1989 Fiscal Year Annual Research Report

天疱瘡における水疱発生機序の分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	01570566
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	橋本公二大阪大学, 医学部, 助教授 (00110784)
Keywords	ウロキナ-ゼ / mRNA / 表皮細胞 / Northern Blot / 天疱瘡 / RNA probe / 新生児マウス / 水疱形成
Research Abstract	1.天疱瘡抗体による培養表皮細胞のウロキナ-ゼmRNAの上昇の確認。 1.8mMCa^<++>を含む培養液中にて培養し、天疱瘡抗原を十分発現したヒト培養表皮細胞の培養液中に尋常性天疱瘡患者血清よりProteinA SepharoseおよびLysine Sepharoseを用いて精製した天疱瘡抗体IgGを加え、一定時間培養した後、表示細胞のRNAを抽出し、Northern Blot法にて検討した。ProbeはMeltonらの方法に従い、pSP64に610bpのウロキナ-ゼDNAを挿入したものをテンプレ-トとして作成したRNA probeを用いた。まず8mg/mlの尋常性天疱瘡抗体IgGと正常人由来のIgGを加え、1,3,24時間のウロキナ-ゼmRNAを検討した所、3時間目で、尋常性天疱瘡抗体IgGにより著名なウロキナ-ゼmRNAの上昇が認められた。次にこの尋常性天疱瘡抗体IgGの濃度に依存しているかどうかを確認するために、2名の患者より得たIgGを用いて、0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0mg/mlの濃度で検討した。1名の患者のIgGでは、4mg/mlで0mg/mlに比し、約2.5倍の増加があり、もう1名の患者のIgGを加えた場合には、8mg/mlで4.5倍の増加が認められた。この増加は濃度依存性であった。この時Actin mRNAは全く変動していなかった。これらの結果より、尋常性天疱瘡IgG表皮細胞におけるウロキナ-ゼ活性の上昇には、ウロキナ-ゼmRNAの増加を伴う事が確認された。 2.新生児マウスを用いた実験的天疱瘡モデルの確立本実験では大量の天疱瘡抗体IgGを必要とするため、Protein A SepharoseおよびLysine Sepharoseにて精製したIgG分画を用いて行った。30〜50mg/mlの濃度として100ulを新生児マウスの腹腔内に投与を繰り返した所、水疱形成が出現し、組織学的にも天疱瘡様水疱であるである事が確認された。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 橋本公二: "天疱瘡抗体による表皮細胞における(uーPA)mRNAの誘導" 日本皮膚科学会雑誌. 99. 1359-1360 (1989)
[Publications] K.Hashimoto: "Characterization of Keratinocyte Plasminogen Activator lnhibitors and Demonstration of the Revention fo Pemphigus IgGーlnduced Acantholysis by Purified Plasminogen Activator lnhibitor" Dermatology Digest. 9. 14-15 (1989)
[Publications] K.Hashimoto,et al.: "Growhtーinhibitory effects of 1,25ーdihydroxy vitaminD_3 on normal and psoriatic keratinocytes" Br.J.Dermatol. (1990)
[Publications] K.Matsumoto K.Hashimoto,et al.: "Growthーinhibitory effects of 1,25ーdihyclroxyvitamin D_3 on normal human keratinocytes clutured in serumーfree medium" Biochem Biophys.Res Commun. 166. 916-923 (1990)
[Publications] K.Matsumoto K.Hashimoto,et al.: "Effect of 1,24ーdihydroxyvitamin D_3 on the growth of human Keratinocytes." J.Dermatol.
[Publications] K.Matsumoto K.Hashimoto,et al.: "Modulation of growth and differentiation in normal human keratinocytes by transforming growth facterーβ" J.Cell.Physiol.
[Publications] 松本邦夫,橋本公二他(分担): "“細胞膜各種レセプタ-の局在と測定"「現代皮膚科学大系年間版" 中山書店, (1989)
[Publications] 橋本公二他(分担): "“皮膚と細胞成長因子"「現代皮膚科大系年刊版」" 中山書店,

1989 Fiscal Year Annual Research Report

天疱瘡における水疱発生機序の分子生物学的研究

Principal Investigator

橋本 公二 大阪大学, 医学部, 助教授 (00110784)

Research Products

[Publications] 橋本公二: "天疱瘡抗体による表皮細胞における(uーPA)mRNAの誘導" 日本皮膚科学会雑誌. 99. 1359-1360 (1989)

[Publications] K.Hashimoto: "Characterization of Keratinocyte Plasminogen Activator lnhibitors and Demonstration of the Revention fo Pemphigus IgGーlnduced Acantholysis by Purified Plasminogen Activator lnhibitor" Dermatology Digest. 9. 14-15 (1989)

[Publications] K.Hashimoto,et al.: "Growhtーinhibitory effects of 1,25ーdihydroxy vitaminD_3 on normal and psoriatic keratinocytes" Br.J.Dermatol. (1990)

[Publications] K.Matsumoto K.Hashimoto,et al.: "Growthーinhibitory effects of 1,25ーdihyclroxyvitamin D_3 on normal human keratinocytes clutured in serumーfree medium" Biochem Biophys.Res Commun. 166. 916-923 (1990)

[Publications] K.Matsumoto K.Hashimoto,et al.: "Effect of 1,24ーdihydroxyvitamin D_3 on the growth of human Keratinocytes." J.Dermatol.

[Publications] K.Matsumoto K.Hashimoto,et al.: "Modulation of growth and differentiation in normal human keratinocytes by transforming growth facterーβ" J.Cell.Physiol.

[Publications] 松本邦夫,橋本公二 他(分担): "“細胞膜各種レセプタ-の局在と測定"「現代皮膚科学大系年間版" 中山書店, (1989)

[Publications] 橋本公二他(分担): "“皮膚と細胞成長因子"「現代皮膚科大系年刊版」" 中山書店,

橋本公二大阪大学, 医学部, 助教授 (00110784)

[Publications] 松本邦夫,橋本公二他(分担): "“細胞膜各種レセプタ-の局在と測定"「現代皮膚科学大系年間版" 中山書店, (1989)