解酵素 / 真菌細胞溶解微生物 / 溶菌酵素利用 / 海洋細菌 / 低温性溶菌酵素生産菌 / キチン分解菌
Research Abstract	1.5℃の低温で溶菌(細菌細胞溶解)能を有する菌株(Bacillus sp.T301,T303,E33株)は、ポリペプトン(0.5%)、酵母エキス(0.5%)を含む90%海水培地(pH7.0)で振盪培養すると培養液中に溶菌酵素を遊離した。溶菌酵素生産のための最適温度は13ー17℃付近であった。また、20ー25℃で分離した溶菌酵素生産菌Bacillus sp.V37株は溶菌酵素生産のための最適温度が24ー26℃付近にあり、低温で分離した溶菌酵素生産菌のそれよりも明らかに高温度域にあった。低温における溶菌酵素生産量は、V37株よりもT301,T303,E33株などの方が高い値を示した。一方、真菌細胞溶解菌No.5株は、ポリペプトン(0.5%)、酵母エキス(0.5%)を含む90%海水(あるいは0.3MNaCl)培地で30℃で約5ー6日間振盪培養すると培養液中に多量の溶菌酵素を蓄積した。 2.T301,T303,E33株により生産された溶菌酵素の活性の最適温度は30ー40℃付近にあったが、10℃付近でもかなりの溶菌能を有していた。また、No.5株により生産された真菌細胞溶解酵素の活性は、pH9付近、50ー60℃付近で最大であり、70℃、10分で完全に失活した。 NaCl、KCl、MgCl_2、CaCl_2、Na_2SO_4などの無機塩(0.05ー0.20M)及びロイペプチン、アンチパイン、ホスホラミドン、E64(0.1mM)などのタンパク分解酵素阻害剤は溶菌活性を阻害した。 3.分離したキチン分解菌のうち、キチン分解能の高い10株についてNo.5の溶菌酵素との併用による基質細胞溶解の強化を試みた結果、キチン分解菌Bacillus sp.F190株との協同作用により溶菌能を約1.5倍に増大せしめることができた。