1990 Fiscal Year Annual Research Report
神経成長因子の褐色細胞腫PC12細胞分化作用に対する細胞外ATPの影響
| Project/Area Number |
01571027
|
|---|
| Research Institution | Meikai University |
|---|
Principal Investigator |
山田 正三 明海大学, 歯学部, 教授 (30049358)
|
|---|
| Keywords | 細胞外ATP / 褐色細胞腫細胞PC12 / 神経成長因子 / 細胞内カルシウム / P_2プリナ-ジックリセプタ- / カルシウムチャンネル / 神経細胞分化 |
|---|
| Research Abstract |
細胞外ATPの褐色細胞腫PC12細胞に対する効果,およびこの細胞への神経成長因子の作用に対する効果についてPC12細胞のサブクロ-ンの一つであるPC12h細胞を用いて検討し,以下の結果を得た.
1.ATPは細胞内Ca^<2+>イオン濃度を上昇させる.このCa^<2+>上昇は細胞外液のCa^<2+>のinflux(60〜80%)と細胞内貯蔵Ca^<2+>のmobolization(20〜40%)との両者によるものである.この両者の間での比率については細胞の密度,細胞分化の程度,その他未同定の要因によって変化する.
2.各種ヌクレオチドおよびATPアナログを用いた細胞内Ca^<2+>上昇についての実験結果は,ATPによるCa^<2+>influxはP_2プリナ-ジックリセプタ-のsubtypeのうちP_<2y>リセプタ-によって媒介されること,またP_<2y>リセプタ-にリンクしたligandーgated Ca^<2+>チャンネルが存在することを示した.
3.ATPによってCa^<2+> mobolizationが起きることは,ホスホリパ-ゼC活性化・イノシト-ル3りん酸合成促進につながるP_2リセプタ-の存在を示唆している.これがP_<2y>以外のsubtypeによるのかP_<2y>の内のさらに細かいsubtypeによるかはまだ不明である.
4.ATPはPC12h細胞からのカラコ-ルアミン(ド-パミン,DO)の放出を誘起した.DO放出は分化した細胞では大部分がinfluxに由来するCa^<2+>に依存しているが、seding直後の未分化な細胞ではinfluxよりもmobilizationに由来するCa^<2+>がDO放出に大きく働いているという結果を得た.
5.EctoーATPase,ectoーkinaseについては培養液中に添加したATPの代謝速度の面から検討中である.
|
-
[Publications] Nobuo NAKANISHI: "Simultaneous determination of GTP cyclohydrolase activity and biopterin content in pheochromocytoma PC12h cells." J.Meikai Univ.Sch.Dent.19. 197-203 (1990)
-
[Publications] Kaoruko AONO: "Increase in intracellular Ca^<2+> level and modulation of nerve growth factor action on pheochromocytoma PC12h cells by extracellular ATP." J.Meikai Univ.Sch.Dent.19. 221-229 (1990)
-
[Publications] Nobuo NAKANISHI: "Effect of actinomycin D and cycloheximide on the nerve growth factorーinduced increase in biopterin level of pheochromocytoma PC12h cells." Pteridines and Related Biogenic Amines in Neuropsychiatry, Pediatrics Pediatrics, and Immunology 1990.(Blau,N.,Curtius,H.Ch.,Levine,R.A.&Cotton,G.H.R.,eds.)Lakeshore Publishing,Grosse Pointe.(1991)
-
[Publications] Nobuo NAKANISHI: "GTP cyclohydrolase of pheochromocytoma PC12h cells: Effect of nerve growth factor treatment of the cells." Pteridines and Related Biogenic Amines in Neuropsychiatry,Pediatrics Pediatrics,and Immunology 1990.(Blau,N.,Curtius,H.Ch.,Levine,R.A.&Cotton,G.H.R.,eds.)Lakeshore Publishing, Grosse Pointe.(1991)
