胎児性膵抗原(FAP)に対するモノクロナ-ル抗体の作製とその臨床応用

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01570740
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 江里口 正純 東京大学, 医科学研究所, 助手 (10114406)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 清水 浩 東京大学, 医科学研究所, 助手 ; 藤井 祐三 東京大学, 医科学研究所, 助手 (40143515) ; 森 茂郎 東京大学, 医科学研究所, 教授 (30010424)
• Keywords: FAP(Feto-acinar Pancreatic Protein) / J-28モノクロ-ナル抗体 / 膵癌 / 腫瘍マ-カ- / 胎児性癌抗原

Research Abstract

1.胎児及び膵病変時のFeto-acinar pancreatic Protein(FAP)の膵での発現性について、J-28モノクロ-ナル抗体を用いて免疫組織学的に検討し、染色強度と染色面積の積により染色スコア(S.S.)にて表示した。
(1)胎児膵では、20-25週令をピ-ク(S.S.=10.1±1.6)として腺房細胞が強く染色され、その後は次第に弱くなる傾向がみられた。
(2)成人では、正常膵9/12(S.S.=2.0±1.5)、慢性膵炎16/16(S.S.=4.0±1.9)、膵癌37/37(S.S.=6.5±3.1)、他癌の膵浸潤9/9(S.S.=5.8±3.4)がFAP陽性を示した。膵癌と他癌の膵浸潤間では有意差を認めなかったが、その他の群間では、すべて有意差を示した。(P<0・02)
2.膵液の採取及びFAPの精製
(1)膵癌、慢性膵炎、胆石症などの患者より、術中あるいは内視鏡的(ERCP)に純粋膵液50検体を採取できた。
(2)膵癌患者膵液を用いて、SDS-PAGE後分子量75-130K.Dの間でGel Slideし、Extrapharにて蛋白を回収後、HPLCにてFAPを精製することができた。現在、精製FAPを用いてマウスに免疫を開始したところであり、FAPのアミノ酸分析も計画中である。
3.膵液中のFAPの測定及び他の腫瘍マ-カ-との比較ELISA(固相法)により膵液中のFAPを測定した。膵癌群15例中10例が陽性を示し、Sensitivity67%、Specificity87%であった。同時にCEA、CA19-9、CA-50、DUPAN-2を測定したが、FAPとの相関を示した腫瘍マ-カ-はなかった。FAPとDUPAN-2とのCombination assayによりSensitivityは80%と上昇し、この2種の組み合わせが一番良いと思われた(Specificity=83%)。しかしながら、血清中のFAPは膵液に比べ低濃度のためこの方法では測定できなかった。現在、より感度の鋭敏なSandwich assayを計画中である。

Research Products

• [Publications] 藤井祐三: "胎児性膵蛋白(Feto-Acinar Pancreatic Protein,FAP)と反応するモノクロ-ナル抗体の作製とその臨床的意義" Oncologia. 22. 85-91 (1989)
• [Publications] 清水浩: "膵液中のFAP(Feto-Acinar Pancreatic Protein)検索の有用性について" 第8回腫瘍マ-カ-研究会記録. 4. 23-25 (1989)
• [Publications] 藤井祐三: "FAPと反応するモノクロ-ナル抗体(J-28)" 日本臨床. inpress (1990)
• [Publications] 藤井祐三: "FAPと反応するモノクロ-ナル抗体(Moo-26)の作製と免疫生化学的検討" 第9回腫瘍マ-カ-研究会記録. 5. inpress (1990)
• [Publications] 清水浩: "膵液中のFeto-Acinar Pancreatic Protein測定の有用性ーCEA,CA19-9,CA50,DUPAN-2との比較ー" 第9回腫瘍マ-カ-研究会記録. 5. inpress (1990)
• [Publications] 清水浩: Br.J.Cancer.