1989 Fiscal Year Annual Research Report
マウス形質細胞腫の再編成c-myc癌遺伝子の発現制御に関する細胞工学的研究
Project/Area Number |
01570183
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
及川 恒之 北海道大学, 医学部, 助手 (80150241)
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Keywords | がん / マウス形質細胞腫 / c-myc / 雑種細胞 / 遺伝子発現 |
Research Abstract |
マウス形質細胞腫と正常マウス線維芽細胞との雑種細胞ては再編成c-mycの発現が抑制される。この再編成c-mycの発現抑制の組織特異性を知るため、マウス形質細胞腫とマウスT細胞性リンパ腫との雑種細胞を作成し、再編成c-mycの発現を検索した。その結果、マウス形質細胞腫の再編成c-mycは線維芽細胞の融合のみならず、T細胞リンパ腫の融合でも抑制された。この抑制は転写レベルで起こっていた。再編成c-myc発現に関与する蛋白因子同定のシステムを作るため、赤血球ゴ-スト法による核蛋白の抽入を試みたが、マウス形質細胞腫に線維芽細胞由来の核蛋白、上記雑種細胞に形質細胞由来の核蛋白の移入でも、再編成c-mycの発現レベルを動かすまでには到らず、この方面からの再編成c-mycの発現にポジティブ、ネガティブに働く因子の同定は断念せざるをえなかった。そこで、雑種細胞における核蛋白の変化を調べるため、polyomaエンハンサ-、免疫グロブリンC_2領域に類似配列のあるoctamer配列を用い、gel shift assayを行った。その結果、polyomaエンハンサ-に対する結合パタ-ンは造血系と線維芽細胞で行なっていたが、雑種細胞では両親細胞の和にならず、線維芽細胞のパタ-ンになっていた。また、octamer配列に対する結合パタ-ンは、雑種細胞ではOTF-1(Octl-1)は消えないが、OTF-2(Oct-2)が消失するという予備的結果を得た。従って、雑種細胞内では特定の組織特異的転写因子の発現が抑制されると推測され、雑種細胞はこれらの転写因子、DNA結合蛋白のトランスの制御機構を解析できる系としても有効と考えられた。予定より遅れたが、現在、EMBL-3に再編成c-mycをクロ-ニングしたので、この再編成c-myc(Cd領域)への核蛋白結合パタ-ンを両親細胞と雑種細胞とで比較検討している。
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[Publications] Hondoh,N.et al.: "Reduced DNase I sensitvity of the rearranged c-myc gene in somatic cell hybrids between murine plasmacytoma cells and fibroblasts" Exp.Cell Res.181. 579-583 (1989)
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[Publications] Oikawa,T.et al.: "Transcriptional down-regulation of the rearranged c-myc expression in murine cell hybrids between a plasmacytoma and a T-cell lymphoma" Int.J.Cancer. 45. (1990)
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[Publications] Li.S.Z.et al.: "Regional mapping of the FOS oncogene to rat chromosome 6q21-q23" Cytogenet.Cell Genet.52. 42-44 (1989)
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[Publications] Suzuki,Y.et al.: "Immunological regression of metastasis cancer in the liver by“in vitro xenogenization"." Cancer Res.(1990)
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[Publications] Oikawa,T.: "Repression of the rearranged c-myc expression in murine cell hybrids" Hok.J.Med.Sci.65. (1990)
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[Publications] Kondoh,N.et al.: "Effect of sodium butylate on the c-myc expression in mouse plasmacytoma" Genes,Chromosomes and Cancer.
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[Publications] 及川恒之 他: "血液科学シリ-ズ「B細胞腫瘍」実験的形質細胞腫を用いた発癌の研究" 高月清編,西村書店, (1990)