1990 Fiscal Year Annual Research Report

Stretch Activated channelに関する定量的研究

Research Project

Project/Area Number	01570044
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	曽我部正博名古屋大学, 医学部, 助教授 (10093428)
Keywords	Stretch Activated Channel / 膜張力 / パッチクランプ / ビデオマイクロコピィ / 細胞骨格系
Research Abstract	本研究の目的は,申請者が開発中の画像ー電気信号同時計測システムを用いて,今まで不可能であったStretch Activated Channelの定量的刺激応答特性を得るとともに,膜容量の測定を通してこのChannelの活性化機構に関する分子メカニズムに迫ることである。本年度は同時計測システムのハ-ドウェアとソフトウェアがほぼ完成すると共に,膜伸展に伴なう膜容量の変化を測定することに成功した。 1,ハ-ドウェア:レ-ザ光学用のスライダと高精度直流モ-タを用い,パルス巾およびパルス高サ-ボコントロ-ルを組合わせることにより,0.1μm以下の制御精度,0.2μm15の分の安定性を有するリモ-トマニピュレ-タを製作した。また画像記録テ-プ上に書き込まれたタイムコ-ド(SIMPLE CODE)を位相ロック回路を用いてシリアルに読み出すデコ-ダを製作した。 2,ソフトウェア:デコ-ダからのタイムコ-ドをもとに任意のフレ-ムから任意の問隔で画像を拡張RAM上に取り込むプログラムを完成した。また電気信号収集プログラムを改良して,タイムコ-ドをモニタすることにより,電気信号と画像の周期がとれるようにした。さらに取り込んだ画像に適当なウィンドウをかけて,原画像を1/10程度に圧縮し,以後の処理速度を格段に向上させた。 3,膜容量測定:位相ロックインアンプを10KHzの正弦波で駆動することにより,機械刺激による膜伸展中の膜容量変化を測定した。この結果より,脂質2層膜は張力発生にあまり寄与せず,むしろ膜の裏打ち細胞骨格系がチャネルへ張力を伝えていることが示唆された。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Sokabe,M.: "Electrophysiological analysis of structural aspects of voltageーdependent SR K channel." Comp.Biochem.Physiol.
[Publications] Sokabe,M.: "Quantitative videmicroscopy of patch clamped membranes:stress,strain,capacitance,and stretch channel activation." Biophys.J.
[Publications] Sokabe,M.: "The structure and dynamics of patch clamped membranes:A study by using differential interference light microscopy." J.Cell Biol.111. 599-606 (1990)
[Publications] Nomura,K.: "Aminoglycoside blockade of Ca activated K channel from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar billayers." J.Membr.Biol.115. 241-251 (1990)
[Publications] Sachs,F.: "Stretch activated ion channels and membrane mechanics." Neurosci.Res.12. S1-4 (1990)
[Publications] Ito,F.: "Effects of ions and drugs on the responses of sensory axon terminals of decapsulated frog muscle spindles." Neurosci.Res.12. S15-26 (1990)
[Publications] Sokabe,M.: "Towards molecular mechanism of the gating in stretch activated channels.In “Comparative Aspect of Mechanoreceptin"(Ed.F.Ito)," Springer Verlag,

1990 Fiscal Year Annual Research Report

Stretch Activated channelに関する定量的研究

Principal Investigator

曽我部 正博 名古屋大学, 医学部, 助教授 (10093428)

Research Products

[Publications] Sokabe,M.: "Electrophysiological analysis of structural aspects of voltageーdependent SR K channel." Comp.Biochem.Physiol.

[Publications] Sokabe,M.: "Quantitative videmicroscopy of patch clamped membranes:stress,strain,capacitance,and stretch channel activation." Biophys.J.

[Publications] Sokabe,M.: "The structure and dynamics of patch clamped membranes:A study by using differential interference light microscopy." J.Cell Biol.111. 599-606 (1990)

[Publications] Nomura,K.: "Aminoglycoside blockade of Ca activated K channel from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar billayers." J.Membr.Biol.115. 241-251 (1990)

[Publications] Sachs,F.: "Stretch activated ion channels and membrane mechanics." Neurosci.Res.12. S1-4 (1990)

[Publications] Ito,F.: "Effects of ions and drugs on the responses of sensory axon terminals of decapsulated frog muscle spindles." Neurosci.Res.12. S15-26 (1990)

[Publications] Sokabe,M.: "Towards molecular mechanism of the gating in stretch activated channels.In “Comparative Aspect of Mechanoreceptin"(Ed.F.Ito)," Springer Verlag,

曽我部正博名古屋大学, 医学部, 助教授 (10093428)