アセチルコリン合成酵素遺伝子及びその関連遺伝子の構造と発現調節機構の解明

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01580176
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 伊藤 信行 京都大学, 薬学部, 助教授 (10110610)
• Keywords: アセチルコリン / 遺伝子構造 / 神経伝達物質

Research Abstract

我々は既にDrosophilaのアセチルコリン合成酵素部分cDNA(翻訳配列:2.2Kbp、3.-非翻訳配列:0.3Kbp)を単離しているが、Northern analysisから本酵素mRNAのサイズは約4.7Kbpと推定され、また、単離されたcDNAには開始コドンが見出されなかった。従って、full-length cDNAを単離する目的で、部分cDNAをプロ-ブとして、Drosophila頭部のcDNAライブラリ-をスクリ-ニングし、いくつかのクロ-ンを得た。そのうち、最長のサイズのcDNA(約3.6Kbp)について塩基配列を決定したところ、このcDNAはポリ(A)構造を含む完全な3'-非翻訳配列(約1.4Kbp)を含むことが明らかになったが、翻訳配列については、先に単離したcDNAとほとんど同一であり、開始コドンは見出されなかった。従って、さらに、5'-末端側の構造を明らかにする目的で、単離されたcDNAの5'末端配列に対応するオリゴヌクレオチドをプロ-ブとしてcDNAライブラリ-を再スクリ-ニングし、約3.8KbpのcDNAを単離した。そのcDNAの塩基配列を決定したところ、すでに単離されたcDNAより200bp程5'-末端側に長いcDNAであることが明らかになった。その塩基配列から、翻訳配列と同じreacling frame内に翻訳開始コドン(AUG)がないのにかかわらず、5'-末端近くに終止コドンが見出されることが明らかになった。この結果と、最近McCamanらによって報告された結果(Molecular Brain Res,3,107-114(1988))と考えあわせると、Drosophilaのアセチルコリン合成酵素はAUG以外のコドンを開始コドンとしている可能性が高いと考えられた。また、5'非翻訳配列が約1.0Kbpと非常に長く、このことも興味ある知見と考えられた。

Research Products

• [Publications] N.Itoh: "The complete nucleotide sequence of cDNA for a Drosophila ribosomal protein with homology to rat ribosomal protein S26" Nucleic Acids Res. 17. 441 (1989)
• [Publications] N.Itoh: "The nucleoticle sequence of a gene for putative ribosomal protein S31 of Drosophila" Nacleic Acids Res. 17. 2121 (1989)
• [Publications] 伊藤信行: "Drosophila アセチルコリン合成酵素遺伝子及びその関連遺伝子の構造について" 京都産業大学 国土利用開発研究所紀要. 8. 21-30 (1989)
• [Publications] H.Okamoto: "Molecular Biology of Islets of Langerhans" Cambridge Univ Press, 352 (1990)
• [Publications] 垂井清一郎: "糖尿病学" 朝倉書店, 576 (1990)