1989 Fiscal Year Annual Research Report

ミトコンドリアF_1F_0ーATPase活性調節サブユニットの作用機作一変異導入による調節サブユニットの機能解析

Research Project

Project/Area Number	01580161
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	橋本忠雄大阪大学, 医学部, 助教授 (10028524)
Keywords	酸化的りん酸化反応 / F_1iF_OーATPase / 活性調節因子 / ATPaseインヒビタ- / 9K蛋白 / 15K蛋白
Research Abstract	1.調節サブユニット欠失変異株酵母の作成すでにATPaseインヒビタ-、9K蛋白を欠失した変異株酵母を作成しているので、本研究ではさらに15K蛋白を欠失した酵母の作成をめざした。15K蛋白をコ-ドする遺伝子をクロ-ニングし、同遺伝子の中にヒスチジン合成酵素遺伝子を導入し、相同組換により15K遺伝子の欠失した酵母を作成した。同蛋白の欠失はウエスタンブロット法およびHPLC分析により確認した。 2.各調節サブユニット欠失酵母、およびミトコンドリアの性質 ATPaseインヒビタ-、9K蛋白および15K蛋白のいずれを欠失した酵母を作成しても、それぞれの酵母は非発酵性糖源(グリセロ-ル等)を利用して成育できた。また各変異株酵母より分離したミトコンドリアは正常のミトコンドリアと同じ速度でATPを合成した。これらのことは三調節因子いずれもATP合成には直接関与していないことを示している。しかしATPaseインヒビタ-を欠失したミトコンドリアはATP分解反応においては他のミトコンドリアとは異る性質を示した。即ち、ミトコンドリア膜ポテンシヤルの存在するあいだはいずれのミトコンドリアにおいてもATPを合成し、ATP分解は行わないが、ミトコンドリアの膜ポテンシャルが低下、消失した時には、ATPaseインヒビタ-を欠失したミトコンドリアのみにおいて強いATP分解が観察された。15K、9K蛋白を欠失した場合には若干のATP分解が起きたが一過性であった。これらのことはミトコンドリアの膜ポテンシャルに対応したATPaseインヒビタ-のF_1F_0ーATPaseへの結合・解離機構があることを示し、ATPaseインヒビタ-は膜ポテンシャルが低下した時F_1iF_OーATPaseに結合し、ATPの無駄な水解を防いでいることが明らかになった。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Tadao Hashimoto,Yukio Yoshida and Kunio Tagawa: "Regulatory proteins of F_1F_0ーATPase ーRole of ATPase inhibitorー" J.Bioenerg Biomembr. 22. 27-38 (1990)
[Publications] Naoki Ichikawa,Yukio Yoshida,Tadao Hashimoto,Naoki Ogasawara,Hroshi Yoshikawa,Fumio Imamoto and Kunio Tagawa: "Activation of ATP Hydrolysis by an Uncoupler in Mutant Mitochondria Lacking an Intinsic ATPase Inhibitor in Yeast" J.Biol Chom.265. (1990)
[Publications] Yukuo Yoshida,Takeya Sato,Tadao Hashimoto,Naoki Ichikawa,Kunio Tagawa: "Isolation of A gene for A Regulatory Subnit,15K protein,of Mitochondrial F_1F_0ーATPase and Construction of Mutant Yeast Lacking the protein" Eur.J.Biochem.
[Publications] Tadao Hashimot,Yukuo Yoshida and Kunio Tagawa: "Simultaneous Brindings of ATPase Inhibitor and 9K protein to F_1F_0ーATPase by the Aid of 15K Protein in Yeast" J.Biochem.
[Publications] Tadao Hashimoto,Hiroshi Mimura,Yukuo Yoshida,Naoki Ichikawa and Kunio Tagawa: "Biaenergetics: Molecular Biology,Biochemistry and pathology" Plenum Publishing Co.,New York(C.H.Kim and T.Ozawa eds), 300 (1990)

1989 Fiscal Year Annual Research Report

ミトコンドリアF_1F_0ーATPase活性調節サブユニットの作用機作一変異導入による調節サブユニットの機能解析

Principal Investigator

橋本 忠雄 大阪大学, 医学部, 助教授 (10028524)

Research Products

[Publications] Tadao Hashimoto,Yukio Yoshida and Kunio Tagawa: "Regulatory proteins of F_1F_0ーATPase ーRole of ATPase inhibitorー" J.Bioenerg Biomembr. 22. 27-38 (1990)

[Publications] Naoki Ichikawa,Yukio Yoshida,Tadao Hashimoto,Naoki Ogasawara,Hroshi Yoshikawa,Fumio Imamoto and Kunio Tagawa: "Activation of ATP Hydrolysis by an Uncoupler in Mutant Mitochondria Lacking an Intinsic ATPase Inhibitor in Yeast" J.Biol Chom.265. (1990)

[Publications] Yukuo Yoshida,Takeya Sato,Tadao Hashimoto,Naoki Ichikawa,Kunio Tagawa: "Isolation of A gene for A Regulatory Subnit,15K protein,of Mitochondrial F_1F_0ーATPase and Construction of Mutant Yeast Lacking the protein" Eur.J.Biochem.

[Publications] Tadao Hashimot,Yukuo Yoshida and Kunio Tagawa: "Simultaneous Brindings of ATPase Inhibitor and 9K protein to F_1F_0ーATPase by the Aid of 15K Protein in Yeast" J.Biochem.

[Publications] Tadao Hashimoto,Hiroshi Mimura,Yukuo Yoshida,Naoki Ichikawa and Kunio Tagawa: "Biaenergetics: Molecular Biology,Biochemistry and pathology" Plenum Publishing Co.,New York(C.H.Kim and T.Ozawa eds), 300 (1990)

橋本忠雄大阪大学, 医学部, 助教授 (10028524)