1989 Fiscal Year Annual Research Report
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01570116
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| Research Institution | Kansai Medical University |
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Principal Investigator |
稲垣 千代子 関西医科大学, 医学部, 教授 (60025640)
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| Keywords | 脳 / Cl^- / 塩素イオン / ATP / イオンポンプ / 神経細胞 / Cl^-ーATPase / Cl^-ポンプ |
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| Research Abstract |
ラットの脳組織から調整したEDTA処理膜顆粒は、直径200〜500nmの閉鎖単層膜顆粒から成り、高いCl^--ATPaseおよびNa,K-ATPase活性を示した。この膜顆粒は、1mMウアバイン存在下で、浸透圧反応性のATP依存性Cl^-蓄積活性を示した。諸種ヌクレオチドのうち、ATP(Km=1.5mM)が最大Cl^-蓄積活性を示し、GTP、ITPおよびUTPが若干のCl^-蓄積活性を示したが、CTP、β、α-メチレンATP,ADPおよびAMPは、この活性を示さなかった。膜顆粒のATP依存性Cl^-取り込みは、Cl^-濃度依存性(Km=7.4mM)、pH依存性(至適pH7.4)および温度依存性(至適温度37-42℃)であった。エタクリン酸は用量依存性にCl^-取り込みを阻害し、Kiは57μMであった。N-エチルマレイミド(0.1mM)は、このCl^-取り込みを完全に阻害し、バナジン酸(1mM)も部分的阻害を示した。膜顆粒は、Cl^-取り込みに伴ってH^+を蓄積することなく、またCl^-取り込みはH^+輸送阻害剤であるDCCD(1mM)により全く影響されなかった。
これらの結果は、すでに報告した脳Cl^-ATPaseの諸性質とよく一致するものであり、脳の神経細胞膜に存在するCl^-ーATPaseが能動的にCl^-を輸送し神経細胞内外の大きなCl^-濃度勾配を形成する、との考えを強く支持するものである。
今後、このATP依存性の能動的Cl^-輸送(Cl^-ポンプ)が神経興奮によりどのように調節されているかを、培養神経細胞およびCl^-感受性蛍光色素を用いて、明らかにする予定である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Tsutomu Shiroya他: "An ATP-driven Cl^-pump in the brain." Journal of Biological Chemistry. 264. 17416-17421 (1989)
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[Publications] Tsutomu Shiroya他: "ATP-dependent and DCCD-insensitive Cl^- uptake by mimbrane vesicles from the rat brain plasma membrane fractions." Biochem.Biophys.Res.Commun.160. 459-463 (1989)
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[Publications] Reiko Fukunaga他: "ATP-dependent H^+ transport in synaptosomal membreane vesicles of the rat brain." Biochem.Biophys.Res.Commun.159. 1045-1050 (1989)
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[Publications] Masafumi Inoue他: "Intracerebroventricular injection of ethacrynic acid induces status epileptics." European Journal of Pharmacology. 166. 101-106 (1989)
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[Publications] Reiko Fukunaga他: "Effects of ethanal on synaptosomal membrane potential in the rat brain." Folia pharmacologica japonica. 94. 119-122 (1989)
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[Publications] Masafumi Inoue他: "Ethacrynic acid-induced convulsions and brain noradrenaline." European Journal of Pharmacology.
