1989 Fiscal Year Annual Research Report
主要組織適合性抗原クラスI遺伝子の転写制御と発癌臓器移植
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01570279
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
横山 一成 理化学研究所, ジーンバンク室, 研究員 (80182707)
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| Keywords | マウスクラスI抗原 / アデノウィルスーEIA / 転写制御 |
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| Research Abstract |
アデノウィルス12型による感染時のクラスI抗原遺伝子の転写制御機構を明らかにする目的で、クラスIHー2K^<bml>遺伝子のプロモ-タ-流域に焦点をあて解析をすすめた。まずマウスクラスI抗原Hー2K^<bml>及びHー2K^b遺伝子の転写制御に関与するプロモ-タ-領域の全塩基配列を決定し、アデノウィルス12型ElAによる、正及び負のコントロ-ルエレメントを同定した。負に作用する領域ー1994〜1051間の失欠変異株を用いてプロモ-タ-に及ぼす影響を調べた結果、-1836〜-1521内に存在するTATA Box様の配列及び、その前後の領域、特にCAA反復配列が重要である。これらの領域を細分化したフラグメントを用いて、ゲルシフト法及び、footprint法で核内蛋白質の特異的な結合を調べた結果、複数の因子の共同作用が負の制御に必要である事が示唆された。又、免疫PCR法という、新しい技術を開発し、これによって。アデノウィルスEIA蛋白質が直接、会合している核内転写制御因子を同定した結果、この負の領域及びTATABoxを、同定することに成功した。現在、更に、核内制御蛋白質及びEIA遺伝子産物の会合状態を検討するために、大腸菌でEIA蛋白質を合成させる試みを行なっている。一方、正に作用するエレメントは、従来までに知られているクラスI抗原遺伝子エンハンサ-配列であった。これらの領域に結合する核内蛋白質の結合パタ-ンに、非感染と感染細胞間で差を見いだした。これらの蛋白質の分子構造を明らかにするのが第II期の目的である。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] S.Katoh,K.Ozawa,S.Kondoh,E.Soeda,A.Israel,K.Shirochi,K.Fujinaga,K.Ichihara.G.Gacheliv,& K.Yokoyama: "Ideritification of Sequences responsible for positive and negative regulation by EIA in the promoter of Hー2K^<bml> class I MHC gene." The EMBO Journal. 9. 127-135 (1990)
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[Publications] k.Ozawa,F.Saka,K.Kitabayashi,T.Imai,E.Soeda,A.Israel,P.Kousilsky,G.Gachelin & K.Yokoyama: "Genetic aualysis of the promotion regions of Mー2K^b and Hー2K^<bml> class I MHC genes" Nuc,Acid.Res.
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[Publications] K.Ogawa,F.Saka,G.Gachelin & K.Yokoyama: "Repression of mouse Hー2K^b major histocompatibility antigen class I gene by adeno virus EIA is mediated by AACAAA motifs" The EMBO Journal.
